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2. Gang der Untersuchung. 



Bei jeder Untersuchung auf Pest ist auBer der Untersuchuug durch das 

 Mikroskop und die Kultur auf Agar und Gelatine moglichst stets der Tier- 

 versuch heranzuziehen. Derselbe ist unerlasslich, wenu es sich urn die Fest- 

 stellung des ersten Falles in eiuer Ortschaft handelt. 



A. Mikroskopische Untersuchung. 



Von dem zu uutersuchenden Materiale siud zuuachst reichlich Deckglas- 

 priiparate auzufertigen. Ein Teil derselben wird unfixiert und ungefarbt in 

 einem Deckglasschachtelchen aufbewahrt, uni bei etwaiger Nachpriifung des 

 Untersuchungsergebnisses benutzt zu werden. Die anderen Ausstriche werden 

 nach einer der folgenden Farbuugsme.thoden behaudelt und ebenfalls fiir spatere 

 Nachpriifuugeu aufgehoben. 



Farbuug: mit Methylenblau alkalisches M. uach LOFFLER, Borax- 



methyleublau (5 % Borax, %% Methylenblau in Wasser), verdiinnter 



ZiEHLScher Losuug, Gentiauaviolett. 



Charakteristische Polfiirbuug: Trockenpraparate 25 Miuuten in absolutem 

 Alkohol oder fiir weuige Sekuuden in einer Mischuug von Aether und Alkohol 

 zu gleichen Teilen harten, dauu mit einem der geuannten Farbstoffe fitrben. 



B. Kultur. 



1. Fleischwasseragar (0,5^ Kochsalz, 1 % Pepton). Schwach alkalisch, 

 nicht trocken, zu Flatten ausgegosseu oder in weiten Reageuzgliisern schrlig 

 erstarrt; Temperaturoptimum etwa 30. 



Anzuwenden bei Blut und anderem moglichst reinen Untersuchungsniateriale. 



2. Blutserum nach LOFFLER: Rinderserum mit dem 4. oder 5. Teile einer 

 1 % Traubeuzucker enthaltenden alkalisierten Peptoubouillon in weiten Rohrcheu 

 schrag oder in Flatten erstarrt. 



Anzuwenden wie Agar. 



3. Fleischwassergelatine (0,5^ Kochsalz, \% Pepton). Schwach alkalisch, 

 PlattengieBen oder Ausstrich auf der Oberflache der erstarrteu Platte. 



Auwendung in jedeni Falle erforderlich, besonders wertvoll bei Material, 

 das mikroskopisch andere Bakterieu ueben Pestbazilleu euthJilt, z. B. Sputum, 

 Urin, Kot, Leichenteile. 



Bei stark verunreiuigtem Material ist die Ziichtung auf Gelatine bei niederer 

 Teinperatur (Eisschrank) zu versuchen. 



Aus den Originalausstrichen siud die Pestbazilleu rein zu ziichten und Rein- 

 kulturen derselbeu auf Agar oder LoFFLERSchem Blutserum zur Nachpriifung 

 anfzubewahreu. 



Zur genaueren Bestiminuug eiuer auf den unter 1 bis 3 genauuten Nahr- 

 boden aus verdachtigem Material geziichteteu Kultur dieut Priifuug auf Be- 

 weglichkeit (unbeweglich), Farbuug nach Gram (Eutfarbuug), Ziichtung auf 

 Agar mit 3 % Kochsalzgehalt (zur Darstellung der Involutions- uud Degene- 

 ratiousformen), in schwach alkalischer Bouillon (zur Darstelluug der Ketten), 

 eventuell Giirungsprobe (keiue Gaseutwicklung) ; Tierversuch siehe C; Aggluti- 

 uatiousprobe siehe D. 



C. Tierversuch 

 (nur in den vorschriftsmaBig eiugerichteteu Pestlaboratorien vorzunehmeu). 



1. Ziar Erleichteruug der Diagnose: Impfuug von Ratten. Die Impfuug 

 geschieht durch Einspritzung von Gewebssaft unter die Haut oder Einbringung 

 eines Stiickcheus des verdachtigeu Materials in eine Hauttasche unter anti- 



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