Antitoxische Sera. 483 



Phenol 24 Stunden stehen. Nach Angabe der Autoren soll die Methode 

 quantitativ arbeiten. Prösciier'^i will durch Trypsinverdauung das Antitoxin 

 von den normalen im Serum vorkommenden Eiweißkörpern getrennt haben. 



In neuester Zeit hat man die schon Aon Bkie(iiok ()»c Ehrlich zur Iso- 

 lierung des Diphtherieantitoxins vor Jahren verwendete Ammoniumsulfatfällung 

 quantitativ nach den HoFMEiSTERSchen Methoden eingehend studiert. Be- 

 sonders suchte man dabei die wissenschaftliclie Frage zu lösen, ob das Anti- 

 toxin ein Eiweißkör})er ist oder ob es an einen bestimmten Eiweißkörper des 

 Blutes gebunden ist. Manche der bereits angeführten Arbeiten sprechen da- 

 gegen, dass das Antitoxin ein Eiweißkörper sei, so z. B. die Angabe von BRiEftER& 

 BoER ^*^, dass das Antitoxin mit kohlensaurem Zink nur dann mitgerissen wird, 

 wenn es vorher durch Zinksulfat gefällt war. nicht aber, wenn Zinkchlorid benutzt 

 wurde; weiterhin der Nachweis von Freund & Sternberg (1. c), dass durch Ka- 

 liumalaun, das alle Albumine herausfällt, das Antitoxin nicht mit ausgefällt wird ; 

 endlich die Angabe von Pr()SCHer, der durch Einwirkung des Trypsins ein 

 Diphtheriantitoxin gewonnen haben will, das keinerlei Eiweißreaktion mehr 

 zeigt. Indessen ist die Frage über die Eiweiß- oder Nichteiweißnatur des 

 Diphtherieantitoxins noch nicht sicher entschieden. Wohl aber ist die andere 

 Frage, an welche Eiweißkörper des Serums das Antitoxins gebunden ist, in 

 sicherer Weise zu Gunsten der Globuline gelöst. Nachdem frühere Autoren 

 Belfanti & Carbone '^2^ Smirnow 1'' ', DiEüDONNE '*''■* widersprechende An- 

 gaben über das Mitfällen des Antitoxins mit den Globulinen gemacht hatten, 

 wurde die Rolle der Globuline durch eine Arbeit von Senc ^^^ geklärt. 8EN(i 

 konnte zeigen, dass es im Heilserum ebenso Avie im normalen Serum nach 

 Marcus'^*' zwei Arten von Globulinen giebt, nämlich unlösliche Globuline, 

 die durch Essigsäure, Kohlensäure, Verdünnung mit Wasser und Dialyse fäll- 

 bar sind, während eine zweite Kategorie, die löslichen Globuline, nur durch 

 die übrigen Globulinreagentien, besonders durch Ammonium- und Magnesium- 

 sulfat gefällt werden. — Das Antitoxin ist ausschließlich an diese löslichen 

 Globuline gebunden, so dass es also bei der Fällung durch Dialyse im Filtrat 

 bleibt. Nach den Arbeiten von Hofmeister und seinen Schülern Averden be- 

 kanntlich drei verschiedene Arten von Globulinen mittels fraktionierter Aus- 

 fällung von Ammoniumsulfat unterschieden, das Fibrinoglobulin, die Euglobu- 

 line und die Pseudoglobuline. Diese letzteren entsprechen den löslichen Globu- 

 linen von Marcus & Seng. Pick^^^ konnte nun nachweisen, dass man 

 durch ca. ein Drittel Sättigung mit Ammoniumsulfat einen Teil der Globu- 

 line, die Fibrinoglobuline, ausfällen kann, ohne dass das Antitoxin mit aus- 

 fällt. Dieses letztere fällt erst aus bei einem Zusatz von 38 bis 46 ^ Am- 

 moniumsulfats. Beim Immunserum, das vom Pferde stammt, war das Anti- 

 toxin an das Pseudoglobulin gebunden, bei dem von Ziegen an das Euglobulin. 



Zur Konzentrierung des Tetanusautitoxins sind im allgemeinen dieselben 

 Methoden verwendet worden, wie wir sie beim Diphtherieantitoxin keunen 

 gelernt haben. Brieger & Cohn ^^^ bedienten sich zur Konzentrierung des 

 Tetanusantitoxins aus der Molke immuner Tiere des Zusatzes von 32 % Am- 

 moniumsulfat. Der Niederschlag wird aufgelöst, mit basischem Bleiacetat ge- 

 fällt und gewaschen. Filtrat und W^aschwasser werden mit Ammoniumsulfat 

 gesättigt und der Niederschlag durch Aufschlemmen in reinem Chloroform 

 mechanisch von dem überschüssigen festen Ammoniumsulfat getrennt. Es 

 ließ sich eine Kouzentrierung auf das 300 — 400 fache erzielen. Pick (1. c.) 

 konnte für das Tetanusantitoxiu , ebenso wie es für das Diphtherieantitoxin 

 erwähnt wurde, zeigen, dass es an die Globuline gebunden ist und zwar im 

 Pferdeserum ausschließlich an das Pseudoglobulin. Uebrigens haben bereits 

 TizzoNi & Cattani'^* beobachtet, dass das Tetanusantitoxin nur an die 



31* 



