Mikroskopische Tedmik 



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ist nicht sicher bekannt. Die Hauptsache 

 werden Adsorptionsvorgange spielen, wenn 

 auch die Mitwirkung chemischer Reaktionen 

 nicht in Abrede gestellt werden soil. 



Als Farbstoffe kommen fur praktische 

 Zwecke nur die Anilinfarben, und von 

 diesen besonders Methylenblau, Fuchsin, 

 Gentianaviolett oder auch Methylviolett, in 

 Betracht. 



Von diesen Farbstoffen farbt das Methylen- 

 blau amlangsamsten, dafiir aber auch am reinsten : 

 es fiirbt eiweiJJhaltigen Hintergrund nur schwach 

 mit und eignet sich deshalb besonders fur Blut, 

 Eiter und Gewebsausstriche. Die violetten Far ben 

 farben sehr rasch, uberfarben aber leicht das 

 Gewebe und sind deshalb besonders fiir Rein- 

 kulturen brauchbar. Fuchsin steht rait seinen 

 Eigenschaften in der Mitte. 



Die Far bio sung en werden durch Ver- 

 diinnen der konzentrierten alkoholischen 

 Losung der Farbstoffe mit der neunfachen 

 Menge Wasser hergestellt. 



Eine erhohte Farbekraft, die fiir manche 

 Zwecke erwiinscht ist, laBt sich diesen Lo- 

 sungen geben, durch Verwendung in heiBem 

 Zustande, und durch Hinzufiigen gewisser 

 Stoffe, die ein leichteres Eindringen der Farbe 

 in die Bakterienzelle bewirken. Solche 

 Stoffe sind Alkalien, Karbolsaure, Ani- 

 lin u. a. Ausgezeichnete farberische Eigen- 

 schaften hat eine von Loftier angegebene, 

 schwach alkalische Methylenblaulosung fol- 

 gender Zusammensetzung : 



Konzentrierte alkoholische Methylen- 

 blaulosung 30 

 Kalilauge 1:10000 100 



Viel benutzt wird auch Karbolsaurezusatz, 

 (2,5 bis 4,5/o) un d Anilin, dessen gesattigte 

 wasserige Losung mit 10% einer gesattigten 

 alkoholischen Fuchsin- oder Gentianaviolett- 

 lo'sung versetzt, ganz besonders intensive 

 Farbung bewirkt. 



Fiir Schnitt far bung eignet sich am 

 besten das Lofflersche Methylenblau. Die 

 in gewohnlicher Weise angefertigten Schnitte 

 werden etwa 5 Minuten gefarbt, mit Wasser 

 gespult und mit einprozentiger Essigsaure 

 kurze Zeit behandelt. Dadurch entfarbt 

 sich das Gewebe etwas, wahrend die Bak- 

 terien intensiv gefarbt bleiben. 



Eine D o pp elf ar bung laBt sich erzielen, 

 wenn man die mit Methylenblau gefarbten 

 Schnitte mit Eosinlosung vorsichtig nachfarbt. 

 Das Gewebe wird dann rot, wahrend die 

 Bakterien blau bleiben. Die Weiterbehand- 

 lung erfolgt mit Alkohol, Xylol, Balsam, 

 wie gewohnlich. 



4. Farbungen fiir besondere Zwecke. 

 Gramfarbung, Sporen- und GeiBel- 



farbung. Eine der wichtigsten Met ho den 



der Bakteriologie ist die Farbung nach 

 Gram. Sie beruht darauf, daB in gewissen - 

 granipositiven Bakterienarten uewisse 



Farbstoffe - - Pararosaniline - - durch Jod- 

 iodkaliumlosung fixiert werden, wiUirend 

 in anderen - gramnegativen Bakterien 

 und den meisten Gewebsbestandteilen dabei 

 eine Lockerung des Farbstoffes stattfindet. 

 Durch nachfolgende Behandlung mit einer 

 Entfarbungsflussigkeit wird dann die Farbe 

 aus den gramnegativen Elementen entfernt, 

 wahrend die granipositiven gefarbt bleiben. 

 Die ersteren lassen sich dann mit einer 

 Kontrastfarbe nachfarben. 



Die Methode eignet sich also dazu, die gram- 

 positiven Bakterien isoliert in dem an- 

 ders gefarbten Gewebe darzustellen. Sie 

 ist auBerdem ein wichtiges Hilfsmittel fiir die 

 Differentialdiagnose, das besonders bei der 

 Erkennung von Gonokokken und Meningokokken, 

 die im Gegensatz zu den meisten anderen Kokken 

 gramnegativ sind, gute Dienste leistet. Aller- 

 dings ist bei dieser Anwendung der Methode 

 zu beriicksichtigen, daB der Begriff der Graru- 

 festigkeit insofern relativ ist, als durch kraftige 

 Entfarbung und besonders durch zu intensive 

 Einwirkung der Kontrastfarbe manche Bakterien, 

 die sonst grarnpositiv sind, umgefarbt werden 

 konnen. 



Das gebrauchlichste Entfarbungsmittel 

 ist Alkohol, dessen Wirkung sich durch 

 Aceton-, noch mehr durch Saurezusatz, 

 verstarken laBt. Schonender wirkt das von 

 Weigert angegebene Anilin. 



Worauf das verschiedene Verhalten der 

 Bakterien beruht, ist noch nicht aufgeklart. 

 Wahrscheinlich spielen aber auch hier Unter- 

 schiede in der Dichtigkeit des Protoplasmas 

 eine groBere Rolle als chemische Differenzen. 



Die urspriingiich von Gram angegebene 

 Methode hat verschiedene Modifikationen 

 erfahren. Sehr gut bewahrt sich die folgende 

 Vorschrift (nach Loffler): 



Farben mit Karbolmethylviolett (9 Teile 

 2,5 prozentige Karbolsaure, ein Teil konzen- 

 trierte alkoholische Losung von Methyl- 

 violett 6 B, fiir Pneumokokken Methylviolett 

 BN) 2 bis 5 Minuten, Abspiilen in Wasser. 

 Joajodkaliumlosung (ein Teil Jod, zwei 

 Teile Jodkalium, 300 Teile Wasser) zwei 

 Minuten. Alkohol, solange noch Farbe 

 Zeolithe zur Unterscheidung von ahnlichen 

 Mineralien; durch Aetzen mit Salzsaure 

 abgeht. Nachfarben in sehr verdiinnter 

 Fuchsinlosung 15 Sekunden. 



Auch fiir Schnitte laBt sich die Methode 

 sehr gut benutzen; die Nachfarbung wird dann 

 besser mit Bismarckbraun oder Safranin 

 vorgenommen, oder der Schnitt wird vor 

 der Grambehandlung mit Karmin gefarbt. 



Von sonstigen speziellen Farbemethoden 



