DE HISTORIA NATURAL 253 



cin B (1). Esta ltima la emple porque, segn Burgeff, el nitr- 

 geno amoniacal es ms favorable para el crecimiento que el nitrge- 

 no ntrico. Hice slido el medio con agar al 1,5 por 100. Todos los 

 tubos con medios de cultivo fueron esterilizados durante treinta 

 minutos a una presin de 15 libras. Por lo tanto, todos los cultivos 

 se desarrollaron en condiciones aspticas. 



Para esterilizar las semillas utilic el mtodo Wilson [5] al hipo- 

 clorito calcico. A este fin puse 10 g. de hipoclorito calcico en 

 140 c. c. de agua destilada. Agit fuertemente durante unos minu- 

 tos y filtr. El lquido transparente obtenido fu el empleado para 

 esterilizar las semillas. Coloqu en un pequeo tubo de ensayo una 

 cierta cantidad de semilla, aad la leja de hipoclorito y agit el 

 tubo hasta que estuvieran humedecidas todas las semillas. Movien- 

 do el tubo repetidas veces mantuve las semillas en la leja durante 

 unos quince minutos. Previamente haba comprobado que las semi- 

 llas de Cattleva y Laelia resistan sin dao en la leja de hipoclo- 

 rito varias horas. 



Directamente, sin previo lavado, hice el traslado de las semillas 

 de la solucin de hipoclorito al tubo donde haban de germinar. 

 Para esa siembra emple un alambre de platino de los que se usan 

 en bacteriologa, cuyo extremo encorvado en pequeo anillo bas- 

 taba para recoger cada vez un centenar de semillas. Inmediata- 

 mente las esparc sobre el medio slido de cultivo. 



Para determinar el grado de desarrollo de las plantitas utilic 

 como criterio el dimetro del embrin, medido con el ocular micro- 

 mtrico. En algunos casos anot el tiempo transcurrido hasta la 

 aparicin de la primera hoja y llev tambin cuenta respecto a las 

 diferencias en el crecimiento. 



Todos los cultivos los tuve en una cmara especial dentro de la 

 estufa con una temperatura de 25 a 30 C. durante el da, y de 15 

 a 25 C. por la noche. 



Antes de la esterilizacin final de los tubos los recubr con un 

 tubo de vidrio de 80 mm. de largo por 25 de dimetro. Esta segunda 

 cubierta tuvo por objeto impedir que pudieran alojarse esporas en 

 el tapn de algodn, que, desarrollndose y creciendo hacia el 



(1) Solucin Pfeffer: (N0 3 ) 2 Ca, 4 g.; N0 3 K, 1 g.; P0 4 HK 2) 1 g.; 

 S0 4 Mg, 1 g.; C1K, 0,5 g.; Cl 3 Fe, 5 g.; agua destilada, seis litros. 



Solucin B: (N0 3 ) 2 Ca, 1 g.: P0 4 HK 2 , 0,25 g.; S0 4 Mg, 0,25 g.j 

 S0 4 (NH 4 ) 2 , 0,50 g.; P0 4 Fe, 0,05 g.; agua destilada, un litro. 



