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d'oxyde de carbone. La première méthode ne serait applicable qu'au sang lui-même, 

 puisque, ainsi qu'il a été dit, le vide n'enlève pas aux solutions pures d'oxyhémoglobine 

 tout leur oxygène. De plus l'oxygène peut entrer en combinaison avec d'autres élé- 

 ments dissous diins le liquide, ce qui rend préférable dans des études d'absorptiométrie 

 l'emploi de l'oxyde de carbone (Hûfner). Mais cette méthode est d'un maniement diffi- 

 cile : elle nécessite des appareils spéciaux, compliqués, et les grands écarts qui régnent 

 entre les résultais des auteurs qui ont établi la capacité de l'hémoglobine pour ce gaz, 

 ne sont pas faits pour encourager à suivre cette voie. 



Si l'on s'y résolvait, il faudrait employer le facteur de HIiI'Ner, d'après lequel à 

 1 gramme d'hémoglobine correspond l",338 de gaz. 



b) Méthode chimique. — ScuuTZENBF.itr.ER et Risler, suivis par Lambling (24), ont 

 déterminé par titration direcle au moyen d'une solution d'hydrosulfite de soude la 

 quantité d'oxygène qui se trouve en combinaison labile avec l'hémoglobine. D'après 

 cette méthode, Lambling obtint des chiffres notablement plus élevés que ceux que l'on 

 est en droit de considérer actuellement comme répondant à la réalité. Il serait hasardé, 

 dans ces conditions, de recourir à cette méthode. 



Méthodes optiques. — Celles-ci comprennent des méthodes basées sur l'intensité du 

 pouvoir colorant de la solution, méthodes colorimétriques, d'autres fondées sur l'appré- 

 ciation de la quantité de lumière absorbée par la solution. Parmi ces dernières, se 

 range la spectrophotométrie. 



Dans la méthode colorimétrique, on dilue progressivement le sang ou le liquide 

 contenant de l'hémoglobine par des additions successives de quantités mesurées d'eau 

 distillée, jusqu'à ce que la coloration soit devenue égale à celle d'un étalon. Cet étalon 

 sera, soit une dilution à titre connu de sang normal, soit une solution d'une substance 

 colorante, telle que le picrocarmin, dont la teinte et le spectre sont très rapprochés de 

 ceux de l'oxyhémoglobine, soit un verre coloré. 



Au lieu de diluer progressivement la liqueur, on peut faire varier son pouvoir colo- 

 rant en l'examinant sous différentes épaisseurs, ce qui s'obtiendra par exemple en l'in- 

 troduisant dans un vase prismatique à base triangulaire allongée, que l'on déplacera 

 latéralempnt devant l'œil. On détermine alors quelle est l'épaisseur de solution qui 

 possède le même pouvoir colorant que l'étalon. Enfin l'opération peut être inverse, 

 c'est-à-dire que ce sera l'étalon dont l'épaisseur sera variable. 



Les différents appareils et procédés, aussi nombreux que les auteurs qui se sont 

 occupés du dosage de l'hémoglobine par voie colorimétrique, reviennent à l'un ou 

 l'autre de ces types. Seuls, les plus connus seront déciits ici succinctement : 



Procédé de F. Hoppe-Seyler. Hématinomètre. — Le procédé primitif de Hoppe-Seyler 

 consistait à comparer le pouvoir colorant de deux solutions introduites dans deux cuves- 

 adjacentes de verre, à faces parallèles, d'une épaisseur de 1 centimètre. L'une des cuves 

 contenait une solution pure d'hémoglobine de titre connu, dans l'autre était introduit 

 un volume connu de la liqueur étudiée. On ajoutait à cette dernière des quantités 

 mesurées d'eau distillée jusqu'à égalité de teinte. La comparaison se faisait par 

 réflexion sur fond blanc (feuille de papier blanc placée derrière les cuves). 



Le grand inconvénient de la méthode, c'est la difficulté de se procurer une solution 

 étalon de titre exact, solution qui s'altère d'ailleurs très rapidement. 



Pour obvier à ce défaut, Rajewsry (62), élève de Hoppe-Seyler, proposa de remplacer 

 la solution titrée d'oxyhémoglobine par une solution ammoniacale de picrocarmin. 



Procédé de l'échelle liquide. — Welcker (1834) fait extemporanément avec du sang 

 normal une série de dilutions à titres différents auxquelles il compare la solution, dont 

 la teneur doit être déterminée. Celte méthode est tout au plus approximative, en raison 

 même du maiHjue de précision dans la confection des tubes étalons. 



QuiNCKE (1878) remplace les tubes de sang normal dilué par des solutions de picro- 

 carmin de concentration variée, introduites dans vingt tubes thermométriques fixés sur 

 un cadre de carton. La comparaison se fait sur fond blanc. 



Procédé de Hayem (63). — Hayem emploie un appareil composé de deux anneaux de 

 verre de même diamètre, à surface extérieure dépolie, collés côte à côte sur une plaque 

 de verre. Ils ont été usés au niveau des points tangents, de façon à former deux petits 

 réservoirs identiques, séparés par une mince cloison et pouvant contenir chacun un peu 



