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Herstellung- von frischen Präparaten. Zum Studium der 

 Amöben ist die üntersuchuni»' in vivo von größter Wichtigkeit. Das ge- 

 schieht am besten in den natürlichen Flüssigkeiten: nur wenn absolut 

 nötig-, setze man einen Tro])fen i)hysiolog-ischer Kochsalzlösung zu. Man 

 entnimmt einen Tropfen des Materials mit der geglühten Platinnadel oder 

 -Öse und fertigt einen hängenden Tropfen. Zweckmäßiger ist es. einen 

 größeren Tropfen des Ausgangsmaterials auf ein Deckglas zu bringen, 

 dasselbe mit der beschickten Seite auf einen planen Objektträger auf- 

 zulegen und sofort mit Wachs oder Vaseline zu umranden. 



Herstellung von Dauei-präi)araten. Bei Anfertigung von Dauer- 

 l)räparaten ist vor allem zu beachten, daß dieselben niemals trocken werden. 

 Sie müssen feucht fixiert und stets feucht weitei'behandelt werden. Am 

 besten fertigt man dünne Deckglasausstriche und läßt sie sofort mit der 

 bestrichenen Seite nach unten horizontal auf die auf etwa 5C erhitzte 

 FixierungsHüssigkeit fallen. Man fixiert in: 



a) SublimatalkohoWnach Schau- ' b) Hermann scher Flüssigkeit, 

 dinn). Man läßt das Präparat einige Dauer der Fixierung einige Sekunden. 

 Sekunden in der Fixierungsflüssigkeit, Auswaschen in destilliertem Wasser 

 wäscht in li07o 'fodalkoholaus(\2St.) I (etwa 10 Min.). Überführen in OO^/oi 

 und führt in 70 % Alkohol über. | dann in 70 "/o Alkohol. 



In 70 ** (j Alkohol krninen die hxierten Präparate längere Zeit auf- 

 bewahrt wei-(len. Will num gleich färben, so bringt man sie nach wenigen 

 Minuten in destilliertes Wasser zurück. Man färbt mit: 



1. stark verdünntem Delafield sehen oder (iren ach er sehen Häma- 

 toxylin ^ ._, bis mehrere Stunden event. über Nacht je nach der 

 Verdünnung. Hierauf spült man in Brunnenwasser gut ab und 

 prüft ein Präi)arat unterm Mikroskoj). Ist es überfärbt, so 

 difterenziert man mit salzsaurem Alkohol und kontrolliert untei-m 

 Mikroskop, bis die richtige P'ärbung erreicht ist. Dies ist dann 

 der Fall, wenn die Kerne scharf zu erkennen sind. Hierauf 

 abermaliges Absjtülen mit Brunnenwasser, Überführen durch 

 700/0. -»-tVcM 1007,, Alkohol Xylol-j Alkohol in Xylol (je 

 1 Minute) und Einscldießen in Cedernholzöl oder Kanadabalsam. 



2. Boraxkarmin oder Pikrokarmin nach Weigert. Färbung etwa 

 V2 Stunde. Hierauf Differenzierung mit salzsaurem Alkohol, 

 bis sich keine Farl)stofTwolken mehr bilden. Dann durch die 

 Alkoholstufen und Xylol in Zedernholzöl. 



■\. Heiden liains Eisenhämatoxylin (s. S. iXi). wodurch die am stärksten 

 differenzierten Färbungen ei'zielt werden. Die Ausstriche kommen 

 aus dem dest. Wasser für 4— l!^ Stunden (event. über Nacht) 

 in die Eisenalaunbeize; dann spült man gut mit dest. Wasser 

 ab und bringt sie auf (1 — 12 Stunden in die Farblösung, wo sie 

 ganz schwarz werden. Hierauf wieder mit Wasser auswaschen 

 und dann in der Eisenl)eize die überflüssige Farbe ausziehen, was 

 sehr rasch vor sich geht. Der richtige Zeiti)unkt der Ditferenzierung 

 muß unter dem Mikroskoj) festgestellt werden. Man legt den 

 Deckglasaufstricli auf einen großen Tropfen der Beizlösung auf 

 den Objektträger und beobachtet im Mikroskop, bis die Kerne 

 scharf differenziert sind. Das Chromatin der Kerne muß tief- 

 schwarzblau erscheinen, das Protoplasma schwachgrau (s. Fig. 2). 

 Dann tüchtig absjjülen in Leitungswasser und nach den Alkohol- 

 Stufen und Xvlol in Kanadabalsam oder Zedernöl einbetten. 



