Die allgemeinen Methoden der Bakteriologie. 475 



7. Methode der Herstellung von Dauerkulturen. 



Um Kultureu dauernd aufzubewahren, muss man sie vor der Ein- 

 trockuuug schiitzen, was durch einen luftclichteu Abscbluss zu erreichen 

 ist. Die Kultur selbst braucbt dabei vorber nicht unbediugt abgetotet 

 zu warden, da bei Luftabschluss obnedies das Wachstum bald sistiert. 

 Der sicherste Abscbluss wird durch Abschmelzen der Oeffnungen der 

 KulturgefaBe errreicbt (SOYKA & KRAL 126 ). 



CzAPLE\vsKi 127 wandte fiir Reagenzglaskultureu einen Paraffin verscbluss 

 an. Der Wattepfropf wird ein Stuck weit in das Reagenzglas hinein- 

 gestossen und rnit fittssigern Paraffin iiberschicbtet, bis dieses nach dern 

 Erstarreu bis zur Miindung des Glases heranreicht. Petriscbalen kon- 

 servierte er auf die Weise, dass er bei umgekehrter Haltung der Scbale 

 den Zwiscbenrauni zwischeu beicleu Halften mit Paraffin ausgoss. 

 Solleu die Kulturen vor der Konservierung abgetotet werden, so er- 

 balten sie zuuachst eineu Forrualinzusatz (HAUSER 128 ). Schalenkultureu 

 werdeu zu dem Zweck auf der Innenseite des Deckels mit Filtrierpapier 

 ausgekleidet, das mit einer Formaliulosuug betupft wird. Sie kommen 

 dann in eine feucbte Kammer zu steben, in der sich in eineni offenen 

 Schalchen mit Formalin getniukte Watte befindet. Bei Reagenzglas- 

 kulturen wird das untere Eude des Wattepfropfs in Formalin getaucbt 

 und derartige Kulturen werden dann bis zur erfolgten Abtotung in ein 

 luftdicbt zu verschlieBeudes, cylindriscbes Glas eingestellt, auf dessen 

 Boden sicb gleicbfalls mit Formalin getrankte Watte befiudet. Das 

 Formalin hitrtet die Gelatine, audert aber im tibrigen weder das Aus- 

 seben der Kultur nocb des Substrats. Um wirklicbe Dauerkulturen zu 

 erhalteu, ist jedocb auch bei abgetoteteu Kultureu ein luftdichter Ab- 

 scbluss, wie er bei Reageuzglaskulturen durch Abschmelzung erzeugt wird. 

 zur Verbiituug der Eiutrocknung notig. Um dies auch fiir Petrischalen 

 sicher zu erreicben, hat PAUL 129 ein besouderes Verfahren angegeben. 

 Er scblieBt die kulturtragenden Petrischaleu nicht mit eineui Deckel, 

 sonderu mit einer Glasplatte, die eiue fiir die Schale passende, tiefe Einue 

 hat. Die Abdichtung erfolgt durcb geschmolzenen weiBen Siegellack. 



Zur Konservieruug einzelner Kolonieen in Form des mikroskopischen 

 Praparates trocknete GARRE 13 ausgeschnittene Gelatinekolonieen auf dem 

 Objekttrager und konservierte sie in Glyceringelatine unter Deckglas. 

 Aehnliche Verfabreu riihreu von PLAUT I:M , LiPEz 132 , JACOBi 133 und 

 GiJXTHER 134 her. Auch von mit Formalin abgetoteten Platten lassen sich 

 Praparate einzeluer Kolonieen auf Objekttragern herstellen. Der Ein- 

 scbluss erfolgt in verfliissigter Gelatine uuter Deckglas. Zum Erstarren 

 der Einschlussrnasse werden die Praparate 24 Stunden Formaliudarnpfen 

 ausgesetzt; Lackring zum Schutz gegen Eintrockuung. 



Um den feineren Bau von Kolonieen zu studieren, muss man das 

 Substrat barten und farben. JACOBI iibergieBt zu dem Zweck Platten 

 mit Iprozentiger Losuug von Kaliumbicbromat, liisst sie 13 Tage an der 

 Luft stehen und lost sie uach Eutfernung des Kaliumbichromats von der 

 Unterlage. Kach 24stiindigem Auswascben in Wasser uud Hartuug in Al- 

 kohol werden ausgeschnittene Stiicke gefa'rbt. Einscbluss inKauadabalsam. 



A. NEisSER 135 hat Schnitte mit dem Mikrotoni aus den in analoger Weise 

 vorbereiteten Gelatinestichkulturcylinderu angefertigt uud gefa'rbt. 



WixKLER 136 hat Schnitte durch lebende Agarkulturen augelegt. Er 

 verfertigte sich aus Paraffiublockeu Hohlcylinder, die unten rnit Paraffin 

 verschlossen wurden und goss sie mit Agar aus, der eventuell scbun 



