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HEMOGLOBINE. 



tallin. Mais l'obtention des cristaux d'hémoglobine réduite est rendue plus difficile à 

 raison de la grande solubilité de cette substance. Cependant il y a longtemps que 

 RoLLETT (1865), KûHXE (1865), arrivèrent à en obtenir des cristaux. Le sang de cheval 

 semble se prêter particulièrement à la préparation de cristaux d'hémoglobine réduite. 

 Quand, pendant la préparation de cristaux d'oxyhémoglobiue, provenant du sang de cet 

 animal, on ne prend pas soin d'oxygéner complètement la substance colorante, on 

 obtient souvent, d'après HCfner (8), un mélange de cristaux prismatiques et de tables 

 hexagonales. Si l'on examine au microscope la préparation sans la couvrir, de façon 

 à donner libre accès à l'air, on voit se dissoudre rapidement les tables hexagonales, et 

 à l'endroit de leur disparition apparaissent des faisceaux de prismes allongés d'oxyhé- 

 moglobine. 



Déjà en 1886, Nencki et Sieber avaient décrit un procédé permettant de les obtenir 



en grande quantité. Ultérieurement 

 Arthus et RoucHY (7) ont fait connaître 

 une méthode simple «l'obtention de 

 cristaux d'hémoglobine de cheval. Ils 

 séparent des globules de cheval par 

 centrifugation, les lavent deux fois au 

 chlorure sodique et les abandonnent 

 à la température du laboratoire jusqu'à 

 établissement d'une putréfaction in- 

 tense. On les laque alors par un volume 

 d'eau, on ajoute 1/4 de volume d'al- 

 cool à 95 p. 100 et on abandonne la 

 0.5 liqueur pendant 24 heures à une tem- 

 Q 2 pérature inférieure à 0° dans un vase 

 étroit et profond. Dans le fond de Té- 

 prouvette se sont accumulées après ce 

 temps une quantité énorme de (ablettes 

 hexagonales noires et brillantes, de 

 ■2 à 3 millimètres de diamètre, qui sont 

 des cristaux d'hémoglobine réduite. 

 Examinés en lumière polarisée, les 



0.9 



0.8 

 0.7 

 0.6 

 0.5 

 0.4 



O.l 







aCB D 



FiG. 64. — Absorption de la lumière du spectre de l'hémo 

 globine réduite à différentes concentrations (Rollett). 



cristaux d'hémoglobine réduite pré- 



sentent de façon très marquée des phénomènes de pléochroïsme (Ewald) (H). Certains 

 cristaux sont rouge pourpre à l'instar d'une solution ammoniacale de carmin, d'autres 

 présentent une coloration bleu pourpre, d'autres enfin sont presque complètement 

 incolores. Chaque cristal présente individuellement, suivant la situation du nicol, deux 

 de ces teintes. On trouve ainsi des exemplaires des trois combinaisons de ces trois 

 teintes deux à deux. Le pouvoir dispersif du cristal est différent suivant les axes optiques. 



Les solutions concentrées d'hémoglobine réduite examinées par réflexion en couche 

 épaisse apparaissent rouge foncé. En couche mince ou en solution étendue, elles 

 sont verdâtres (Brucre). Ce dichroïsme s'observe également dans le sang veineux ou 

 asphyxique. Il est propre à l'hémoglobine réduite. Ni l'hémoglobine oxygénée, ni les 

 composés avec l'oxyde de carbone ou l'oxyde d'azote ne le présentent. 



Le spectre d'absorption des solutions diluées d'hémoglobine réduite diffère essen- 

 tiellement de celui de l'oxyhémogiobine en ce que les deux bandes d'absorption (a 

 et [i] de celles-ci sont confondues en une seule (y). 



Par l'augmentation de la concentration, cette bande s'élargit rapidement vers la 

 partie droite du spectre (jui est elle-même obscurcie. Le diagramme ci -dessus, àù à 

 RoLLETT, montre bien ces particularités (fig. 64). 



Les solutions d'hémoglobine réduites absorlient plus avidement les rayons compris 

 entre C et D et moins fortement ceux situés entre F et G que les soiulions correspon- 

 dantes d'oxyhémoglobine. 



La bande d'absorption de Soret est légèrement déplacée vers la gauche dans les 

 solutions d'hémoglobine réduite. (Voir la figure page 328). 



La déterminalicn des constantes spectrophotojnrtriques de l'hémoglobine réduite, 



