86 



XXXIV. Ubuiig: Ziichten von Typhusbazillen aus Stuhl 



und Wasser. b. 



Herstellen des Drigalskischeu Nahrbodens: Der Auszug aus dem 

 Pferdefleisch wird 1 Stunde gekocht, liltriert, mit 10 g- Pepton, 10 g 

 Nutrose, 5 g Kochsalz gekocht, nochmals flltriert, danu 30 g Stangen- 

 agar zugesetzt, dieser, wie friiher angegeben (VI. Ubung. b), im 

 Autoklaven oder tiber der Flam me gelost, mit 10% Sodalosung bis 

 zu schvvach alkalischer Reaktiou versetzt und nochmals im Dampftopf 

 gekocht. Gleichzeitig kocht man 130 ccm Lackniuslosuug 1 Minute lang, 

 setzt 15 g Milchzucker zu und kocht noch 15 Minuten. Diese Losung 

 und den Agar laBt man auf 50 abkiihleu, vermischt beides uud stellt 

 die vorige Reaktiou, falls sie saner geworden ist (Zersetzung des Milch- 

 zuckers durch zu langes Kochen) wieder her. Dazti setzt man 2 ccm 

 heiBer steriler 10/ Sodalosung, ferner 10 ccm eiuer frisch bereiteten 

 0,1% Losung von Kristallviolett B der Hochster Farbwerke in heiCem 

 Wasser. Der nun fertige Lackmus-Nutrose-Milchzuckeragar wird in 

 sterile Kolbchen zu 100 ccm gefullt uud, ohue nochmals zu sterilisieren, 

 aufbewahrt. AuBerdem macht man sich einige Rb'hrcheu Lackmus- 

 Mannitagar, indem man zu fertigem Agar 10% Lackmuslosung und 

 2% Mannit zusetzt. 



Herstellen des Endoschen Nahrbodens: Zu den 1000 ccm des 

 3 % Agars komnien : 5 ccm der Fuchsinlosuug, 10 g Milchzucker, 

 25 ccm eiuer frisch hergestellten 10% Natriumsulfitlosung, 10 ccm 

 10% Sodalosung. Der Nahrboden zeigt nach dem Erstarreu eine ganz 

 leichte Rosafarbuug. Er ist dunkel aufzubewahren. 



Herstellen des Loft'lerschen Malachitgriinagars: Der Nahrboden wird 

 nochmals 2 Stundeu im Dampftopf sterilisiert und (olme den Boden- 

 satz) in sterile Kolbchen zu 100 ccm abgezogen. Gleichzeitig wird die 

 Rindergalle sterilisiert, durch Watte h'ltriert und nochmals sterilisiert. 



Polytroper Nahrboden nach Lange : I. 1300 g Wasser, 2 g Fleisch- 

 extrakt (Liebig), 5 g Kochsalz, etwa I 1 /, g Nutrose, 3 g Peptou ( Witte) 

 in Emailletopf auf otfener Flamme unter Umriihren kochen. Nach 

 dem ersten Aufwalleu 2 3 ccm 10/ Sodalosung zusetzen (rosa 

 Lackmuspapier rnuB deutliche alkalische Reaktion anzeigen). Bei ver- 

 minderter Flamme 30 Minuten lang in ruhigem Kochen erbalten, daun 

 lOg Milchzucker zusetzen und noch 10 Miuuten kochen. Die Mischung 

 ist inzwischen auf etwa 6 800 ccm eingedickt und wird mit Aqua 

 dest. auf geuau 1 1 aufgefullt uud heiB flltriert. (Das Filtrat darf im 

 Literkolbeu leicht opaleszieren, muB aber im Reagenzglas gauz klar 

 erscheineu.) II. In 200 ccm Lackniuslosuug (Kahlbaum) werdeu 2 g 

 Mannit gelost und 15 Miuuten im Wasserbad gekocht. III. Neutral- 

 rotlosuug 1 : 1000 (30 Minuten im Dampf sterilisiert) (II und III sind 

 vorratig zu halten). Zu 500 ccm Filtrat von I werden 20 ccm II zu- 

 gesetzt (weuu hieruach die Mischung in diinner Schicht uicht deutlich 

 blau ist, noch einige Tropfen Normalkalilauge zusetzeu), darauf Zusatz 

 von 10 ccm III. 



20 Minuten im Kolben uud nach Einfiilleu in sterilisierte Gar- 

 rohrchen uochmals 20 Minuten sterilisieren. 



Die Galle wird mit 1 % Pepton versetzt, in sterile Reagenzglaser 

 verteilt und sterilisiert. 



