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gewachseu. die in cleii niichsteu Wocheu au GroiJe zimehmen, bis die 

 ganze Kultur einen ,,gebirgsartigen" Eindruck macht. Auf der Glyzerin- 

 bouillon hat sich ein ziemlich dickes Hautchen gebildet. 



In der Zuckergelatiuestichkultur der Tetanusbazillen haben sich 

 die Auslaufer vergroflert; aulSerdein ist Verflussigung eingetreten. Die 

 Milchkultur des Paratyphus B beginnt sich nach etwa 10 Tagen auf- 

 zuhellen, wahrend die von Paratyphus A und Dysenteric unverandert 

 bleibt. 



XXXIX. Ubung: Diphtheriegift und -Antitoxin. 



1. In der IX. Ubung wurde nur eine ungefahre Virulenzbestimmung 

 der Kultur vorgenommen ; zurHerstelluug von Diphtheriegift 

 verfahrt man in folgeuder Weise: Von einer Bouillon, die in gewohn- 

 licher Weise, aber mit 2 % Pepton hergestellt wird und rotes Lackmus- 

 papier blaut, blaues nicht rotet, kommen in 4 Erlenmeyerkolbchen zu 

 100 ccm je 20 ccm. Die Beimpi'ung mit Diphtheriekultur geschieht 

 nur ganz oberflachlich, damit sich em Hautchen bildet. Dadurch wird 

 erreicht, dafi die Bazilleu sehr viel Sauerstoff zur Verfiigung haben 

 und soinit sehr viel Gift bildeu. Am besten ist es, wenn die Bouillon 

 unter dem Hautchen uberhaupt uicht getriibt wird. Die Kolbchen 

 bleiben 14 Tage im Brutschrauk stehen. Nach dieser Zeit wird ihr 

 Inhalt zusammengegossen und die Bazillen eutweder abgetotet oder ab- 

 liltriert. Die Abtotung geschieht durch Uberschichten mit Toluol; von 

 diesem Desinfektionsmittel lost sich gerade so viel, daft uach etwa 

 3 Tagen die Fltissigkeit keimfrei ist, ohne dalS eine Schadiguug des 

 Giftes eintritt; auBerdem verhindert es die Verdunstung. - - Zieht man 

 vor, zu filtrieren (bei sporenhaltigen Bakterien, wie Tetanus, ist dies 

 unbediugt notig), so sterilisiert man die Toukerze (Chamberlaudfilter) 

 in dem GefaB, in das filtriert werdeu soil, im Dampftopf, verbindet das 

 offene Ende des GefaBes mit einer Wasserstrahlluftpumpe, verschlielU 

 den Rand mit einer durchlochten Gumrnikappe, liltriert die Kultur 

 durch eiu Papierfilter (um Kliimpcheu zu entfernen) in die Tonkerze 

 und dann unter Druck durch diese. Das Filtrat bringt man in eiu 

 steriles GefaC und iiberschichtet es, wenn man es aufbewahreu will, 

 ebenfalls rnit Toluol. 



2. Prii fung der Giftigkeit. Von dem Filtrat injiziert man 

 Meerscliweinchen von 250-300 g GewichtO,5; 0,05; 0,005; 0,0005 ccm 

 (Verdunnimg mit steriler physiologischer Kochsalzlosung). Wie friiher 

 erfolgt teils schnell der Tod, teils Nekrosenbilduug an der Injektions- 

 stelle, teils fehlt auch diese. Von Wichtigkeit ist hier uur die todliche 

 Dosis, und zwar die, die nach spatestens 5 Tagen zu toten imstande 

 ist. Ist z. B. nach dieser Zeit das mit 0,05 ccm iujizierte Meer- 

 schweinchen eingegangen, das mit 0,005 ccm iujizierte uoch am Leben, 

 so wird zwischen diesen beiden Doseu weiter untersucht. Ein Gift, 

 von dem 0,01 ccm eben geniigt, heiftt Normalgift (DTN 1 ), geniigt 

 0.001 ccm eben, so heifit es 10-fach Normal (DTN 10 ) etc. 



3. Zum Studium der Antitoxin wirkuug verwendet man aus 

 der Apotheke bezogeues Heilserum. Ein Serum, von dem 0,1 ccm 



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