Nr. 46. 



Naturwissenschaftliche Wochenschrift. 



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Princip der fractionirten Fllung. Als besonders brauchbar 

 hatte sich das Magnesiunisulfat erwiesen. Uie Antitoxine 

 waren zum grssten Theil in den Niederschlag ber- 

 gegangen, das stark eiweisshaltige Filtrat enthielt nur 

 unbedeutende Reste. Der Niederschlag wurde in Wasser 

 gelst, in strmendem Wasser dialysirt, tiltrirt und ein- 

 gedampft. Das Ansteigen des Scbutzwertb.es der Milch hatte 

 auch eine Erhhung des Immunittswerthes des daraus her- 

 gestellten Prparates zur Folge. Bei der Concentration 

 der Diphtherie-Antitoxine hat Wassermann ein ver- 

 ndertes Verfahren angegeben, doch scheint ein fr die 

 Praxis brauchbares Prparat bis jetzt nicht erhalten 

 zu sein. 



Schon bei den Inmmnisirungsversuchen der Meer- 

 schweinchen haben wir gesehen, dass der Grad der 

 Immunitt wuchs mit der Zufhrung weiterer Dosen von 

 Diphtheriegift. Die Immunitt war hochgetrieben", 

 wie der allgemein angenommene Ausdruck dafr ist. 

 Von dem geringeren oder hheren Grad der Immunitt 

 hing auch wieder der geringere oder hhere Werth des 

 gewonnenen Heilserums ab. 



Den Grad der bei den Thieren erzielten Immu- 

 nitt zahlenmssig auszudrcken, war fr das gegen- 

 seitige Verstndniss schon frh wnsehenswerth gewesen 

 und es ist das Verdienst Ehrlich 's, diese Art der Be- 

 stimmung bei der gegen giftige Pflanzeueiwcise er- 

 worbenen Immunitt zuerst angewendet zu haben *). 

 Behring whlte hiernach fr die Diphtherieimmunitt 

 folgende Bezeichnungen. Er ging von derjenigen Minimal- 

 dosis einer lebenden Diphtherie cultur aus, welche bei 

 subcutaner Injection ein Meerschweinchen nach 4 bis 

 5 Tagen sicher tdtet. Nimmt man diese Menge gleich 1, 

 so zeigt das Vielfache desselben, welches von einem Thier 

 ohne jeden localen oder allgemeinen Schaden ertragen 

 wird, den Immunittsgrad an. Die sicher tdtliche Mini- 

 maldosis einer Cultur, welche Behring und Wernicke im 

 Sommer 1891 lange Zeit benutzten, war 0,025 ccm. 

 Uebersteht ein Meerschweinchen die Infection mit 0,1 ccm, 

 so hat es eine Immunitt gleich 4. In gleicher Weise 

 wurde die Immunitt gegen das direct eingefhrte 

 I >iphtherie gift ausgedrckt. 



Die angegebenen Zahlen sind, wie leicht einzusehen, 

 fr verschiedene Culturen, und somit auch fr das ge- 

 wonnene Gift, keine absolut feststehenden, da leider das 

 Arbeiten mit lebenden Culturen mancherlei uncontrollir- 

 bare Zuflligkeiten in sich schliesst wie, z. B. Ver- 

 schiedenheiten der Temperatur und atmosphrische Ein- 

 flsse. 



Ein Diphtheriegift, in Bouillon gelst, behlt aber 

 glcklicherweise seinen Wirkungswerth ber Jahr und 

 Tag, wenn die Lsung mit 1 0/ Carbolsuregehalt vor 

 Licht geschtzt, bei Zimmertemperatur in geschlossener 

 Flasche aufbewahrt wird. 



Die von dem Immunittsgrad der Thiere unmittelbar 

 abhngige immunisirende Kraft des gewonnenen Serums 

 wird ebenfalls durch Zahlen bestimmt. Behring hatte 

 hierzu frher beim Tetanus eine Methode benutzt, die 

 darin bestand, die Kraft des Serums nach derjenigen 

 Menge desselben zu beurtheilen, welche nothwendig ist, 

 um ein Thier von bestimmtem Gewicht gegen die sicher 

 tdtliche Minimaldosis des Giftes zu schtzen. Wurde 

 z. B. eine Maus von 20 Gramm durch 0,01 Serum gegeu 

 die Minimaldosis Gift geschtzt, so entsprach der Werth 

 des Serum 0,01 : 20 oder 1 : 2000. 



Ehrlich war auf andere Weise zu dem gleichen 

 Resultat gekommen. Seit einiger Zeit sind beide Autoren 

 bereingekommen**) die Werthbestimmung des Diph- 



~*) Behring, Ges. Abhdlgn. II. S. 13 ff. 

 **) Wassermann, Real. Kncylop. d.ges.Heilk. 26. Band. S. 328. 



t herieheilserums nach einer neueren von Ehrlich her- 

 rhrenden Methode vorzunehmen, welche grosse Sicherheit 

 gewhrt. Sie beruht auf der schon erwhnten, von Behring 

 aufgefundenen Thatsaclie, dass Gift und Gegengift, ausser- 

 halb des thierischen Krpers gemischt, sieh gegenseitig 

 sofort neutralisiren und zwar nach einfachen Gesetzender 

 Proportionalitt. Dieselbe gestattet natrlich auch whrend 

 der Immunisirungsperiode den Immunittsgrad des Heil- 

 serums genau zu messen, was fr die Praxis besonders 

 wichtig ist. 



Da das Diphtheriegift im Allgemeinen von wechseln- 

 der Strke ist, so ist es zunchst nothwendig, sieh ein 

 auf seinen Werth genau geprftes Gift stets vorrthig 

 zu halten. Gewonnen wird dasselbe nach Behring*) aus 

 Bouillonculturen , welche lange Zeit gewachsen sein 

 mssen, um nennensvverthe Ausbeute zu erzielen. Das 

 Maximum der Giftansammlung wird nach 2 4 Monaten 

 erreicht, whrend es bei dem Tetanusgift schon nach 

 8 Tagen der Fall ist. Dann werden die Bacillen ab- 

 getdtet durch Zusatz von Carbolsure bis zu einem Ge- 

 halt von 1%, whrend die in der Bouillon gelsten Gift- 

 stoffe unverndert bleiben. Die Cultur bleibt stehen, bis 

 die obersten Schichten der Flssigkeit klar geworden 

 sind, dann giesst man ab und prft das Abgegossene auf 

 seinen Giftgehalt an empfnglichen Thieren. Behring 

 benutzt dazu Meerschweinchen, weil die individuelle 

 Empfnglichkeit bei Kaninchen, welche gegen das Diph- 

 theriegift eigentlich noch empfindlicher sind, zu sehr 

 wechselt. Behufs der quantitativen Bestimmung wird nun 

 ein Diphtherienormalgift" benutzt, dessen Giftgehalt 

 durch eine Art Titrirungsmethode bestimmt ist. Zum 

 Ausgang der Titrirung ist eine Normalantitoxin 

 lsung genommen, von welcher 0,1 ccm die Fhig- 

 keit hat, die zehnfache fr Meerschweinchen 

 tdtliche Minimaldosis von Diphtheriegift fr 

 diese Thiere gnzlich unschdlich zu machen, 

 wenn das Gift mit der Antitoxinlsung im Re- 

 agenzglase gemischt wird.**) Diese Mischung, einem 

 kleinen Meerschweinchen subcutan eingespritzt, wird re- 

 actionslos resorbirt. Wird auch nur der fnfte Theil von 

 der Antitoxinlsung weniger genommen, so bekommen die 

 Thiere schon starkes locales Infiltrat, und zeigen durch 

 Gewichtsabnahme eine Allgemeiuerkrankung an. In der 

 Praxis geht man in der Weise vor, dass man mit einer 

 rincette in mehrere Flschcheu je 1 ccm des Normal- 

 giftes thut und dazu das auf den Wirkungswerth zu 

 prfende Serum in abgestufter Dosis, z. B. 0,4 -- 0,3 

 0,2 0,1 0,05 ccm. Die umgeschttelte Mischung 

 wird, eventuell nach Zusatz bis auf 4 ccm physiologischer 

 Kochsalzlsung, sofort Meerschweinehen von 200300 g 

 Krpergewicht eingespritzt, fr welche das in der Mischung 

 enthaltene Diphtheriegift mindestens das zehnfache der 

 tdtlichen Minimaldosis darstellt, Zwei Tage nach der 

 Einspritzung lsst sich ein sicheres rtheil abgeben. 

 Bleiben die Thiere mit den 0,40,1 ccm Serum vllig 

 gesund, whrend das Thier mit 0,05 erkrankt oder stirbt. 

 so wrde die Lsung mit 0,1 Serum der einfachen Normal- 

 antitoxinlsung entsprechen, da ja davon die zehnfach 

 tdtliche Minimaldosis des Diphtheriegiftes neutralisirt 

 ist. Wrde die gleiche Wirkung erst durch den Zusatz 

 von 1 ccm des zu prfenden Serums erzielt, so htte 

 man eine Vio Normallsung, mit 0,01 ccm eine zehnfache. 

 Ehrlich und Wassermann berichteten schon im Frhjahr 



*) Behring, Bekmpfung der Infectionskrankheiten. 1894. 

 S. IT-.'. 



') Man sagt auch, dass den Werth von einfacher Normal- 

 antitoxin oder einer Immunisirungseinheit das Serum besitzt, von 

 dem 0,1 gengt, um 1 ccm Behring's Normalgift zu neutralisiren. 

 Ehrlich, Kossei u. Wassermann, [Jeher Gewinnung und Verwen- 

 dung des D. H. S. Deutsche med. Wochenschr. 1894, Nr. 1(3. 



