233 BOLETIN DE LA REAL SOCIEDAI) ESPANOLA 



el verde yodo y carmi'n (Gordonnier y Mirande). Este ultimo es 

 el mas empleado para distinguir las membranas celulosicas delas 

 lignificadas, esclerenqnimatosas y suberificadas. 



Tan sencillo, rapido y seguro como los procedimientos de 

 Gordonnier y Mirande para la doble coloration, es el uso de la 

 hematoxilina y verde yodo, substancias que no he visto indicado 

 nunca que se empleasen combinadas y con el uso de las cuales 

 en un solo liquido obtengo preparaciones coloreadas en verde- 



Preparation del reactivo. Hago, primeramente, una disolu- 

 cion de hematoxilina, segun la formula de Delafield (1). 



Pfeparo luego la disolucion acuosa de verde yodo al 1 por 100. 



Se mezclan luego las dos disoluciones en la proportion de 

 100 c. c. de la primera por 10 c. c. de la segunda. Se agita y que- 

 da preparado el reactivo. 



Marcha que ha de seguirse: 



\. Tratar los cortes por el agua de Javel 6 la solution acuosa 

 de hidrato de cloral. 



2. Lavarlos con agua repetidas veces. 



3. Ponerlos durante diez minutos en una solution concen- 

 trada de potasa causlica. 



4. Lavarlos de nuevo con agua. 



5. Sumergirlos en el colorante, en donde han de tenerse de- 

 cinco a diez minutos. 



6. Lavar con agua. 



7. Pasarlos a la glicerina, si han de montarse en ella 6 en la 

 gelatlna glicerinada, y al alcohol de 90 primero, al absoluto, 

 despues, y por fin al xilol cuando se quieren conservar en el bal- 

 samo 6 en la resina de Dammar. 



En las preparaciones queasi se obtienen resultan coloreadas en 

 rojo las celulas no modificadas, y en verde-azulado los elementos 

 esclerenquimatosos, lignificados y suberificados. 



El tratamiento por la potasa asegura siempre el exito de la 

 operation. 



(1) Se disuelven 4 g:. de hematoxilina cristalizable en 25 c. c. de alcohol abso- 

 lute Previamente se hizo una disolucion acuosa concentrada de alumbre amoniacal. 

 De esta solucion aluminosa se toman 400 c. c. sobre los que se vierte la solucion al- 

 coholica de hematoxilina. Esta mezcla se deja expuesta a !a luz en una botella abier- 

 ta, durante tres 6 cuatro dias, pasados los cuales se Ultra y auaden 100 c. c. de glice- 

 rina y otro tanto alcohol metilico. Pasados dos dias se -vuelve a filtrar. Para usarla 

 se cliluye, generalmente, en agua. 



