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Natiinv'issenschaftliche Wochenschrift. 



Nr. 17. 



erzielte man durch Anwendung' fester Nlu'bden. Die 

 Brauchbarkeit doi'selben liatte man dadurch erkannt, dass 

 Scheiben gekochter Kartoffehi, welche einige Zeit an der 

 Luft gelegen hatten und dann, vor dem Austrocknen ge- 

 schtzt, weiter aufbewahrt wurden, nach 1 oder meh- 

 reren Tagen auf der Oberflche eine Anzahl veischieden- 

 farbiger Pnktchen zeigten, die sich ziemlich schnell ver- 

 grsserten und bald die ganze OberHche bedeckten. Die 

 nhei'e Untersuchung lehrte, dass jene Pncktchen An- 

 hufungen, Kolonien" von Bakterien waren, und dass 

 berraschender Weise jede Kolonie stets nur Individuen 

 einer einzigen Art enthielt. Diese anfangs auffallende 

 Thatsache hatte man sehr. bald richtig dahin gedeutet, 

 dass jede Kolonie die Stelle bezeichnete, wohin aus der 

 Luft eine einzige Spore niedergefallen wai' und sich von 

 anderen Arten unbehindert zu einer Ivolonie der betief- 

 fenden Art, zu einer Reinkultur" entwickelt hatte. 



Dieser grosse Vorzug der festen Nhi'biiden vor den 

 flssigen wurde von Koch sehr bald als ein wichtiges 

 Hilfsmittel erkannt um aus liakteriengemengen die ein- 

 zelnen Arten fr sich auszusondern. Entnimmt man 

 nmlich mittels eines keimfreien Messers ein wenig 

 Impfstoff" aus einem Bakteriengemenge, streicht ihn in 

 mglichst dnner Schicht auf die ebene Flche einer 

 halbierten, gedm])ften Jvartoflfel, so entwickeln sich nach 

 einigen Tagen grssere Kolonien. Das eigentmlich ge- 

 fleckte Aussehen dieser Kolonien beweist, dass sich be- 

 reits Gruppen gebildet haben, die vorwiegend aus Indi- 

 viduen einer einzigen Bakterienart bestehen. Dadurch, 

 dass man aus jeder durch ihre Farbe sich abhebenden 

 Gruppe ein wenig entnimmt und das obige Verfahren 

 (die Verdnnung" des Impfstoffs) wiederholt, gelingt es 

 sehr bald Kolonien zu bekommen, die immer nur eine 

 einzige Art enthalten, also ,, Reinkulturen" der betreffen- 

 den Arten darstellen. 



Um den Nhrboden vor dem Austrocknen zu 

 schtzen, und besonders um die in der Luft schweben- 

 den Keime abzuhalten, mssen die Kartoff'elscheiben so- 

 fort nach der ,, Impfung" in eine feuchte Kammei'" ge- 

 bracht werden, d. h. in eine mit einem gut schliessonden 

 Deckel versehene Glasschale ^'=), deren Boden mit feuchtem 

 Filtiierpapier ausgekleidet ist. Aus obigen Grnden 

 iiniss auch das Impfen fiischer Nlubden mglichst 

 schnell geschehen; auch darf beim Entnehmen des Impf- 

 stoffs der Deckel der feuchten Kammer nur ^\'enig ge- 

 lftet werden. 



Die festen Nhrbden hatten trotz der oben geschil- 

 derten Vorzge aber doch den grossen Nachteil, dass sie 

 undurchsichtig und somit fr direkte mikroskopische Be- 

 obachtung unbrauchbar waren. Auch diesen Mangel 

 wusste Kochs Erfindungsgabe zu beseitigen. Dadurch, 

 dass er der als Nin-flssigkeit sehr geeigneten Riud- 

 fleisclibouillon eine gewisse Menge von bester franzsi- 

 scher Gelatine beimischte, gelang es ihm, eine allen An- 

 foi'dcM'ungen gengende Nhrsubstanz herzustellen. Um 

 den Nhrwert der Bouillongelatine zu erhhen empliehlt 

 es sich, noch eine gewisse Menge von Pepton (lsliches 

 Elweiss) zuzusetzen. P)ei gewhnlicher Zimmertemperatur 

 bildet diese l'eittongelatine eine durclisi(;litige, nahezu 

 farblose, galleilailigo Masse; bei mehr als 24" wird sie 

 dnnflssig und kann daher auch als flssiger Nhrboden 

 Verwendung finden. 



*) Am einfachstftii bedient man sirli hierzu einer niittelyrussen 

 Krystallisiersehale mit glattf;i'Scliill'encm, luihcin Rande, auf welche 

 man eine zweite vnn etwas grosserem DurcJimessiM- iinigekelirt als 

 Deckel aufsetzt. 



Wie oben erwhnt, sind knstliche Reinkultiu'en 

 fortwhrend durch das Eindringen fremder Keime be- 

 droht. Um letzteres -zu verhten, mussten selbstverstnd- 

 lich die Hilfsmittel der Untersuchung, Apparate, Reagentien 

 etc. fortwhrend verbessert werden.^ Die von den fihcren 

 Forschern erprobten Methoden sind in den letzten Jahren 

 namentlich von Koch und dessen Schlern weiter aus- 

 gebildet und derart verbessei't worden, dass ein berech- 

 tigter Ein\\and gegen die auf diesem Wege erlangten 

 Resultate nicht mehr geltend gemacht werden kann. 



Wer eine bakteriologische Untersuchung beginnen 

 will, iiniss vor allen Dingen seine Hnde und smtliche 

 Apparate und Instrumente sterilisieren", d. h. keimfrei 

 machen. Das Sterisiei'en der Hnde geschieht am besten 

 durch Waschen mit 1 ])yo mille Sublimatlsung,*) noch- 

 maliges Waschen mit Alkohol und Nachsplen mit Aether, 

 den man auf den 1-lnden veidunsten lsst. Die ntigen 

 Instrumente werden unmittelbar vor und nach dem jedes- 

 maligen Gebrauch durch die Flamme eines Bunsen'schen 

 Brenners gezogen. Die Kultiu-gefsse (Glaskolben, Glas- 

 platten und Reagensgiser) werden n Trockenschrank**) 

 eine halbe Stunde lang einer Hitze von mindestens 160" 

 ausgesetzt. Um fremde Keime abzuhalten, werden die 

 Kulturgefsse vor dem Stei'ilisiei'en mit einem mindestens 

 2 cm hohen Watte])ropf verschlossen, der also mit steri- 

 Usiert wird und eifahrungsgemss fr die in der Luft 

 schwebebenden Keime undurchlssig ist. 



Fijr. 21. 



Die Kulturgefsse mssen nun mit einer ebenfalls 

 keimfreien Nhrsubstauz gefllt (beschickt") werden, wozu 

 sich in den meisten Fllen die Koch'sche Peptongelatine 

 eignet. Da whirnd der Beschickung eine Infektion 

 durch Keime aus der I^uft mglich ist, so mssen die 

 entsprechend gefllten und sofort wieder mit dem sterilen 

 Wasserpfropf vci'stopften Gefsse nochmals sterilisiert 

 werden, ehe sie zur Anlegung einer Reinkultur verwendet 

 werden drfen. 



Das Sterilisieren geschieht um besten im Kochschen 

 Dampf-Sterilisierungs-Cy linder [vergl. Fig. 20 f) Aussen- 



) T>. h. einer Anfliisung: von 1 gr Quecksilberchlorid (Hg- Clo) 

 in 1 Liter Wasser, wozu man noch ein wenig Salzsaure beimischt. 

 Diese Lsung i.st so ausserordentlich giftig, dass sie die meisten 

 ]iakterienkeinie fast augenblicklich ttet. 



**) Einem mit doppelten Wnden versehenen, aus starkem 

 Eisenblech bestechenden, verschlie.ssbaren Kasten, welcher mit Gas 

 geheizt wird. 



t) Um bei V'erweiseu auf meine 1. Alihamllung Bd. II1.S.2."> ff. 



