570 v - Lingelsheim, 



flir das Geliugeu 1st, dass man sich gauz junger Kultnren (12 IGstiiu- 

 diger) bedient, die iu schueller Folge iiberimpft siud. 



Die Reinziichtung der Tetanusbazillen gelaiig KISATATO iu der Weise, 

 dass er von dem bazilleuhaltigeu Materiale auf schriigen Agar ausstrich 

 uud die Rohrcheu auf 1 2 Tage bei Briittemperatur hielt. Von den so 

 erlialteneu Miscbkultureu wurden, uach 1 stiindiger Erwarmuug auf 80 , 

 Agarplatten augelegt. Als Behalter daftir dienten besoudere blasenartige 

 Schaleu, in deneu die Luft iiber dem Agar durch eine Wasserstotf- 

 athmosphare verdraugt werdeu kounte. Bei diesem Verfahren sollen in 

 der Mischkultur samtliche vorbaudene Sporeu zurn Auskeimcu gebracht 

 werden. Die Erhitzung beseitigt sodanu den groBten Teil der uicht 

 sporeubildenden Bazilleu uud von den sporenbildeuden diejeuigeu, die 

 sich nocb in vegetativer Form in der Mischkultur vorfiudeu. 



Vermittels des KiTASATOscbeu Verfahrens, das iibrigens in eiuer im 

 Priuzip durchaus iibereiustimmeudeu Form schou vor der KiTASATOscheu 

 Veroff'entlichuug mit Erfolg in einem Falle von NIKOLAIER 3fi angewaudt 

 wordeu war, gelang es uicbt nur KITASATO, sonderu auch einer gauzeu 

 Reibe anderer Forscher Reiukulturen des Tetauusbacillus berzustelleu. 

 Nieht selten bat aber aucb die Metbode versagt uud aucb in geiibten 

 Hiiuden. Das Geliugen haugt zunachst davou ab, dass uicbt zu weuig 

 Tetauusbazillen in dem Ausgangsmaterial vorbaudeu sind, vor allem aber 

 von der Beschaftenheit der begleiteuden Bakterien. Siud in groBer Menge 

 solcbe vorbandeu, die auch friihzeitig widerstandsfjihige Sporen bilden, 

 so gelingt die Isolienmg meist nicht. Man bat versucbt die Erhitzung 

 noch iiber eine Stuude auszudehuen, da die Tetanussporeu zu den wider- 

 standsfahigeren geboreu, widerstaiidsfabiger siud als die Sporen des rna- 

 ligneu Oedems und mancher Cblostridiumforrneu. 



Statt von der erbitzten Misclikultur direkt zur Isolieruug auf festem 

 Substrat zu scbreiten, kanu man aucb eine vorberige Anreichenmg ver- 

 sucben. Man imp ft dabei eine Anzabl Bouillonrobrcben in mb'glicbst 

 verscbiedener Verdunuuug uud htilt dieselben imter Luftabscbluss zwei 

 Tage bei 37. Hierauf wird wieder erbitzt uud das Verfahren event. 

 nochmals wiederbolt. v. HIBLER vermocbte die Tetanusbazillen von den 

 Oedembazillen zu treunen, indem er Vorkultureu (tiefer Irnpfstich) in er- 

 stnrrtem uud .sterilisierteni Kaninchenblut anlegte, die eiue Reibe von 

 Tagen bei Briittemperatur gebalten wurdeu. 



Liegeu die enviibuten Scbwierigkeiteu uicht vor, ist die Zabl der 

 vSporeu keiue zu geriuge, so macbt die Isolieruug keiue weiteren ScbAvierig- 

 keiteu. Man kann sich dazu der von KITASATO koustruierten Schaleu 

 bedieueu. Bequemer und auch meist zum Ziele fiihreud ist das Ver- 

 fabreu von BUCIINER, wobei die geimpften Robrcbeu mit Pyrogallus- 

 losung eingestellt werden. Meist geliugt es aber aucb schon in der 

 Hobeuscbiclitkultur (Zuckergelatiue) naeh LIBORIUS positive Resultate zu 

 erzielen, weun man nur darauf achtet, dass die Gelatine resp. der Agar 

 durch ! ,2 stiiudiges Erhitzeu von Sauerstoff befreit und iiach der Impfuug 

 durch Kiihluug mit Eiswasser scbuell zum Erstarren gel>racht wird. 

 Nach dem Erstarreu kauu daun uoch zweckuia'Big die Kultur mit Ge- 

 latine oder Agar iiberschichtet werdeu. 



Statt der BucuNERscheu Rohren kanu man auch den Apparat von 

 NOVY benutzen, der in etwas anderer Form schou von NICOLAIER an- 

 gegeben war. Es ist hierbei moglich, mehrere Rohrcheu in einem Gef aB 

 unterzubringen. Auch die auderen Verfahren, das von FRANKEL 4 , BOT- 

 Kix 20 , BLiJCHER 9 sind verwertbar. Es komrnt viel weuiger darauf an, 



