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défaut. Si les racines sont ;;ai'iiies «le luidosiir'S, i'iiioiiilalioii sera inutile; si celles-ci 

 manquent ou sont rares, on procédera à rinoculalion. Le lupin et la sénadelle ont géné- 

 ralement besoin d'être inocult-s, les autres légumineuses réussissent bien dans les sols 

 incultes fraicbemiMit défriclK-s. La terre qui doit seivir à l'inoculation proviendra d'un 

 chan^p ayant fourni une bonne récolle de la légumineusc clle-nicnic (jii'on veut cultiver. 

 Cette inoculation sera faite une t'ois pour toutes, si les légumineuses sont cultivées sans 

 interruption sur le sol. 



VI. Premiers essais de culture des microbes fixateurs d'azote dans le sol. 

 — Résultats expérimentaux. — Nous avons primipaN'Uient envisagé dans ce qui 

 précède la lixalinn de l'azote libre par les microbes vivant en symbiose avec une plante 

 verte. Cependant, on parlant des expériences de Cautikii et DiiouiN, de Fkank, de Sciilœ- 

 siNG fds et Laukk.nï, nous avons dit que certaines algues, qu'on rencontre fréquemment 

 à la surface du sol, étaient également capables de fixer l'azote libie. Demandons-nous 

 s'il n'existe pas d'autres cryptogames (mucédinées) qui possèdent cette i)ropriété. Un 

 second problèn\e, non moins important à résoudre, sera celui qui consistera à cultiver le 

 ou les organismes fixant l'azote sur le sol, indépendamment de toute végétation appa- 

 rente, et dont l'existence est indiscutable à la suite des recherches de Bkrtiiklot résu- 

 mées plus liant. 



Le travail suivant de Herthelot répond à ces deux questions [Anti. Chiin., iii), t. xxx, 

 p. 411). Les micro-organismes mis en œuvre sont : 1" des bactéries extraites du sol et 

 employées soit <à l'état de mélange, soit à l'état d'espèces isolées; 2° les bactéries fixées 

 sur les racines du lupin; 3° des semences pures d'AspenjUlas niger; 4° des semences 

 pures d' Alternaria tennis; 5" un Gymnoa>tcus ; 6° diverses espèces de champignons. 



Des bactéries extraites d'une parcelle de terre végétale par les procédés ordinaires de la 

 microbiologie, les unes liquéfiaient, les autres ne liquéfiaient pas la gélatine. On a ainsi 

 isolé sept espèces ; on s'est également servi, pour ensemencer les sols artificiels, d'un ballon 

 de culture qui renfermait un mélange des divers microbes contenus dans une parcelle de 

 terre végétale. Quant aux milieux sur lesquels devait porter la fixation de l'azote, ils 

 contenaient une quantité notable d'éléments hydrocarbonés et une petite dose d'azote 

 destinée à entretenir, au début, la vie des êtres qu'on y ensemençait. Les ballons ou 

 flacons mis en expériences avaient une capacité de .oOO centimètres cubes à six litres; ils 

 renfermaient des mélanges divers, dans la constitution desquels entraient de l'acide 

 humique, du kaolin, de l'acide tartrique, du sucre et quelques centimètres cubes de la 

 liqueur de Cohn diluée. Après stérilisation à l'autoclave, ces llacons ont été ensemencés 

 et exposés pendant plusieurs mois à une lem[)érature de 20 à 2;>". A peine est-il besoin 

 de dire qu'on a eu soin de disposer en même temps des llacons t(!inoin'< non ensemencés, 

 mais renfermant le même contenu que les premiers. Remarquons que les phénomènes 

 d'oxydation ne doivent pas être trop actifs; s'il en était ainsi, si la couche ensemencée 

 était trop mince, les organismes fixateurs de l'azote cesseraient d'exercer leur fonction; 

 aussi, dans les ballons de six litres, les résultats ont-ils été négatifs la plupart du temps, 

 tandis que dans les ballons de (iOO" à un litre, renfermant des mélanges identiques placés 

 dans les mêmes conditions, la fixation de l'azote a toujours eu lieu. Les résultats ont été 

 les suivants avec les bactéries du so/. Le mélange de «es bactéries cultivé sur acide 

 humique, a fixé o7 p. 100 de l'azote initial; sur acide humique et kaolin, .•)2 p. 100; sur 

 kaolin seul, liiO p. 100. Parmi les bactéries isolées, les unes ont fourni des gains s'éle- 

 vant de 37 à 80 p. 100 de l'azote initial, d'autres ont donné lieu à des résultats nuls ou 

 néghgeables. 



On a obtenu, dans les mêmes conditions de milieu, une fixation d'azote avec le 

 liquide des tubercules radicaux des lupins écrasés. 



La culture de VAspenjillus ///yer sur liquide de Cohn additionné d'acide tartrique a 

 fourni un gain d'azote variant de 18 à 3o p. 100 de l'azote initial. Dans deux expériences 

 réalisées avec cette mucédinée, on a fait intervenir un champ électrique dont l'intluence 

 ne s'est pas fait sentir sur le développement de VAspeidilliis. 



La culture de \' Alternaria loinissuv kaolin, adilitionnè de sucieet de liciueur de Cohn, 

 a fourni un gain d'azote variant de 30 à 08 p. 100 de l'azote initial, le végétal s'est 

 d'ailleurs bien développé et la culture était pure. Un Gj/mnonscus développé sur un sub- 

 stratum analogue au précédent, à la suite d'un ensemencement par une parcelle de 



