Nr. 44. 



NiiliirwissciischaCicbc Wochciiscliiili. 



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biitte. Besonders enipfincUich scliciiit die wssrigc L- 

 sung gegen das Eindaui|jfcu zu sein; sie leidet dabei 

 aber weniger, so lange noch gengend Flssigkeit vor- 

 handen ist, als gegen Ende des Eindanipfens, wenn die 

 Lsung sehr concentrirt wird; es scheiden sich dann ge- 

 rinnselartige Flocken aus, welche auf Wasserzusatz sich 

 nicht wieder lsen. Eine Probe des Niederschlags, 

 welche auf dem Wasserbade wiederholt zur Trockne ein- 

 gedampft und gelst wurde, hatte scliliesslieh ihre Wir- 

 kung vollkommen verloren. Auch durcii lngeres Stehen 

 und durch schrferes Trocknen bei hherer Temperatur 

 wird das gereinigte Tuberculiu theilweise unlslich. An- 

 fangs nahm ich an, dass die unlslichen Bestandtheile 

 dem Tuberculin beigemengte fremde Substanzen seien, 

 welche man durch vorsichtiges trockenes Erhitzen, durch 

 Behandeln mit heissem Dampf u. s. w. ausscheiden knne. 

 Auch dann noch, als sich herausstellte, dass die unlslich 

 gewordenen Strte (wenn sie nicht durch wiederholtes 

 Erhitzen verndert waren), dieselbe Wirkung wie das 

 Tuberculin selbst hatten, Hess sich immer noch anneh- 

 men, dass es sich um coagulirte Eiweisskrper handelte, 

 welche den wirksamen Stoff mit niedergerissen haben 

 konnten. Da es aber weder gelang, durcli andere Eiweiss- 

 stoffe, welche der wssrigen Tuberculinh'isung zugesetzt 

 und zur Coagulation gebracht wurden, noch durch andere 

 zu diesem Zweck in der Lsung bewerkstelligte Nieder- 

 schlge das wirksame Princip auszufllen, so musste diese 

 Auffassung wieder aufgegeben werden, und ich mchte 

 vorlufig die fragliche Substanz, da sie die gleiche Wir- 

 kung wie das Tuberculin hat, als eine in Wasser unls- 

 liche Modification des Tuberculins ansehen. 



Wenn das gereinigte Tuberculin nicht sehr sorgfltig 

 hergestellt und aufbewahrt wird, enthlt es innner eine 

 geringe Menge dieser unlslichen Substanz, und man er- 

 hlt keine ganz klare Flssigkeit beim Auflsen. Der 

 Zusatz einer geringen Menge von Natriumcarl)onat bis 

 zur deutlieh alkalischen Reaction gengt dann aber in 

 der Regel, um alles in Lsung zu bringen. 



Lsungen des reinen Tuberculins in Glycerin 50 " (, 

 sind dagegen sehr haltbar. Eine von mir seit vier Mo- 

 naten aufbewahrte Lsung hat sich bis jetzt unverndert 

 wirksam gehalten. Wenn die Lsungen einen Glycerin- 

 gebalt v(in einigen Frocent haben, kann man sie auch 

 wiederholt eindampfen und wieder lsen, ohne dass sie 

 dadurch geschdigt werden. Selbst sehr hohe Tempera- 

 turen vertrgt das Tuberculin, wenn die Lsung des- 

 selben stark glycerinhaltig ist. So wurden mehrere Pro- 

 ben im Autoklaven stundenlang auf 130'', selbst bis zu 

 IO" erhitzt, ohne dass ihre Wirkungsfhigkeit merklich 

 dadurch herabgesetzt wurde*). Das Glycerin spielt somit 

 fr das Tuberculin eine sehr wichtige Rolle als conser- 

 virendes Mittel. 



Fertigt man eine concentrirte Lsung des mg- 

 lichst sorgfltig gereinigten Tuberculins an und giesst 

 davon einige Cubikcentinieter in absoluten Alkohol, dann 

 entsteht nicht, wie man erwarten sollte, sofort ein 

 Niederschlag, sondern nur eine ganz schwache Opa- 

 lescenz. Der Alkohol kann dann Wochen lang stehen, 

 ohne dass sich dieses Aussehen ndert, und ein Nieder- 

 schlag sich absetzt. Das gereinigte Tuberculin ist also 



*) In einem von Professor P f u li 1 angestellten derartigen 

 Versuche wurden zu gleicher Zeit Proben: 1. von Rohtuberculin. 

 2. von wilserigcr Lsung und 3. von 50 "/o glycerinlialtigcr L- 

 sung des gereinigten Tuberculins 2 Stunden lang iui Autoklaven 

 einer Tenipenitur von 160" ausgesetzt, und (laini entsjjreelieni-li' 

 Mengen davon tuberculsen Thieri'U injicirt. Nur das Tliier, 

 welches die witsserigi^ Lsung erhalten hatte, blieli am Lidjen ; 

 die beiden anderen mit Rohtuberculin und glycerinhaltiger L- 

 sung des gereinigten Tuberculins injicirten starben und zeigten 

 ausgesprochene Tuberculinwirkung. 



in Alkohol nicht vollstndig unlslich. SO procentiger 

 Alkohol kann schon ziemlich viel davon aufnehmen, 

 60 "/oi&cr Alkohol betrchtliche Mengen. Wie kommt es 

 nun aber, dass das Tuberkulin aus der ungereinigten 

 Flssigkeit durch Alkohol gefllt werden kann? Dieses 

 Rthsel Hess sich leicht dadurch lsen, dass dem tuber- 

 kulinhaltigen Alkohol der Reihe nach die Bestandtheile 

 der ungereinigten Flssigkeit zugesetzt wurden. Der 

 Glycerinzusatz lie,ss keinen Niederschlag entstehen. Die 

 Extractivstort'c bildeten an und fr sich einen Nieder- 

 schlag-, aber nachdem dieser sich abgesetzt hatte, hatte 

 der Alkohol noch sein oi)alescirendes Aussehen. Erst 

 wenn die Salze hinzugefgt wurden, ballte sich das 

 Tuberkulin zu Flocken und wurde vollstndig als Nieder- 

 schlag abgeschieden. Von den Salzen erwies sich vor- 

 zugsweise das Natriumchlorid als ein geeignetes Fllungs- 

 mittel fr Tuberkulin in Alkohol. Schon ein Tropfen 

 einer konzentrirtcn Natriumchloridlsung gengt, um in 

 mehreren hundert Cubikeentimetern Alkohol das Tuber- 

 kulin zum Ausfallen zu bringen. Dieses Verhalten des 

 Tuberkulins gegen verdnnten Alkohol ist bei der Rein- 

 darstellung wohl zu bercksichtigen. Sobald nmlich 

 durch mehrmaliges Splen mit (iO "/oig"eni Alkohol die- 

 jenigen Mineralsalze, welche die Fllung des Tuberkulins 

 begnstigen, entfernt sind, fngt bei weiterem Splen mit 

 verdnntem Alkohol letzterer an zu opalesciren, d. h. er 

 beginnt das Tuberkulin zu lsen, und man kann auf 

 solche Weise bedeutende Mengen Niederschlge verlieren. 

 Tritt diese Erscheinung ein, dann muss der Alkohol durch 

 Zusatz von Natriumchlorid geklrt, und zur weiteren 

 Splung absoluter Alkohol verwendet werden. 



Von den ehemischen Reaetionen, welche zur Cha- 

 rakterisirung des gereinigten Tuberkulins dienen knnen, 

 seien folgende erwhnt. 



Zunchst giebt es alle Eiweissreaetionen; so die 

 Riuratreaktion, die Adamkie vviez'sche Reaction (Eisssig 

 und concentrirte Schwefelsure); mit dem Mil Ion 'sehen 

 Reagens entsteht ein weisser Niederschlag, der beim Elr- 

 wrmen rthlieh wird u. s. w. 



Phosphorwolframsure, Eisenacetat, Ammoniumsulfat, 

 Gerbsure fllen das Tuberkulin aus seiner Lsung voll- 

 stndig aus. 



Bleiacetat bewirkt eine starke Trbung, aber keine 

 vollstndige Fllung. 



Auch die Essigsure ruft in der wssrigen Lsung 

 des gereinigten Tuberkulins anfangs starke Trbung und 

 selbst geringen Niederschlag hervor, welcher aber auf 

 weiteren Zusatz wieder verschwindet. Die durch Essig- 

 sure abgeschiedene Substanz zeigte bei der Prfung 

 weder eine geringere, noch eine hhere Wirksandicit wie 

 das reine Tuberkulin und scheint der in Wasser unls- 

 lichen Modifikation hnlich, vielleicht damit identisch 

 zu sein. 



Wssrige Pikrinsurelsung bewirkt einen flockigen 

 Niederschlag, der sich beim Erwrmen auflst und beim 

 Erkalten der Flssigkeit wieder erscheint. 



Verdnnte Salzsure und Schwefelsure lassen keinen 

 Niederschlag entstehen. Ebenso verhalten sich diese Suren 

 in strkerer Concentration. 



Salpetersure bewirkt dagegen einen Niederschlag, 

 der beim Stehen zunimmt, beim Kochen eine gelbe L('isnng 

 giebt und auf Zusatz von Natronlauge braunroth wird 

 (Xanthoproteinsurereaction). 



Aschenanalysen und Elementaranalysen des gereinigten 

 Tuberkulins sind von den Herren Proskauer und Brieger 

 ausgefhrt und haben ergeben: 



1. Aschenanalysen: 



L Asche von 0,4816 g Substanz (bei 100 getrocknet) 

 0,0802 = 16,65 7o (Brieger). 



