— 28 — 



Zeit benutzt werden. Unterdessen stellt man das Paraffinschränkchen 

 auf 53 — 55" ein, was ohne besondere Voriiclitung leicht zu erreichen 

 ist, Avenn die Temperatur des Zimmers nicht zu stark schwankt, und 

 bringt 2 Schälchen mit Paratini hinein, das aus hartem und weichem 

 Paratiin (von 48 resp. 58*^ Schmelzpunkt) je nach der Jahi-eszeit im Ver- 

 hältnis von 2 : 1 l)is 1 : 1 gemischt wird. In jedem bleiben die Organe 

 zw'ei Stunden. Dann bestreicht man ein nicht zu flaches Uhrschälchen 

 sehr dünn mit Glyzerin, legt die Oi'gane hinein, übei'gießt sie mit Paraffin 

 und läßt sie zur schnellen Al)kühlung auf Wasser schwimmen, bis die 

 Oliertiäche erstarrt ist, worauf man sie untertaucht. Nach 2 Stunden 

 nimmt man sie heraus und kann durch Fingerdruck leicht den Block 

 aus dem Uhrschälchen entfernen. 



III. Übung: Typhus und Coli. e. 



Die Besichtigung der am s. Tage angelegten Typhus- und Coli- 

 kulturen ergibt eine Vergrösserung der meisten, sonst keine wesentliche 

 Veränderung. Die Hälfte der 8 am 8. Tage angelegten Bouillonkulturen 

 wird auf Indolbildung untersucht: Coli bildet Indol, Typhus nicht. Das 

 Prinzip der Methode beruht darauf, tlaß sich aus Indol und salpetriger 

 Säure ein roter Farbstoff bildet. Man macht sich eine ganz schwache 

 Nitritlösung, d. h. 0,5 Natriuninitrit in 1000 Wasser (nimmt man 

 zu viel Nitrit, so entsteht ein braun gell )er Farbstoff, der dui'ch die Eigen- 

 farbe der Bouillon verdeckt wird), und liiingt davon einige Tropfen, 

 sowie 1 ccni 25% Schwefelsäure in jede Boudloidvultur. Tritt dann 

 noch keine Piotfärbung auf, so kocht man die Flüssigkeit (nur dünn- 

 wandige Reagenzgläser dürfen über der Flamme erhitzt werden) und 

 beol)achtet dann bis nach dem Ei-kalten. Ist sie auch dann noch nicht 

 vorhanden, so macht man die Probe 5 Tage später mit den übrigen 

 Kulturen. 



Ist Typhusserum vorhanden, oder hat man P)lut von einem Typhus- 

 kranken oder -rekonvaleszenten erhalten, so macht man die Agglutinations- 

 probe; andernfalls wird sie erst am 48. Tage der Übungen mit selbst- 

 hergestelltem Serum vorgenommen. — Man fertigt sich Verdünnungen 

 des Serums mit i)hysiologischer Kochsalzlösung 1 : 50, 1 : 100, 1 : 500, 

 1 : 1000 und 1 : 20()0 an und zwar, wenn viel Serum zur ^'erfügung 

 steht, mit der Pipette, wenn wenig, indem man das Serum mit einer 

 abgewogenen Öse in die Kochsalzlösung luingt. Die Öse wird auf 

 Bruchteile von Milligrammen genau gewogen und dann mit Wasser 

 gefüllt, indem man das Gefäß schräg hält, die Öse eintaucht und sie in 

 der Weise heraushelft, daß sie dabei wagerecht steht. Dadurch werden 

 stets gleichgrosse Tropfen erhalten. Nun wiegt man sie nochmals; die 

 Gewichtszunahme soll etwa 2 mg betragen ; beträgt sie mehr als 2,5 mg, 

 so muß die Öse verkleinert und nochmals gewogen werden. — Die 

 Verdünnung geschieht in Reagenzgläsern; man macht sie, wenn der 

 Inhalt der Öse z. B. 2,0 mg wiegt, indem man 10 Ösen Serum in 1,0, 

 5 Ösen in 1.0, 1 Öse in 1,0 etc. i)liysiologische Kochsalzlösung bringt: 

 jede \'ei-dünnung wird zweimal gemacht. Dann vei'reibt man Typhus- 

 resp. Colikultur von der Agarobertiäche hinein, soviel Ösen voll, als man 

 Kubikzentimeter der Serumverdünnung genommen hat. Außerdem ver- 

 reibt man die Kulturen in je 1 ccm Kochsalzlösung ohne Serum. 

 (Kontrolle). Die Flüssigkeit muß gleichmäßig getrübt sein; nur bei sehr 

 starkem Serum gelingt eine gleichmäßige \'erreibung nicht, da dann 



