Die Peripneumonie der Rinder. 699 



Kultur in vitro ^'^^ 



Die so iu Kollodiiimsäckclien nach 15 — 20 tägigem Aufenthalt im 

 Bauchfell eines Kaninchens erzielte Kultur erg'iebt beim Aussäen an der 

 Luft oder im Vacuum in irgend einem der in bakteriologischen Labora- 

 torien benutzten Medien keine Kulturen, sei sie selbst noch so reichlich. 



Jedoch kann mau in vitro Kulturen erzielen, die denjenigen der 

 Säckchen beinahe analog sind. 



Dies gelingt nämlich, wenn man z. B. als Kulturmedium sterile, 

 nicht besäte Bouillon benutzt, die während einiger Wochen in Kollodium- 

 säckchen im Peritoneum einer Kuh oder eines Kaninchens gewesen ist. 

 Diese sterile Bouillon verändert sich gleichfalls während ihres Aufent- 

 haltes im Peritoneum infolge der osmotischen Vorgänge, welche durch 

 die Wand des Säckchens hindurch stattfinden; sie wird schwach albuminös 

 und ist schließlich imstande, außerhalb des lebenden Organismus der 

 Kultur der Mikroben der Peripneumonie in vitro zu dienen. 



Dies lässt sich auch noch auf andere Weise erreichen. 



Eines Tages hatten wir im Verlauf unserer Kulturversuche in vitro 

 eine Kultur erzielt, die denjenigen in den Säckchen gleich war. Es 

 handelte sich um eine Röhre mit MARTiNscher Bouillon, die reichlich 

 mit mehreren Tropfen subpleuraler seröser Flüssigkeit besät war. Nach 

 dreitägigem Aufenthalt im Brutschrank war die besäte Bouillon leicht 

 opalisierend und wies die kleinen, beweglichen, stark lichtbrechenden 

 Körnchen auf, die für die Säckchenkulturen charakteristisch sind; die 

 von dieser ersten Kultur gemachten Aussaaten blieben jedoch steril. 

 Trotzdem bestärkte uns diese erste Beobachtung in unserer Meinung, 

 daß das peripueumonische Virus außerhalb des Organismus kultiviert 

 werden kann, falls man ihm ein passendes Medium darbietet. Dies ist 

 uns nach zahlreichen Versuchen gelungen. 



Die KulturÜüssigkeit, die bis zum gegenwärtigen Augenblick die 

 besten Eesultate zu ergeben scheint, ist ein Gemisch von der Pej)ton- 

 lösung, die Martin ^^ zur Bereitung des Diphtherietoxins benutzt hat, und 

 Kuh- oder Kaninchenserum. Die brauchbarste Mischung enthält 6 bis 

 8 % Serum. Benutzt man die im Handel befindlichen Peptonlösungen, 

 so erhält man keine Kultur, selbst bei Zusatz von Serum ; ebenfalls er- 

 zielt man nichts, selbst wenn man MARTiNsehe Bouillon ohne Serum 

 (»der reines Serum ohne MARTiNSche Bouillon besät. 



Wie weiter oben erzählt, war unsere erste Kultur geglückt, und zwar 

 sicherlich deshalb, weil die reichlich ausgesäte virulente Flüssigkeit der 

 MARTiNschen Bouillon das unumgänglich notwendige Quantum Kuhserum 

 hinzugefügt hatte. Die späteren Kulturen waren misslungen, weil die- 

 selbe MARTiNSche Bouillon nicht mit natürlicher seröser Flüssigkeit, 

 sondern mit einer Bouillonkultur besät war, durch die ihr nicht die 

 durchaus nötige Albuminmenge vermittelt worden war. Die MARTiNsche 

 Bouillon mit einem Zusatz normalen Ochsenserums in dem oben ange- 

 gebenen Verhältnis wird durch eine CnAMBERLAND-Kerze filtriert und 

 dann wieder in Kolben oder sterilisierte Röhren verteilt; sie wird erst 

 nach einer 48 stündigen Prüfung im Brutschrank benutzt^. 



Die so präparierte Bouillon ist eine bernsteinfarbene, gänzlich durch- 

 sichtige Flüssigkeit; man kann daher mit Bequemlichkeit die Fortschritte 

 der Kultur verfolgen. Aus diesem Grunde darf man der MARTiNSchen 

 Bouillon kein durch die kontinuierliche Erhitzung sterilisiertes Serum 

 zusetzen; die Mischung von Bouillon und erhitztem Serum bleibt selbst 



