8 XXI. Jahrg. 



Naturwissenschaftliche Rundschau. 



1906. Nr. 1. 



in Nährstoffe zu überführen. So gibt Zopf aus- 

 drücklich an, daß Arthabotrys die stark chitinhaltigen 

 Organe seiner Opfer (Tylenchns) verschmäht, und der 

 Augenschein lehrt, daß dasselbe für viele andere 

 hierhergehörige Fälle gilt. 



„Somit ist noch ganz unbekannt, welcherlei Pilze 

 oder andere niedere Organismen das Chitin ver- 

 arbeiten, zum Aufbau ihres Körpers benutzen und so 

 am Kreislauf der übrigen organischen Stoffe teil- 

 nehmen lassen." 



Hrn. Benecke ist es gelungen, aus dem Meer- 

 wasser einen Spaltpilz zu isolieren, dem diese Fähig- 

 keit zukommt. 



Den Versuchen lag das elektive Züchtungsverfahren 

 zugrunde. Nährböden, die die nötigen Nährsalze und 

 außerdem Chitin als Kohlenstoff- und Stickstoffquelle 

 enthielten , wurden beimpft mit geringen Spuren 

 mikrobenhaltiger Flüssigkeit von Stellen, an denen 

 das Vorkommen Chitin spaltender Kleinlebewesen wahr- 

 scheinlich war. 



Zur Gewinnung des Chitins wurden die Panzer 

 der Nordseekrabbe (Crangon vulgaris), des Hummers, 

 des Flußkrebses oder des Taschenkrebses (Cancer 

 pagurus) mittels Salzsäure entkalkt, mit Natronlauge 

 gekocht und dann entweder gleich (Krabben) mit heißem 

 Wasser, Alkohol und Äther behandelt, oder zuvor 

 (die Panzer der übrigen Tiere) nach Entfernung der 

 Lauge noch mit Kaliumpermanganat gekocht und 

 darauf zur Beseitigung des Mangansuperoxyds einige 

 Tage in Salzsäure gelegt. Auf diese Weise wurden 

 aus einem Kilogramm frischer Nordseekrabben 10 bis 

 15 g, aus einem Kilogramm lebender Taschenkrebse 

 etwa 30 g trockenes Chitin erhalten. Da letzteres 

 schwer zu pulvern ist, wird es am besten in recht fein 

 geschnittenem Zustande in die Nährlösungen gebracht. 

 Es stellt, wie die Reaktion mit Chlorzinkjod zeigt, 

 kein homogenes chemisches Präparat vor. Um auch 

 ein solches als Nährstoff zu verwenden, wurde außer- 

 dem pulverförmiges Chitin durch Lösen der 

 Panzerstücke in bei 0° gesättigter Salzsäure und Ein- 

 gießen dieser Lösung in die zehnfache Menge kalten 

 Wassers hergestellt. Das Chitin fällt dabei als feines 

 Pulver aus , das Verf. mit der Mehrzahl der Chitin- 

 forscher als reines Chitin betrachtet. 



Als Impfmaterial kam meistens faulendes Cope- 

 podenplankton, ferner auch Diatomeen- und Peridineen- 

 plankton aus der Kieler Föhrde zur Verwendung. 

 Die elektiven Rohkulturen wurden hergestellt 

 durch Lösen von je 0,03 % Dikaliumphosphat und 

 ebensoviel Magnesiumsulfat in iy 2 %iger Kochsalz- 

 lösung, Zufügen von Chitin in der zuerst beschriebenen 

 Form und Beimpfen mit einer Platinöse voll Früh- 

 jahrsplankton aus dem Kieler Hafen. Das Kochsalz 

 diente zum Ersatz der im Seewasser gelösten Salze. 

 Nach etwa drei Wochen war die Flüssigkeit mit zahl- 

 reichen Bakterien und Protomastiginen erfüllt und 

 die erweichten Chitinstücke mit dichten Zooglöen 

 kleiner Spaltpilze und encystierten Flagellaten be- 

 deckt. Nach weiteren vier Wochen war das Chitin 

 bis auf geringe, schleimige Reste verschwunden. 



Die Kulturflüssigkeit enthielt jetzt außer massen- 

 haften Bakterien und Flagellaten zahlreiche Chloro- 

 phyll- und phäophyllführende Organismen (Chlamy- 

 domonaden und Diatomeen), die sich nach abermals 

 vier Wochen stark vermehrt hatten; zuletzt traten 

 die Chlamydomonaden in den Vordergrund, die Dia- 

 tomeen etwas zurück. 



Aus dem Verlaufe dieser Rohkulturen ergibt sich, 

 daß im Meere Kleinlebewesen vorkommen, die bei 

 alleiniger Zufuhr von Chitin und Nährsalzen üppig 

 gedeihen und das Chitin in Verbindungen überführen, 

 auf deren Kosten zunächst andere heterotrophe 

 (saprophytische), sodann autotrophe (assimilierende) 

 Wesen (Diatomeen und Chlamydomonaden) leben 

 können. Allem Anscheine nach mußte der zoogloea- 

 bildende Bazillus für die Chitinzersetzung verant- 

 wortlich gemacht werden. Der Beweis hierfür konnte 

 nur durch Reinkulturen geliefert werden. 



Hierzu wurde Nähragar hergestellt, der lV2% 

 Gelose (d. h. mit Säuren und Ammoniak gereinigten 

 käuflichen Agar), je 0,03% Dikaliumphosphat und 

 Magnesiumsulfat und lVäVo Kochsalz, also dieselben 

 Salze wie die Rohkulturen , und außerdem fein zer- 

 riebenes Chitin enthielt. Der Nähragar wird sterili- 

 siert, mit einer Spur einer Rohkultur beimpft und in 

 Petrischalen ausgegossen. Bald umgibt sich jedes 

 Chitinbröckchen mit einem bräunlichgelben Hofe, 

 der in den Agar feine Ausstrahlungen aussendet. 

 Durch wiederholte Abimpfung kleiner Chitinteile er- 

 hält man nun Reinkulturen des Spaltpilzes. Das 

 Chitin überzieht sich mit der oben geschilderten 

 Zoogloea und kann sich allmählich ganz in eine 

 solche verwandeln, so daß eine förmliche Bakterien- 

 pseudomorphose entsteht. Die Stäbchen haben Geißeln 

 von doppelter Körperlänge; Sporen werden nicht ge- 

 bildet. Nach seinen Eigenschaften ist der Spaltpilz 

 in die Gattung Bacillus Migula (Bacterium Lehm, und 

 Neumann, Bactridium A. Fischer) zu stellen. Verf. 

 schlägt dafür den Namen Bacillus chitinovorus vor. 

 Der Bazillus ist polyvor und gedeiht auch ohne 

 Chitin mit anderen Nährstoffen. Eine sehr gute 

 Kohlenstoff- Stickstoffquelle für ihn ist z. B. Witte- 

 Pepton. Trauben- und Rohrzucker in Verbindung 

 mit Nitraten, weniger gut Ammoniaksalzen, bilden 

 gleichfalls ein gutes Nährmittel. Dasselbe gilt für 

 Mannit und Glycerin, sowie für die Alkali- und Kalk- 

 salze der Apfel-, Wein- und Essigsäure, während 

 Formiate und Oxalate untauglich sind. Auch fettes 

 Öl (Mandelöl), Stärke oder Cellulose werden vom 

 Bacillus chitinovorus nicht verarbeitet, wenigstens 

 nicht, wenn Nitrate oder Ammoniaksalze als Stick- 

 stoffquellen geboten werden. Hornsubstanz (Keratin) 

 erwies sich als ganz guter Nährstoff für den Spalt- 

 pilz. Der Byssus der Miesmuschel wurde von ihm 

 aber nicht angegriffen. 



Die morphologische Ähnlichkeit des Bacillus 

 chitinovorus mit gewissen denitrifizierenden Bakterien 

 des Meeres veranlaßte Verf., sein Salpeter-Reduktions- 

 vermögen festzustellen. Er fand, daß der Spaltpilz 

 bei Gegenwart von organischen Säuren oder Pepton 



