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Mikroskopische Teclmik 



gegen verschiedene Agentien betreffen, z. B. 

 bei Plasmolyse, ferner bei mikrochemischen 

 Keaktionen notwendig ist. Mikroskopische 

 Wachstums- und GroBenmessungen 

 nimmt man mittels Mikrometer vor (bei 

 hoheren Pflanzen unter Anwendung eines 

 Horizontalmikroskops). Untersuchungen bei 

 farbigem Licht werden in Dunkelkammern 

 angestellt, in welchen das zum Mikroskop- 

 spiegel oder dem Praparat gelangende Licht 

 entsprechend gefarbte Medien passiert hat. 

 Ueber die Untersuchung der Praparate im 

 spektral zerlegten Lichte vgl. I A 4d. Will man 

 pflanzliche Objekte beierhohterTempe- 

 ratur unter dem Mikroskop untersuchen, so 

 benutzt man einen heizbaren Objekttisch. 

 Zu Beobachtungen in der Kalte verwendet 

 man Kalteobjekttische oder versenkt das 

 Mikroskop samt Praparat in einen Gefrier- 

 kasten, der die Beobachtung und die Aus- 

 fuhrung der beimMikroskopieren notwendigen 

 Handgriffe gestattet. - Umfangreichere 

 pflanzliche Organismen oder Pflan- 

 zenteile mtissen zwecks mikroskopischen 

 Studiums in feine Schnitte zerlegt werden. 

 Soil die Untersuchung an lebensfrischem 

 Material vorgenommen werden, so spannt 

 man entsprechend zugestutzte und orien- 

 tierte Teile davon je nach deren Konsistenz 

 zwischen die Langshalften eines Holunder- 

 mark-, Kork- oder Holzstlickchens ein, und 

 fuhrt aus freier Hand mit einem moglichst 

 scharfen , holilgeschliffenen Rasiermesser 

 zarte Querschnitte aus. Dabei benutzt man 

 zum Fernhalten der die mikroskopische 

 Untersuchung erschwerenden Luft die Vor- 

 sicht, die Schneide des Messers mit Wasser 

 zu befeuchten, das zugleich mit dem Messer 

 in das Objekt eindringt. Die Schnitte bringt 

 man dann in den Tropfeu der Untersuchungs- 

 fliissigkeit (meist Wasser, wasserige Losungen 

 von Zucker oder Farbstoffen oder anderer 

 Stoffe, wie Jod), der man dann eventuell 

 noch Aufhellungsmittel (Eau de Javelle, 

 Chloralhydrat, Kalilauge usw.) zufiigen kann, 

 auf den Objekttrager und bedeckt mit dem 

 Deckglas. Kommt es darauf an, moglichst 

 gleichmaBig diinne, liickenlos aufeinander- 

 folgende Schnitte aus einem Objekt herzu- 

 stellen, so benutzt man ein Handmikrotom, 

 oder die einfachen Schul- oder Studenten- 

 mikrotpme, deren Gefriervorrichtung auBer- 

 dem hier und da gute Dienste leisten kann. 

 Hartere Gegenstande, wie Holzer, schneidet 

 man am besten an Mikrotomen mit 

 hobeleisenahnlichen Messern. Gute Schnitte 

 kann man gefarbt und ungefarbt in Glycerin- 

 Gelatine als Dauerpraparate aufbe- 

 wahren. 



Auch Herbarmaterial kann fur die 

 mikroskopische Untersuchung verwendet 

 werden. Man weicht dann vor Herstellung 

 der Schnitte die Objekte in Wasser, hier 



und da mit einem Zusatz von Kalilauge oder 

 Ammoniak, auch in konzentrierter Milch- 

 saure u. a. auf. 



In Spiritus oder Formol konserviertes 

 oder aufbewahrtes Material laBt sich auf 

 gleiche Weise wie das frische in Schnitte 

 zerlegen, die am besten in Glycerin zu unter- 

 suchen sind. Harte Gegenstande, wie Holzer, 

 sincl leichter zu schneideu, wenn sie eine 

 Zeit lang in einem Gemisch von Alkohol und 

 Glycerin gelegen haben. 



Will man feinere Details, so die Be- 

 standteile des Zellinhalts, studieren, so ge- 

 niigen die bisher angefiihrten Methoden nicnt. 

 Die pflanzlichen Objekte miissen vielmehr 

 auf ahnlich komplizierte Weise, wie sie fur die 

 tierischen angegeben wurde (s. IIA), fixiert, 

 geschnitten, gefarbt und zwecks Aufbewah- 

 ning zum weiteren Studiuni in stark licht- 

 brechende Medien eingeschlossen werden. 

 Als Fixierungsmittel fiir pflanzliche Ob- 

 jekte haben sich hauptsachlich Sublimat- 

 Ib'suugen, Alkohol-Eisessig und Chrom-Os- 

 mium-Essigsaure in verschiedenen Konzen- 

 trationen, kalt oder heiB angewandt, bewahrt. 

 Zur oberflachlichen Orientierung iiber die in 

 dem zu fixierenden Material vorliegenden 

 Entwicklungszustande dient Methylgrun- 

 Essigsaure, die so zur Anwendung kommt, 

 daB man eine kleine Partie des Objekts in 

 einem Tropfen davon durch leichten Dnick 

 auf das Deckglas zerquetscht oder zarte 

 Rasiermesserschnitte in einen solchen ilber- 

 tragt. Es treten dann die Zellkerne mit griiner 

 Farbung deutlich hervor. Nach griindlichem 

 Auswaschen der Fixierungsflussigkeiten, fer- 

 ner Entwassern in Alkohol von steigender 

 Konzentration, das namentlich bei kleinen 

 Objekten, um Schrumpfungen zu vermeiden, 

 auBerst vorsichtig geschehen muB, werden 

 die fixierten Objekte mittels Chloroform, 

 oder Cedernol unter der Wirkung der hoheren 

 Temperatur eines Warmeschranks in Pa- 

 raffin (Celloidin kommt bei pflanzlichen 

 Objekten nur auBerst selten zur Verwendung) 

 eingebettet und nach dem Erkalten mit 

 dem Mikrotom geschnitten. Mittels EiweiB- 

 Glycerin und Wasser erfolgt dann bei maBiger 

 Warme das Aufkleben der Serienschnitte 

 auf den Objekttrager, dann ein Entfernen 

 des Paraffins mit Xylol oder besser noch 

 Terpentin, da dies zugleich die Schwarzung 

 des mit osmiumhaltigen Gemischen fixierten 

 Materials beseitigt, was sonst mittels einer 

 alkoholischen Wasserstoffsuperoxydlosung ge- 

 schehen muBte, dann Beseitigung des Paraf- 

 finlosungsmittels durch absoluten Alkohol 

 und Uebertragen in eine oder mehrere Farb- 

 16 sung en oder Farbstoffgemische. Schnitte 

 aus Material, das in nicht chromsaurehaltigen 

 Gemischen fixiert wurde, beizt man vor dem 

 Uebertragen in die Farblb'sung zweckmaBig 



