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I. Extraction du glycogene des organes. 100 grammes de pulpe musculaire sonl 

 mis dans un ballon de 200 cc. avec une solution de KOH & 60 p. dOO. (Je recommande 

 1'hydrate de potasse I a de MERCK) ; on determine le litre alcalin avec 1'acide chlorhydrique 

 normal. 



Avant de mettre le ballon au bain-marie, on 1'agile energiquemenl pour obtenir un 

 melange homogene, et on repete cette agitation aussi souvent que possible : on la 

 recommence apres que le ballon a ete chauffe un quart d'heure ou une demi-heure. Quand 

 la chaleur ne determine plus de dilatation, on ferme 1'orifice du flacon avec un bouchon 

 de caoutchouc. Apres deux heures de coction, on place tout le liquide dans un autre 

 ballon de 400 cc. on ajoute les eaux de lavages, et, apres refroidissement.on amene a 

 400cc. et on verse le tout dans un verre : il s'est produit un petit precipite qui doit etre 

 filtre; on prend un entonnoir d'environ un demi-litre de capacite,et on y introduit du 

 colon de verre au moyen d'un agitateur qui presse le colon jusqu'a lui donner la 

 consislance necessaire; on verse la liqueur rougeatre et trouble, el Ton obtient un fillral 

 qui n'esl pas limpide. 



II. Precipitation etisolement du glycogene. On mesure par une burette 100 cc. de 

 la solution musculaire filtre'e, qu'on fait tomber dans un verre d'environ 200 cc., on 

 verse 100 cc. d'alcool a 96 el on melange avec un agitateur; il se forme un precipite 

 qui se depose tres vile et qu'on peut filtrer au bout d'un quart d'heure, mais il est pre- 

 ferable d'altendre plusieurs heures, meme loute une nuit, avant de filtrer. On prend un 

 filtre suedois de 15 cent., de la fabrique de MUNKTELL, qu'on met sur un grand flitre, et 

 on y verse d'abord la liqueur limpide, puis a la fin le precipile glycogenique qui s'est 

 depose. La solution rouge passe tout a fait limpide a travers le filtre; on recouvre,el, 

 quand la liqueur s'est egouttee, on lave le glycogene avec une solution qui contient un 

 volume de polasse a 15 p. 100 et deux volumes d'alcool a 96. On fait tomber les eaux 

 de lavage dans le verre ou Ton avail precipite le glycogene, et on les verse sur le filtre. 

 On egoutte, puis on verse de 1'alcool a 96 sur le filtre, de maniere a determiner le 

 ratatinemenl el la cohesion du glycogene qui s'y trouvait depose. 



Apres que 1'alcool s'est egoutte, on adapte un lube de caoutchouc au bee de 1'enton- 

 noir el on le ferme avec une pince, on place 1'enlonnoir ainsi dispose au-dessus du verre 

 a experience vide dans lequel a ele faite la precipitation du glycogene. D'ou 1'inconvenient 

 qu'il reste un peu de glycogene adherent aux parois. Alors, on remplit presque la tola- 

 lite du filtre avec de 1'eau froide sterilisee ; au bout d'une demi-heure a une heure, presque 

 tout le glycogene s'est totalement dissous. On ouvre la pince, et on laisse s'ecouler dans 

 le verre a experience le liquide contenu dans 1'entonnoir, puis on referme le tube, on 

 verse de nouyeau de 1'eau sur le filtre, et on attend que toul se soil dissout : on ouvre de 

 nouveau la pince, et on laisse s'egoulter toul le liquide; puis on referme la pince; orirem- 

 plil a demi 1'entonnoir avec de 1'eau, et avec un fin pinceau on delache du papier la 

 poudre verdatre qui s'y est deposee de maniere a la faire nager dans le liquide. Celte 

 poudre est d'ailleurs insoluble dans 1'eau. Puis on laisse de nouveau, en ouvrant la pince, 

 le liquide filtrer. 



Alors on met un papier de tournesol dans le filtral, et on laisse goutte a goutte y 

 couler de 1'acide chlorhydrique de densite 1,19 en agitant avec un agitateur jusqu'a 

 neulralisalion exacte. Ensuite on verse toute la solution glycoge'nique dans un bal- 

 lon de 500 cc. avec toutes les precautions analytiques ne"cessaires; on melange au 

 liquide 25 cc. d'une solution chlorhydrique de 1,19 p. 100. Au moyen d'un enton- 

 noir on verse de 1'eau dans le verre qu'on fait couler sur le fillre pour entrainer les 

 dernieres traces de glycogene, et on ajoute cette eau de lavage au ballon de 500 cc.En 

 procedant ainsi par une serie de lavages successifs, on arrive a amener presque jusqu'a 

 500 cc. le volume total de la Jiqueur. 



On preleve alors 1 cc. du filtrat qu'on additionne d'alcool, et il ne doit pas se pro- 

 duire de precipite. On ferme le ballon par un bouchon de caoutchouc, el on agile de 

 maniere a rendre le melange homogene : ce melange doil avoir une acidite d'environ 

 2 p. 100 de HC1. 



Ce precede doit etre modifie : 



1 Si la quantile de glycogene esl trop faible pour qu'on ne puisse plus faire une 



