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Naturwissenschaftliche Wochenschrift. 



N. F. VH. Nr. 35 



starken Reagenzglas, das auf halber Hohe durch 

 ein Ouerrohrchen mit einem kiirzeren, ahnlichen 

 Glas verschmolzen ist, dessen Boden sich ca. 

 2 cm unterhalb des Verbindungsrohrchens be- 

 findet. Es wurden in das langere Reagenzglas 

 mittels steriler Pipette 10 cm :1 sterile Kochsalz- 

 bouillon und auf den Grund des kleinen Reagenz- 

 glases ca. 2 cm 3 sterile Kochsalzbouillon ein- 

 gefiillt. Letztere impften wir ab einem leuchten- 

 den Belag einer Kochsalz-Gelatinestrichkultur; 

 wahrend die Kochsalzbouillon im langeren 

 Reagenzglas ungeimpft blieb. Nach drei Tagen 

 trat im kleinen Glaschen Triibung und intensives 

 Leuchten auf. Nun wurden alle Versuchsglaschen 

 gleichzeitig anaerob verschlossen und bei der 

 Optimaltemperatur (ca. 10 C) aufgestellt. Nach 

 zwei Stunden war das Leuchten in den kiirzeren 

 Reagenzglasern verschwunden und es wurde nun 

 ein erstes Glaschen geneigt, d. h. die entleuchtete 

 Kuhur mit der ungeimpften Kochsalzbouillon 

 unter Sauerstoffausschlufi gemischt. Es trat ein 

 sehr deutliches Leuchten auf. Von Zeit zu Zeit 

 wurde mit weiteren Glaschen derselbe Versuch 

 ausgefuhrt, 72 Stunden nach Montierung des 

 Anaerobenverschlusses zum letztenmal mit posi- 

 tivem Erfolg. Nach 96 Stunden war trotz bester 

 Mischung der geimpften und ungeimpften Kultur 

 und trotz starkem Schiitteln absolut kein Leuchten 

 mehr zu konstatieren. Offneten wir jedoch das 

 Versuchsglas, so trat das Leuchten fast momentan 

 sehr intensiv auf - - ein Beweis also, dafi die 

 Kultur durch die absolute Anaerobiose nicht ge- 

 litten hatte; ein Beweis aber auch dafiir, dafi in 

 diesem Falle das konstatierte Nichtleuchten nach 

 Mischung des geimpften und ungeimpften Nahr- 

 bodens nur mit dem Fehlen des Sauerstoffes in 

 letzterem zusammenhangen konnte. 



Es darf also angenommen werden, dafi aus 

 einer im Reagenzglas unter dem W right - 

 Burri'schen Verschlufi befindlichen Nahrlosung 

 in vier Tagen bei ca. 10 C aller freie Sauerstoff 

 absorbiert ist. Bei hoherer Temperatur wurde 

 der betreffende Prozefi voraussichtlich in bedeutend 

 kiirzerer Zeit ablaufen, doch ist in diesem Falle 

 die Kontrolle durch die Leuchtbakterien infolge 

 ihrer ausgesprochenen Warmeempfindlichkeit aus- 

 geschlossen. Nun wissen wir aber, dafi eine bei 

 37 C optimal gedeihende Kultur eines obligat 

 Aeroben, z. B. Bac. mesentericus, einem ihr 

 eingeimpften obligat Anaeroben, z. B. Bac. putri- 

 ficus zur besten Entwicklung verhilft infolge der 

 ihr wie einer Leuchtbakterienkultur eigenen 

 intensiven sauerstofiabsorbierenden Wirkung. Kom- 

 binieren wir diese Tatsache mit dem Befund, dafi 

 die vier Tage lang dauernde Wirksamkeit des 

 Pyrogallolverschlusses iiber einem sterilen Nahr- 

 boden bei ca. 10" C allein schon imstande ist, 

 wirklich anaerobe Verhaltnisse zu schaffen, so er- 

 kennen wir ohne weiteres, dafi der Zustand 

 volliger Anaerobiose in einem Reagenzglas mit 

 Wright -Burri'schem Verschlufi und aufierdem 

 einer sauerstoffabsorbierenden Kultur bei 37 C 



im praktischen Sinne am schnellsten erreicht 

 sein wird. 



Es blieb nur noch die Frage offen, ob auch 

 eine Mesentericuskultur den Nahrboden e b e n s o 

 schnell wie eine Leuchtbakterienkultur von 

 freiem Sauerstoff saubert. Um dies zu unter- 

 suchen, konnten wir in ahnlicher Weise wie beim 

 letzten Versuch vorgehen. Die sterile Dextrose- 

 bouillon im langern Reagenzglas unseres zwei- 

 teiligen Kultursystems wurde mit Bac. mesen- 

 tericus geimpft und zu 37" C gestellt, bis sich die 

 typische Haul an der Oberflache der Kultur ge- 

 bildet hatte. Nun wurde die Kochsalzbouillon im 

 kleineren Reagenzglas mit Bact. phosphoreum ge- 

 impft und bei Optimaltemperatur belassen, bis 

 sich eine deutliche Trtibung, bzw. bei Luftzutritt 

 intensives Leuchten eingestellt hatte. Nachdem 

 dies geschehen war, wurden die Mundungen der 

 Rohren in gewohnlicher Weise anaerob ver- 

 schlossen und gewartet, bis das Leuchten voll- 

 standig verschwunden war. Dann liefien wir 

 sofort durch geeignete Neigung die entleuchtete 

 Kultur in die Mesentericuskultur hinuberfliefien, 

 konnten dabei jedoch absolut kein Leuchten be- 

 obachten, was doch hatte eintreten miissen, wenn 

 Mesentericus imstande ware, Sauerstoff zu spei- 

 chern, resp. abzugeben. Andererseits war durch 

 diesen Versuch auch bewiesen, dafi die im 

 Moment der Anbringung des Anaerobenver- 

 schlusses in der Kultur eventuell vorhandenen 

 Sauerstoffmengen von der Kultur in kiirzester 

 Zeit verbraucht worden sind. Wenn wir also den 

 im Nahrboden gelosten freien Sauerstoff, der der 

 absorbierenden Wirkung des Pyrogallohvatte- 

 pfropfens iiber dem Nahrboden nur nach und 

 nach zuganglich wird, durch die Tatigkeit eines 

 obligat aeroben Mikroorganismus sehr rasch und 

 vollstandig binden, so haben wir durch die zwei 

 in je ein und derselben Kultur wirkenden Sauerstoff- 

 absorbenten den freien Sauerstoff restlos entfernt. 

 Wir glauben demnach, gesttitzt auf die durch 

 die vortrefflichen Dienste der Leuchtbakterien 

 als Kontrollmittel fur das Fehlen des Sauerstoffs 

 erhaltenen Resultate, den Beweis der relativ 

 leichten Durchfiihrbarkeit vollkommen anaerober 

 Kultur erbracht zu haben. Bei den bisher zur 

 Beantwortung dieser Frage von anderer Seite 

 herangezogenen Versuchen wurde der Moglichkeit, 

 dafi der mit dem Impfmaterial eingefiihrte oder 

 dem Nahrboden anhaftende Sauerstoff eine Rolle 

 bei der Entwicklung der Kultur spielen konnte, 

 niemals mit geniigender Sicherheit vorgebeugt. 

 Nach unseren Versuchen erscheintjeder 

 Zweifel dariiber, dafi es Wesen gibt, die 

 sich bei dauerndem Ausschlufi freien 

 Sauerstoffs normal entwickeln, end- 

 giiltig ausgeschlossen. 



Wir stiitzen diese Behauptung nicht lediglich 

 auf die Versuche mit unserem zweiteiligen Kultur- 

 glas, sondern insbesondere auf die Resultate der 

 Prufung der normalen Entwicklung obligat anae- 

 rober Organismen in unserem mehrteiligen Kultur- 



