31)6 L'ANNEE BIOLOGIQUE. 



exposes la lumire. Pour lui c'taient des organismes vivants, capables 

 de se reproduire. La thse parut bien hasarde, mais Bastian tenait bon, et 

 O. se rsolut en vrifier l'exactitude, en rptant les expriences dcrites. 

 Le point de dpart de ses recherches fut que rien ne serait plus dmons- 

 tratif que la sous-culture dans des milieux dmontrs striles. Les milieux 

 de culture employs furent les solutions de Bastian (tartrate d'ammonium 

 neutre et phosphate de sodium), le bouillon ordinaire strile, et enfin le 

 bouillon tryptique, consistant en une solution de casine digre avec de la 

 trypsine, contenant de la tyrosine que Bastian dclare trs favorable au nom- 

 bre et la croissance des organismes, et d'autres amino-acides encore. 

 On prpara une srie de 90 tubes, en employant trois diffrents chantillons 

 de silicate de sodium, les solutions tant prpares immdiatement avant 

 usage. Les tubes employs furent du modle employ par Bastian. Ils arri- 

 vaient scells, mais avant emploi on les chauffait une heure 200 C. Aprs 

 refroidissement on cassait la pointe et on remplissait avec les solutions 

 appropries ami-hauteur. Aprs rescellement, on les strilisait ou bien 10 mi- 

 nutes entre 116 130, ou 60 minutes 100, ou 20 minutes 100, trois 

 jours de suite. La strilisation se faisait ou bien l'autoclave ou, selon la 

 mthode Bastian, dans un bain au chlorure de calcium. Aprs strilisation 

 les tubes prsentaient l'apparence dcrite par Bastian et sans doute conte- 

 naient des solutions d'oxydes ferriques et siliciques. On les laissait un mois 

 au moins l'tuve 37, puis on les exposait la lumire du jour attnue 

 pendant un temps pouvant aller jusqu' trois ans avant examen des dpts 

 centrifugs et sous-culture. Pour viter la contamination, tout se passait dans 

 une boite carre forme de linges tremps dans du lysol 2 %. Parfois on 

 faisait encore des vaporisations de lysol 4 %. Des pipettes strilises 

 qui avaient t introduites travers les tampons, furent prpares, et aussi 

 des tubes de bouillon tryptique strile. On agitait fond les solutions exp- 

 rimentales pour dtacher les parcelles pouvant tre attaches aux parois, 

 on centrifugeait, et on laissait reposer un jour ou deux. On entamait le col 

 au couteau verre, et aprs que tout, objets et mains, et t mouill de 

 lysol, on coupait avec une pointe de verre au blanc. Le prcipit et un peu 

 de liquide taient retirs avec une pipette frache, strile, aprs flambage des 

 orifices des tubes, et mis dans les milieux de culture. Les tubes bouillon 

 restaient d'abord 10 ou 15 jours la temprature ambiante, puis, autant de 

 temps, 37 C. Les solutions taient conformes celles de Bastian, aux 

 mmes titres, et avec des chantillons de silice de trois origines diffrentes, 

 y compris celle que . prfrait Bastian. Les rsultats obtenus furent les 

 suivants : Solution jaune, 3 gouttes. Quelques bacilles morts, et nombreux 

 corps ovales ayant les dimensions et l'apparence des torules. Solution 

 jaune, 2 gouttes. Une seule fois des bacilles vivants, formant une pellicule 

 paisse, poussant en chane, analogue au subtilis. Facilement cultivs en 

 toutes sous-cultures. Solution incolore, 12 gouttes. Quelques bacilles morts 

 aux extrmits carres. Impossible de les cultiver dans aucun milieu. 

 Le subtilis d'O. est abondant dans son laboratoire et dtermine de frquentes 

 contaminations. Il n'a t trouv vivant que dans un seul tube qui avait t 

 ouvert peu aprs strilisation, et avec moins de prcautions que de coutume. 

 Pour O. sa prsence doit s'expliquer par contamination par l'air, car le tube 

 ne resta que 2 mois expos la lumire et n'aurait pas pu pousser de la 

 faon indique par Bastian. Les bacilles morts trouvs dans d'autres 

 tubes doivent s'expliquer par une contamination invitable avant strilisa- 

 tion. Dans diverses pellicules on pouvait voir des corps plus ou moins circu- 

 laires, ressemblant des bacilles, dans un des tubes les formes taient assez 



