AZOTE. KIO:; 



2" Un trôs lin liacill<> ;i loii;j;s iilaniciils sinueux; il" un ;;ius li.icilli', lar;,'e de 2 ;x, ;"i longs 

 lilanicnts se fransfonnanl en cliainetles d'urlicles asporogùnes arrondis. La coucIk! de 

 craie se dissout coinpltUenient en inrino temps (jue se drclart', dans la plupart des vases, 

 une forinentation hutyriquo qui runsoniine tout ou |iartii' du sucn- pir-sent. La marclic 

 des expi'riencos est souvent iiié^ulirn.' : tantôt la lerniL-nlalion conirneuce au Jjout de 

 deux ou trois jours, tantôt au bout de plusieurs semaines. Les premiers dosages ont 

 montré que, là où la lermentation bulyritiue avait mi lieu, on pouvait lonstater une 

 fixation d'azote, alors que dans les liquides n'ayant pas fermenté il n'y avait 

 pas eu de fixation. L'optimum de tempi-rature est situé vers 20°. Ces irn-gularités 

 dans la mise en train du phénomène disparurent lorsque, après plusieurs tâtonnements, 

 l'auteur ajouta au li(piide de culture des quantités très faibles d'azote nitrique ou ammo- 

 niacal dont nous verrons bientAt la mode d°aclion. Ces traces d'azote combiné ne font 

 i\u'(iiiiorrrr \d fermentation; mais sont sans iniluence sur la fixation de l'azote libre. II 

 suffit également de faire traverser les cultures par un courant d'air plus lent pour ren- 

 dre le début delà vi'gélation plus facile et plus régulier. Ces lueniiéies ex|)ériences ont 

 fait voir que la fixation de l'azote s'élève de 0*^''',00-i.') à 0»-',00:^ pour un irramme de glucose 

 détruit dans des conditions de culture aérobie. Ce rap|)ort décroit si la quantité de sucre 

 ajouté s'accroît. La fixation de l'azote diminue lorsqu'il y a aération insuffisante ou . 

 lorsque la quantité d'azote combiné ajouté au début est très forte. Le rapport limite, au- 



1 -, , • j) i 11. , . 1 ' 1- Li . j 6 fazote combiné ajouté) 



dessus duquel un gam d azote libre n est plus réalisable, est de —- , , ■'. 



f ' JOOO (glucose) 



Dans les premières expériences que nous venons de rapporter, Winocradskv s'est 

 borne' à épurer le mélange des microbes, autant qu'il pouvait l'être, par la culture élec- 

 tive, laquelle élimine toutes les espèces incapables de vivre dans ce milieu spécial; un 

 chaulîage ultérieur à 80° a détruit de plus toutes les espèces asporogènes; il ne reste 

 que trois espèces sporogènes. Winoghadsky procède ensuite à la séparation des trois 

 espèces sus-mentionnées. Sur milieu solide, on isole le gros bacille (bacille a) et le 

 bacille fin (bacille p) : le CloatricUum ne se développe pas. Ces deux premières espèces, 

 une fois isolées, ont pu être cultivées à l'état de pureté dans des tubes à essais conte- 

 nant de la gélose sucrée : le bacille a est aérobie, le bacille jî anaérobie facultatif. 

 Aucune de leurs cultures ne montre de dégagement gazeux, aucune n'a l'odeur d'acide 

 butyrique. Ces deux bacilles ne fixent pas l'azote libre, et leur rôle semble secondaire 

 dans le phénomène fixateur. Quant au Cliistridiinn, il a pu être cultivé sur des tranches 

 de carotte, mais dans le vide; on l'obtient ainsi à l'état pur, les deux bacilles t]ui l'ac- 

 compagnaient n'ayant pu se développer sur ce nouveau milieu : de plus, il y a dégage- 

 ment gazeux. Ensemencé seul sur le liquide sucré primitif, ce Cloatridium ne produit 

 pas de fermentation bien franche; il semble donc que le concours des deux premiers 

 bacilles soit indispensable à son développement. Or l'expérience montie que, si on re- 

 constitue dans le milieu sucré l'association des trois espèces, il y a fermentation : un 

 microbe strictement anaérobie (Clostridium) peut donc vivre normalement, et pendant un 

 nombre de générations indéfini, dans un milieu acre, s'i/ est protégé de l'action de l'oxy- 

 gène par Cassociation d'espèces aérobies. L'action faiorisanie des deux bacilles n'a rien de 

 spécifique; des vases de culture contenant le Clostridium ensemencé sur une couche de 

 liquide peu épaisse restaient stériles aussi longtemps que la culture était pure; mais, si 

 on introduisait dans ces vases un Pénicillium ou un Aspergillus, la fermentation com- 

 mençait bientôt. Li'S espèces favorisantes doivent précéder dans son déveloj)pement l'es- 

 pèce anaérobie, ou, du moins, se développer concurremment avec elle ; mais, comme cette 

 dernière est seule apte à fournir l'azote combiné au milieu, puisque les aérobies en sont 

 incapables, la croissance de celles-ci est subordonnée à l'activité de l'espèce anaér(d)ie. 

 D'où l'utilité qu'il y a à introduire au début dans la culture une faible dose d'azote com- 

 biné. 



Il résulte de tout ceci qu'un organisme quelconque favorisera, dans ce cas spécial, 

 le développement du microbe anaérobie, si cet organisme est capable de vivre dans un 

 milieu très pauvre en azote, d'en utiliser les dernières traces, et, surtout, d'absorber dncr- 

 giqucmeut l'o.iijgéne de l'air. 



Des cultures pures du ferment anaérobie ensemencées dans le liquide primitif tra- 

 versé par un couraiif de gaz azote pur ont déterminé une énergi(|ue fermentation 



