N. F. VII. Nr. 35 



Naturwissenschaftliche Wochenschrift. 



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system. Dieses besteht aus einer Anzahl gleich- 

 langer, starkwandiger Reagenzglaser, die in ihrer 

 halben Hohe durch ein eingeschmolzenes Glas- 

 rohrchen derart miteinander verbunden sind, dafi 

 der verbindende Gang von je zwei folgenden 

 Kulturglasern hoher zu liegen kommt, als der- 

 jenige von je zwei vorangehenden. 1 ) Es konnen so 

 Reihen von bis 16 und mehr Glasern hergestellt 

 werden, je nach dem Durchmesser des zur Ver- 

 fiigung stehenden Dampfraumes im Sterilisations- 

 apparat. In diesem werden die Reihen, aufrecht 

 auf einen Drahtkorb gebunden, fraktioniert steri- 

 lisiert. 1st dies geschehen, so kann der fliissige 

 Nahrboden mittels steriler Pipette in jedes Glas 

 eingefiillt und die ganze Reihe vorsichtshalber 

 nochmals fraktioniert sterilisiert werden. Die 

 einzelnen Kulturglaser sind soweit aufgefullt, dafi 

 ein leichtes Neigen der Reihe geniigt, um Material 

 aus dem ersten ins zweite hiniiber zu bringen. 

 Dieses wird dadurch soweit aufgefullt, dafi ein 

 weiteres schwaches Neigen geniigt, um die sterile 

 Nahrfliissigkeit des dritten einwandfrei aus dem 

 zweiten Glas impfen zu konnen. So schreitet 

 man mit der Impfung fort, bis das letzte Glas, 

 das natiirlich nicht ganz voll zu sein braucht, er- 

 reicht ist. 



Um einen obligat anaeroben Mikroorganismus 

 auf die Fahigkeit normaler Entwicklung in fort- 

 laufend konstant absolut anaeroben Verhaltnissen 

 zu priifen, wird man zweckmafiigerweise so vor- 

 gehen, dafi man erst die einzelnen Kulturglaser 

 einer in angegebener Weise mit Nahrfliissigkeit 

 beschickten Reihe mit dem obligat aeroben Bac. 

 mesentericus impft, um den im Nahrboden 

 gelosten, freien Sauerstoff zu absorbieren. Ist bei 

 37 C in jedem Glase schwache Triibung, d. h. 

 vegetative Entwicklung aufgetreten, was nach ca. 

 10 Stunden der Fall zu sein pflegt, so wird die 

 erste Kultur mit dem zu priifenden obligat An- 

 aeroben geimpft und sofort nachher jedes Glas 

 des. Kultursystems einzeln mit dem W right - 

 Burri'schen Verschlufi versehen. Sodann wird 

 die Reihe in den Brutschrank zu 37 C gestellt 

 und die sukzessiven Uberimpfungen konnen von 

 je zwei zu zwei Tagen durchgefiihrt werden. 



So haben wir die fur eine auch theoretisch 

 vollstandig einwandfreie Anaerokultur zu stellenden 

 drei Forderungen erfiillt: 



1. Vollstandige Absorption des iiber dem 

 Nahrboden vorhandenen Sauerstoft's mit 

 Hilfe des Wright-Burri'schen Verschlusses. 



2. Vollstandige Absorption des im Nahrboden 

 vorhandenen Sauerstoffs mit Hilfe des Bac. 

 mesentericus. 



3. Sukzessive Uberimpfungen in groSerer Zahl 

 unter diesen Verhaltnissen vollkommener 

 Anaerobiose mit Hilfe unseres mehrteiligen 

 Kultursystems. 



Die unter diesen Bedingungen gepriiften obligat 

 Anaeroben: Bac. putrificus Bienstock, 



! ) Vgl. die Abbildung 4 Seite 406 dieser Zeitschrift. 



Bac. tetani Nicolaier, unbeweglicher 

 und beweglicher Buttersaurebazillus 

 Schattenfroh und Grafiberger, ein noch 

 nicht beschriebenes, nicht sporenbildendes, obligat 

 anaerobes Stabchen (von Prof. Dr. R. Burri aus 

 toten Bienenlarven geziichtet); sowie die gepriiften 

 typisch fakultativ Anaeroben: Bact. coli Esche- 

 rich, Bac. asterosporus Art h. Meyer, und 

 ein typisch fakultativ anaerober Kokkus haben im 

 ersten wie im letzten Glas unseres 16 teiligen 

 Kultursystems gleich intensiv auftretende Trii- 

 bungen des Nahrbodens erkennen lassen. 



Die Zusammenfassung unserer Beitrage zur 

 Untersuchungstechnik obligat anaerober Bakterien, 

 sowie zur Lehre von der Anaerobiose iiberhaupt, 

 ergibt folgende 



Schlufisatze: 

 a) betreffend die Untersuchungstechnik: 



1. Unter den zahlreichen bisher angewendeten 

 Mitteln zur Herstellung sauerstofffreier Nahrboden 

 und Kulturraume gebiihrt dem Kali-Pyrogallol- 

 gemisch der Vorzug auf Grund seiner einfachen 

 Handhabung, Billigkeit und zuverlassigen Wirkung. 



2. Das Kali-Pyrogallolgemisch ist nicht blofi 

 als schatzenswertes Hilfsmittel bei gleichzeitiger 

 Anwendung oder als Bestandteil anderer, speziell 

 physikalischer Anaerobenverfahren zu betrachten, 

 sondern es ist, allein angewendet, geniigend und 

 hinreichend, um bei jeder beliebigen Ziichtungsart 

 den fiir die Entwicklung der sauerstoffempfind- 

 lichsten Mikroorganismen unschadlichen - - aber 

 nicht notwendigen - - Minimalgehalt von Sauer- 

 stoff im Nahrboden herbeizufiihren. 



3. Das Kali-Pyrogallolgemisch ist sogar imstande, 

 Nahrboden und Kulturraume absolut sauerstofffrei 

 zu machen, wie sich mit Hilfe der Leuchtbakterien 

 zeigen lafit, die ein Sauerstoffreagens von aufier- 

 ordentlicher Scharfe darstellen. Bedeutend schneller 

 wird dieser Zustand der absoluten Anaerobiose 

 allerdings mit Heranziehung lebender, obligat 

 aerober Mikroorganismen erreicht. 



4. Die passendste Form der Ausnutzung des 

 Prinzips der Sauerstoffabsorption ist gegeben in 

 der Anwendung des von R. Burri verbesserten 

 Anaerobenverschlusses von Wright. Dieser 

 eignet sich fiir eine universelle Verwendung beim 

 Arbeiten mit obligaten Anaerobien und seine 

 Vorziige haben auch die Veranlassung zu dem 

 von uns ausgearbeiteten und beschriebenen Platten- 

 verfahren gegeben, welches beziiglich Einfachheit, 

 Zweckmafiigkeit und Billigkeit wohl von keinem der 

 bisher bekannt gewordenen erreicht werden diirfte. 



b) betreffend die Theorie der Anaerobiose: 



5. Nicht nur die obligat anaeroben, sondern 

 auch die fakultativ anaeroben Bakterien sind im- 

 stande, in einer beliebigen Zahl von Generationen 

 den vollstandigen AusschluS freien Sauerstoffs zu 

 ertragen, ohne in der Entwicklung und Ausiibung 

 der spezifischen Funktionen irgendwie geschadigt 

 zu werden. Diese Tatsache ist in Versuchen be- 

 griindet, bei welchen mit den zu priifenden Bak- 

 terienarten in einem besonders fiir den Zweck 



