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des grappes de raisin, des melons, des oranges, des prunes, des feuilles de rhubarbe, 

 abandonnees dans une atmosphere d'acide carbonique, delruisenl du glucose et donnent 

 de 1'alcool et de 1'acide carbonique. 



LECHARTIER et BELLAMY out monlre que des fruits, des raisins et des feuilles, prives 

 d'oxygene. produisaient de 1'alcool et de 1'acide carbonique. 



MUNTZ a montre que les plantes vivant dans 1'azote produisaient de 1'alcool, tandis 

 que celles vivant comparativement dans 1'air n'en fournissaient pas. 



La difPiculte de 1'etude des anaerobies consiste dans la necessite de Gulliver ces micror- 

 ganismes dans des milieux rigoureusement prives d'oxygene. 



PASTEUR, JOUBERT et CHAIIBERLAND cultivaient le vibrion septique dans un tube en 

 U renverse dont les deux branches inferieures elaienl fermees i la lampe. La tige supe- 

 rieure est efPile"e et fermee par un tampon de colon. Chacune des branches inferieures 

 presente une [petite tubulure laterale qui se termine par une pointe tres effilee. On 

 determine par la tubulure superieure un vide partiel et on fait penetrer ainsi dans une 

 des branches une cerlaine quantite de bouillon ensemence; dans 1'aulre branche, du 

 bouillon absolument sterile. On fait alors un vide aussi parfait que possible au moyen 

 d'une pompe a mercure on a eau, et on eleve legerement la temperature dans les deux 

 branches, de fagon a determiner, a la tres basse pression ou Ton opere, une ebullition 

 rapide du liquide qui chasse completemenl 1'air conlenu dans 1'appareil. II faut eviler 

 que des parcelles du milieu ensemence ne passent dans 1'autre branche. On ferine la 

 tubulure superieure a la lampe. On met a 1'etuve; le liquide ensemence donne une 

 culture; le liquide non ensemence doit rester sterile. Pour I'ensemencer a son tour, il 

 sufPit de faire passer quelques gouttes de la premiere branche dans la deuxieme. 



On peut provoquer aussi le developpementdes anaerobies en presence d'un gaz inerle. 

 Pour cela, si 1'on se sert de 1'appareil PASTEUR, JOUBERT et CHAMBERLAND, il faut faire ren- 

 trer un grand nombre de fois le gaz inerte dans 1'appareil, apres avoir fait chaque fois un 

 vide aussi parfait que possible. 



La culture des anaerobies sur milieu solide peut se faire avec avantage de la fagon 

 suivanle (Roux). Un tube de verre assez large est etire de fagon a presenter a la partie 

 superieure une dilatation,' cornrne uae sorle d'enlonnoir lermine par un lube efPil6 qui le 

 fail communiquer avec une ampoule longue dudiametre du tube initial comme 1'enton- 

 noir superieur. Cetle ampoule se lermine a son extremite inferieure par une pointe 

 longue et efPilee. Le tube est alors flambe, et Ton plonge la pointe inferieure dans de la 

 gelaline nutritive bouillante et par suile liquide; on aspire a la parlie superieure el 1'on 

 remplit ainsi compli'tement ['ampoule; on ferme alors les deux extrtsmites a la lampe, et 

 1'on a ainsi un milieu purge d'air. On ensemence ces ampoules par piqures profondes 

 de la masse apres avoir casse une extremite du tube; on referme a la lampe apres ense- 

 mencement. 



Quand la culture doit degager nne certaine quantite de gaz, il est avantageux de se 

 servir d'un simple lube a essai renfermant la gelose nutritive. On fait le vide dans I'appa 

 reil apres ensemencement, ou on remplace 1'air par un gaz inerte. 



On peut aussi, pour cultiver les anaerobies en milieu solide, se servir de la propriete 

 que presentent certaines bacteries, le Bacillus subtilis par exemple, qui absorbent 1'oxy- 

 gene libre avec la plus granie aviditt3 (Houx). On ensemence ainsi une premiere couche 

 de gelaline nutritive prealablement bouillie avec le microbe que 1'on veul etudier; on 

 recouvre celte gelatine d'une couche degelos? liquiQee que Ton fait solidiPier p ir refroi- 

 dissemenl. On verse alors sur ce bouchon de gelose une culture pure de Bacillus subtilis 

 dans du bouillon, et on ferme le tube a la lampe. Le Bacillus subtilis en se developpant 

 s'empare de la lotalile de 1'oxygene, et 1'anaerobie peut se developper. 



La culture des anaerobies sur plaques est assez delicale : KOCH les recouvre d'une 

 plaque de mica slerilisee. A Plnslilut PASTEUR on emploie le dispositif suivant (Roux). 

 On prend des tubes de verre de 3 centimetres de diametre, longs de 30 cm., fermes a une 

 extremite, dans lesquels on dispose une petite quantite de gelatine nulrilive. On elire 

 alors la partie superieure du tube, on fond la gelatine et on cou -he le lube : on a ainsi 

 une longue plaque solide par refroidissement; on sterilise, on ensemence, et on fait le 

 vide dans 1'appareil. 



Action des agents chimiques. - - La presence d'un grand nombre de produils 



