HEMOGLOBINE. i>" 



ment an microscope. Ce procédé, excellent pour l'examen médico-légal des taches de 

 saii^', se piête mal à l'obtention de grandes quantités d'hémine. 



Sarda et Caffort (198) ont préconisé récemment la technique suivante : on laisso 

 dessécher sur la lame la gouttelette de sang, on ajoul.fi une goutte d'eau de chlore, une 

 goutte de pyridine et une gouttelette de sulfate ammonique. On couvre d'une lamelle. 

 Très rapidement il se forme des cristaux d'hémine. 



Procédé de Nencki et Sieber (97). — Des globules ronges, débarrassés du sérum 

 par lavage à l'eau salée, sont coagulés par deux volumes d'alcool éthylique. Après 

 séchage à l'air pendant vingt-quatre heures, le coagulum est mis en suspension dans de 

 l'alcool aniylique à raison de 400 grammes de coagulum pour 1 600 grammes d'alcool, 

 puis chaude à l'ébullition. On ajoute alors 2y c. c. d'acide chlorhydrique de densité = 

 1.12. Après 10 minutes d'ébullition, on filtre à chaud. Par rel'roidissemenl, l'hémine se 

 dépose à l'état de paillettes cristallines. Celles-ci sont lavées à l'alcool, à l'éther et à 

 l'eau, puis reprises par l'alcoGl absolu et séchées à 105". Trois litres de sang fournissent 

 1.0 à 3 grammes d'h('mine. 



Procédé de Cloetta et Rosenfeld. — Cloetta (137) et Rosexfuld (138) lavent les 

 globules au moyen d'une solution de sulfate de soude à 2 p. 100. Le magma globulaire 

 est coagulé par deux volumes d'alcool éthylique à 90°. Après deux heures, on filtre; le 

 coagulum est séché à l'air et pulvérisé. On ajoute à 300-400 grammes de ce coagulum 

 assez d'alcool pour former une bouillie claire, et l'on ajoute alors assez d'une solution 

 d'acide oxalique (ou d'acide sulfurique) dans l'alcool absolu, pour ({ue la coloration 

 devienne brune. L'extrait alcoolique est filtré après 24 heures et additionné d'une solu- 

 tion alcoolique d'acide chlorhydrique.il se produit aussitôt un dépôt de crislaux]d'hémine, 

 qui sont lavés à l'alcool, à l'éther et à l'eau, et purifiés par redissolution dans l'alcool. 



Les cristaux obtenus par cette méthode auraient, d'après Cloetta et Rosenfeld, une 

 autre composition que ceux fournis par la méthode de jN'e.ncki. 



Tandis que la formule de Nexcki et Sieuer est Cj^ H:u Ni Fe 0:j CI, Cloetta et Rosen- 

 feld admettent la suivante : Cm H:u Ns Fe 0:i HCl. 



La formule de Nencki et Sieber citée plus haut n'est pas celle qui résulte directement 

 des données de l'analyse centésimale. Quand on dissout dans la soude des cristaux 

 d'hémine obtenus par le procédé Nencki-Sieber, on constate qu'en même temps que se 

 produit la décomposition en hématine et acide chlorhydrique, il y a mise en liberté 

 d'alcool amylique. Celui-ci fait donc corps avec les cristaux d'hémine ; il n'est pas enlevé 

 par les lavages, ni chassé par le chauffage à 110°. Les résultats de l'analyse mènent à la 

 formule (C.,. H^iN^Fe 0:, CI)iC.; H12O (Nexcki, Bialobrzeski) (139). 



Procédé de Môrner (140). — Le sang est coagulé à l'ébullition, après adjonction 

 d'acide sulfurique. Le coagulum lavé de 1 litre de sang est broyé et introduit dans 

 1.0 litre d'alcool, additionné de 0,5 à 1 p. 100 d'acide sulfurique. Après quelques heures 

 de séjour à la température ordinaire, on filtre, on chaufi'e à l'ébullition, on ajoute 

 au filtrat, par litre, 10 c. c. d'acide chlorhydrique dilué de son quart d'alcool et on laisse 

 refroidir. 



Il se dépose des cristaux qui sont lavés. Leur composition est assez différente de 

 ceux obtenus par la méthode de Nengki-Sieber. Elle est représentée par la formule 

 Gsii H:j:; NiFe O4 Cl. Môrner admet que suivant la méthode employée pour opérer le 

 clivage de la molécule d'oxyhémoglobine, le fragment chromogène pourra posséder des 

 compositions légèrement difi'érentes. Môrner propose de dénommer son produit p héniine. 

 Klster était arrivé à la même conrlusion après la comparaison entre elles de diverses 

 hémines obtenues par des procédés variés. 



Procédé de von Zeynek (141). — Pour obtenir une hémine non altérée par les 

 manipulations de préparation, vo.n Zeyxek s'est adressé à la digestion pepsique d'hémo- 

 globine cristallisée en solution d'acide chlorhydrique à 0.4 p. 100. Dans ces conditions, 

 il y a lieu d'admettre que le moyen chromogène ne subit pas d'altérations considérables 

 sous l'intluence de l'acide. On obtient par ce procédé l'hématine et non l'hémine. Mais 

 l'hématine est transformée ultérieurement en hémine de la manière suivante : l'héma- 

 tine, après lavage à l'eau distillée, est mise, encore humide, en suspension dans l'acétone 

 et additionnée d'acide chlorhydrique en quantité bien faiblement supérieure à celle qui 

 est nécessaire pour opérer la transformation (0.05 — 0.08 gr. HCl par gramme d'héma- 



