N. F. VII. Nr. 35 



Naturwissenschaftliche Wochenschrift. 



55' 



Leitung meines hochverehrten Lehrers und Chefs, 

 Herrn Prof. Dr. R. Burri, zum Gegenstand ein- 

 gehenden Studiums gemacht. Das Hauptgewicht 

 legten wir auf die Losung des Problems der 

 normalen Entwicklung obligat anaerober Bakterien 

 unter fortlaufend absolut sauerstofffreien Verhalt- 

 nissen. Als Sauerstoffindikator haben wir uns bei 

 unseren Experimenten mit bestem Erfolg der 

 Leuchtbakterien bedient. 



Im vorliegenden Referat sollen zunachst kurze 

 Notizen orientieren iiber die zahlreichen, in der 

 Originalarbeit zusammengestellten Ziichtungs- 

 methoden fiir obligat anaerobe Bakterien, mit 

 besonderer Beriicksichtigung der beiden ein- 

 fachsten und zweckmafiigsten zum Ziele fiihren- 

 den Mafinahmen; im Anschlufi hieran werden die 

 zurzeit herrschenden Theorien iiber Anaerobiose 

 erwahnt; sodann ist der ausgezeichneten Dienste 

 zu gedenken, die uns die Leuchtbakterien als 

 Sauersoffindikator geleistet haben und zum Schlusse 

 wollen wir unsere Versuche zur Entscheidung der 

 Frage der Moglichkeit fortlaufender normaler 

 Entwicklung obligat anaerober Bakterien unter 

 konstant absolut sauerstofffreien Verhaltnissen 

 mitteilen. 



Die Ziichtung-methoden fur anaerobe Mikro- 

 organismen gruppieren wir mit Rticksicht auf die 

 zur Anwendung gelangenden Hilfsmittel in fol- 

 gender Wd>c: 



1. Ziichtungsmethoden bei anscheinend unge- 

 hindertem Zutritt des Sauerstoffs: 



a) Ziichtungin Nahrboden mit reduzierenden 

 Substan/.en. 



b) Ziichtung in Nahrboden mit Organ- 

 stiicken. 



c) Ziichtung in Mischkultur mit Aeroben. 



2. Ziichtungsmethoden bei absichtlich bewerk- 

 stelligtem Ausschlufi des Sauerstoffs: 



d) Bedeckung der niederen Nahrboden- 

 schicht mit Glas- oder Glimmerplatten. 



e) Hohe Nahrbodenschicht. 



f) Auskochen des Nahrbodens. 



g) Evakuieren. 



h) Verdrangung des Sauerstoffs durch an- 



dere Gase. 



i) Absorption des Sauerstoffs. 

 k) Kombinierte Verfahren. 

 Durch die Zugabe von reduzierenden Stoffen in 

 die Nahrboden sollte fiir den sauerstoffeindlichen 

 Organismus ein ihm zusagendes ,,Klima" ge- 

 schaffen werden, das ihm erlauben wiirde, im lose, 

 nur mit sterilem Wattebausch verschlossenen 

 Reagenzglas, also unter anscheinend ungehindertem 

 Zutritt des Sauerstoffs, sich zu vermehren. Es 

 ist klar, dafi dieses Verfahren in vielen Fallen 

 erfolgreiche Anwendung finden kann. 



Der Zusatz eines frischen und aseptisch her- 

 ausgeschnittenen tierischen Gewebestiickes zu dem 

 fliissigen, mit anaeroben Keimen geimpften Nahr- 

 boden ist in neuester Zeit empfohlen worden. 

 Die die aerobische Entwicklung der Anaeroben 

 begunstigende Substanz, die hierbei in Betracht 



kommt, wiirde von einem bis jetzt noch nicht 

 bekannten Bestandteil der die Gewebe zusammen- 

 setzenden Zellelemente dargestellt. Dieser Methode 

 wird man schon deswegen kaum allgemeine Be- 

 deutung zuschreiben konnen , weil nicht jedes 

 Laboratorium ohne weiteres iiber die zur Aus- 

 fiihrung des Verfahrens notigen Mittel verfiigt. 



Das Verfahren der Mischkultur Anaerober mit 

 Aeroben in fliissigen Nahrboden kann mit Vorteil 

 verwendet werden, wenn der aerobe Mikroorga- 

 nismus vom anaeroben mikroskopisch leicht unter- 

 scheidbar und durch einfachste Kulturmafinahmen 

 mit Sicherheit zu trennen ist. Die intensive 

 sauerstoffabsorbierende Wirkung der Aeroben 

 durch die ganze Schichthohe des Nahrbodens, 

 sowie das von ihnen an der Oberflache, wo sie 

 im Kontakt mit dem Sauerstoff stehen, gebildete, 

 die Kultur gewissermafien abschliefiende Hautchen, 

 lafit die iippigste Entwicklung der obligat 

 Anaeroben zu. Die praktische Verwendbarkeit 

 dieses Verfahrens der Mischkultur geht aus un- 

 seren Versuchen mit aller Deutlichkeit hervor. 



Von den Ziichtungsmethoden mit absichtlich 

 bewerkstelligtem Ausschlufi des Sauerstoffs nehmen 

 das Hauptinteresse die Ziichtungsverfahren in hoher 

 Nahrbodenschicht und jene Mafinahmen in An- 

 spruch, die den Sauerstoff durch andere Gase, 

 besonders durch Wasserstoff, verdrangen, oder ihn 

 mit Hilfe des alkalischen Pyrogallols absorbieren. 

 Giinstige Resultate sind auch bei Anwendung der 

 die niedrige Nahrbodenschicht bedeckenden Glas- 

 oder Glimmerplattchen, namentlich wenn diese 

 in geniigender Grofie zur Verwendung gelangen, 

 erreicht worden. Selbstverstandlich wird auch 

 tiichtiges Auskochen und Evakuieren der Nahr- 

 boden, oder eine mehr oder weniger komplizierte 

 Kombination der genannten Mafinahmen in vielen 

 Fallen von Erfolg gekront sein. 



Fiir die Losung mancher Aufgabe spielt die 

 Wahl der Arbeitsmethode eine hervorragende 

 Rolle und so erhob sich auch fiir uns zunachst 

 die wichtige Frage, welche der zur Isolierung und 

 Ziichtung der Anaeroben vorgeschlagenen Wege 

 sich fiir unsere Zwecke am besten eigneten. Von 

 den iiberaus zahlreichen diesbeziiglichen Arbeits- 

 verfahren haben wir die beiden Methoden von 

 R. Burri und J. H. Wright als die weitaus 

 praktischsten befunden. Das Prinzip der Anaeroben- 

 kultur in hoher, fester Nahrbodenschicht ist von 

 Li b or i us erstmals besonders empfohlen worden 

 und wurde seither in verschiedenen Anwendungs- 

 formen mit grofiem Vorteil in der bakteriolo- 

 gischen Forschung benutzt. Es besteht darin, dafi 

 man zur Isolierung der Anaeroben das feste Nahr- 

 medium in einer Menge verwendet, dafi bei der 

 durch letztere bedingten relativ grofien Schicht- 

 hohe der einmal ausgetriebene Sauerstoff nur sehr 

 langsam in die tiefer gelegenen Schichten dringt. 

 Diese Tatsache bedingt die besonders giinstige 

 Position, in der sich der anaerobe Mikroorganis- 

 mus unter diesen Umstanden dem Sauerstoff 

 gegeniiber befindet, indem ihm Nahrbezirke mit 



