No. 43. 



Naturwissenschaft liehe Rundschau. 



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Moleoularmagneten bedingt, nicht aber durch die Mag- 

 netisirung als solche, bezw. die blosse relative Lage 

 der Molecüle in der magnetischen Masse erklärt werde; 

 mit anderen Worten, ob die Molecularmagnete in der 

 Masse parallel oder vertical zur Längsaxe des Stabes 

 gerichtet sind, hat an und für sich keinen Eiufluss auf 

 die thermoelektrischen Eigenschaften der Masse". 



Just. Chr. Holm: Ueber die Methoden der Rein- 

 kultur, und besonders über die Platten- 

 kultur Koch's und die Fehlergrenze dieser 

 Methode. (Comptes rendus dos tvavaux du labovatoire 

 de Carlsberg, 1891, Vol. 111, p. 1.) 

 Emil Chr. Hansen : Was ist die reine Hefe 

 Paäteur's? Eine Experiroentaluntersuchuug. 

 (Ibid., Vol. 111, p. 24.) 

 Derselbe: Untersuchungen über die Physio- 

 logie und Morphologie der Alkoholfermente. 

 VIII. Ueber die Sporeukeimuug bei den 

 Saccharomyceten. (Ibid., Vol. III, p. 44.) 

 Die Methoden der Reinkultur, welcher die Bac- 

 teriologie ihre grossen Fortschritte verdankt , sind 

 bekanntlich in neuerer Zeit, zuerst von Pasteur, 

 auch auf die Hefepilze ausgedehnt worden und haben, 

 besonders durch die Bemühungen E. Chr. Hansen's 

 und seiner Genossen am Carlsberg - Laboratorium in 

 Kopenhagen , werthvolle Beiträge zur Kenntniss der 

 Formen und der Lebensweise dieser wichtigen Pilz- 

 gruppe fördern helfen. Hansen ist mit grösserer Con- 

 seijuenz als die früheren Forscher bei der Herstellung 

 der Reinkultur von dem Grundsatze ausgegangen, dass 

 eine Kultur nur dann als rein zu betrachten sei , wenn 

 sie nachweislich von einem einzigen Individuum 

 abstammt. Eine genaue Zählung der in einem Flüssig- 

 keitströpfchen enthaltenen Zellen , die mit einem in 

 quadratische Felderchen eingetheilten Deckglase aus- 

 geführt wird, geht voran. Die Aussaat findet mit einem 

 Volumen statt, das nur eine einzige Zelle enthält. Nach- 

 dem die Entwicklung begonnen hat, wird sorgfältig 

 beobachtet , ob dieselbe auch wirklich nur an einer 

 einzigen Stelle im Versuchsballon beginnt. Nur die 

 Kulturen, bei denen letzteres der Fall war, können un- 

 bedingt als rein betrachtet werden. Dieses Verfahren 

 ist mit Ilefepilzen verhältnissmässig leicht auszuführen, 

 denn diese sind schon bei schwächeren Vergrösserungen 

 sichtbar und daher leichter zu zählen, auch sinken sie 

 in der Nährflüssigkeit (Bierwürze) zu Boden und bleiben 

 unbeweglich liegen. Aus naheliegenden Gründen ist 

 dasselbe Verfahren auf die Bacterien kaum oder gar 

 nicht anwendbar. Für diese bleibt vorläufig Koch's 

 Plattenverfahren das wesentlichste und beste. Dasselbe 

 besteht bekanntlich darin, dass man die die Keime ent- 

 haltende Flüssigkeit mit Gelatine versetzt und nach ge- 

 hörigem Schütteln auf eine Platte ausgiesst. Die durch 

 das Schütteln isolirten Keime werden durch die er- 

 starrende Gelatine fixirt und entwickeln sich zu von 

 einander unabhängigen, also reinen Kolonien. Es kann 

 aber vorkommen, dass die Keime selbst durch starkes 

 Schütteln nicht völlig von einander getrennt werden, 

 und daher sind die nach Koch's Verfahren hergestellten 

 Kolonien nicht immer unbedingt rein. Da es wünschens- 

 werth ist, zu wissen, mit welcher Sicherheit man nach 

 dieser Methode zu Reinkultureu gelangt, so hat Herr 

 Holm es unternommen, die Fehlergrenze des Koch'- 

 schen Verfahrens genauer zu bestimmen. 



Zu den Versuchen wurden nicht Bacterien, sondern 

 einige der genau bekannten Hefearten, theils einzeln, theils 



gemischt, verwendet. Die Gelatine mit den Hefezellen 

 wurde auf der Unterseite eines Deckgläschens ausgebreitet 

 und dieses dann in der feuchten Kammer beobachtet. 

 Innerhalb eines markirten Kreises, der dem Gesichtsfelde 

 eines schwachen Olijectives entsprach, wurde die Zahl 

 der Hefezelleu genau festgestellt und ihre gegenseitirre 

 Lage gezeichnet, dann wurde nach Verlauf von 1 bis 

 2 Tagen die Zahl der Kolonien, welche daraus entstanden 

 waren, ermittelt. Im Allgemeinen war die letztere kleiner 

 als die Zahl der zum Aussprossen gelangten Zellen (die Zahl 

 der nicht keimenden Zellen war von der der ursprünglich 

 vorhandenen subtrahirt worden); im Durchschnitt lieferten 

 108 aussprossende Zellen 100 Kolonien. Der Grund 

 dafür ist, dass trotz des Schütteins der Gelatine nicht selten 

 zwei Zellen einander so nahe lagen, dass die aus ihnen 

 hervorgehenden Kolonien zu einer einzigen verschmolzen. 

 Nur in einem unter 2.3 Fällen, also in 4 bis 5 Proc, 

 waren die Zahlen der keimenden Zellen und der ent- 

 standenen Kolonien gleich , letztere also sicher särnmt- 

 lich rein. Hieraus schliesst Herr Holm, dass das Koch'- 

 sche Verfahren keine absolut befriedigenden Resultate 

 giebt. Zugleich machte Herr Holm die Erfahrung, dass 

 die zu Anfang des Gährungsprocesses entnommenen 

 Hefezellen sich schwieriger von einander trennen lassen 

 als die zu Ende entnommenen. Die Feststellung der 

 Zahl der Zellen , die sich nicht zu Kolonien entwickelt 

 hatten, ergab ferner das Resultat, dass die zu Beginn 

 des Gährungsprocesses entnommenen Hefezellen lebens- 

 kräftiger sind, indem nur 4,5 Proc. von ihnen sich nicht 

 entwickelten, während 25,5 Proc. unentwickelt blieben, 

 wenn die Hefe zu Ende der Gährung entnommen war. 

 Dieser Unterschied wird besonders deshalb so auffällig, 

 weil die Gelatine überhaupt für die Hefezellen kein be- 

 sonders günstiger Nährboden ist; immerhin erwies sich 

 unter verschiedenen Gelatinepräparaten die mit Bier- 

 würze gemischte Gelatine als die zu Kulturen der Hefe- 

 pilze geeignetste. 



In Folge einiger Angriffe gegen die Notwendigkeit 

 und Zweckmässigkeit der Hefereinkultur im strengsten 

 Sinne, die Herr Hansen von Seiten der Herren Duclaux 

 und Veiten erfahren, hat derselbe die Frage, wie 

 weit nach der älteren Methode von Pasteur Hefe- 

 reiukulturen zu erzielen seien, einer experimentellen 

 Prüfung unterzogen. Pasteur hatte Reinkulturen der 

 Hefepilze herzustellen versucht, indem er die zu iso- 

 lirende Art in ihren Lebensbedingungen möglichst be- 

 günstigte, während er zugleich die Ent Wickelung der 

 auszuschliesseuden Arten möglichst zu hemmen suchte. 

 Diese Kulturen fanden in einer 10 proc. Saccharose- 

 lösung (Rohrzucker) statt, die mit etwas Weinsteinsäure 

 versetzt war; letztere hatte den Zweck, die Entwickelung 

 der Bacterien zu hemmen. Dieses Verfahren hat, wie 

 man von vornherein übersehen kann , die Uebelstände, 

 dass man, um Erfolg zu haben, im Voraus die Lebens- 

 bedingungen der einzelnen Hefearten kennen muss, und 

 dass es darüber im Unklaren lässt, ob nicht schliesslich 

 in der erhaltenen Kultur mehrere Arten von nahezu 

 gleichen Lebensbedingungen neben einander vorhanden 

 sind. Die angestellten Versuche gaben über die Unzu- 

 länglichkeit desselben noch weiteren Anfschluss. Bei 

 der ersten und zweiten Versuchsreihe verfuhr Herr 

 Hansen folgendermaassen: In drei Kolben , die eine 

 10 proc. Saccharoselösuug mit y 20 Proc. Weinsteiusäure 

 enthielten, wurden nach sorgfältiger Sterilisation gleiche 

 Mengen absoluter Reinkulturen der folgenden Hefepilze 

 eingebracht: In A: Saccharomyces cerevisiae I, S. Pasto- 

 rianus I, S. Pastorianus III, S. ellipsoideus IL In B: 

 Carlsberg- Unterhefe Nr. 1, S. Pastorianus I, S. Pasto- 



