70 XVIII. Jahrg. 



Naturwissenschaftliche Rundschau. 



1903. Nr. 6. 



zwei Arten von Heubazillen, nämlich Bacillus subtilis 

 und Bacillus vulgatus, bei höherer Temperatur sehr 

 toxische Eigenschaften für viele Pflanzen besitzen. 



Die ersten Versuche wurden in der Weise aus- 

 geführt, daß in Petrischalen, auf deren Boden sich 

 ein angefeuchtetes Stückchen Filtrierpapier befand, 

 frisch geschnittene Scheiben verschiedener Pflanzen- 

 teile gebracht und mit einer geringen Menge Wasser 

 Übergossen wurden, das mit Erde (Verhältnis 1:1) 

 tüchtig geschüttelt war, oder sie wurden mit feuchter 

 Erde bestrichen. Das Ergebnis dieser Infektionen 

 war, daß bei niederer Temperatur (23°, 30°) niemals 

 Fäulnis auftrat, dagegen sehr oft bei höherer Tempe- 

 ratur (37°, 42°). Als Fäulniserreger wurde immer 

 eins der beiden genannten Heubakterien festgestellt. 



Die Pflanzen, die von Bacillus subtilis angegriffen 

 wurden, waren Topinambur, Kartoffel und Haselnuß. 

 Auf Kartoffelscheiben zeigen sich im Thermostaten 

 bei 37° nach 24 Stunden kleine, feuchte, dunkel ge- 

 färbte Stellen, die schnell an Größe zunehmen und nach 

 nochmals 24 Stunden sich über den größten Teil der 

 Scheiben erstreckt haben. Sie wimmeln von Bakterien, 

 die alle, oder fast alle, zu B. subtilis gehören. Ganz 

 dieselben Erscheinungen bieten Topinamburscheiben. 

 Die Haselnußscheiben zeigen mehr oder weniger 

 schleimige Stellen; Verfärbung tritt hier nicht ein. 



In den von den faulenden Stellen angelegten Kul- 

 turen zeigte sich nach einiger Zeit eine eigentümliche 

 Variationserscheinung. Wenn man nämlich aus einer 

 Kolonie eine Strichkultur auf Malzagar anlegt, so 

 sieht man oft, meistens schon nach Verlauf von zwei 

 oder drei Tagen, an einzelnen Punkten des Striches 

 Auswüchse entstehen, welche sich durch ihre Durch- 

 sichtigkeit von dem milchweißen oder gelblichtrüben 

 Strich ziemlich stark abzeichnen; diese Auswüchse 

 fahren fort, schneller zu wachsen als ihre Umgebung 

 und haben sich bald als durchsichtige Sektoren 

 herausgebildet. Die mikroskopische Betrachtung des 

 Inhalts dieser Sektoren zeigte, daß Sporen hierin 

 durchaus fehlten; das Material des Striches selbst je- 

 doch enthielt dieselben iu großer Menge. Durch 

 Überimpfung ließ sich diese „asporogene Varietät" 

 leicht rein gewinnen und blieb auch bei weiterer 

 Kultivierung sporenfrei. Doch ist bei ihr die Fähig- 

 keit, Sporen zu bilden, nicht gaDZ verloren gegangen. 

 Denn wenn man eine nicht zu junge Kultur derselben 

 vom Nährboden abstreift, mit Wasser aufschwemmt 

 und bis zum Sieden erhitzt, so erscheinen bei erneu- 

 ter Aussaat nicht selten Kolonieen , die wieder zur 

 ursprünglichen, sporogenen Form gehören. Bei fort- 

 gesetzter Kultur der asporogenen Varietät scheinen 

 jedoch die „Atavisten" immer seltener zu werden. 



Verf. hat dann mit Reinkulturen sowohl der spo- 

 rogenen wie der asporogenen Varietät Infektions- 

 versuche an verschiedenen, wieder in Scheiben 

 geschnittenen Pflanzenteilen ausgeführt und schon 

 nach 24 Stunden bei 37° in fast allen Fällen, viel- 

 fach auch schon bei 30°, starke Fäule erzielt, wäh- 

 rend bei 23° nur Kartoffel und Topinambur schwach 

 angegriffen wurden. 



Drei Monate später hatten die inzwischen auf 

 künstlichem Nährboden weiter kultuvierten und 

 wiederholt übergeimpften Kulturen, namentlich der 

 asporogenen Varietät, ihre Virulenz größtenteils ein- 

 gebüßt, nur die Kartoffel wurde von der sporogenen 

 Form noch stark angegriffen, während die asporogene 

 Form auch hier nur eine unbedeutende Wirkung aus- 

 übte. Laurent hat schon betont, daß zur Wieder- 

 herstellung der Virulenz bei Pflanzenparasiten die- 

 selbe Methode zweckentsprechend ist, welche bei den 

 menschen -pathogenen Bakterien vielfach äuge wandt 

 wird, die Passage durch empfänglichere Orgauismen. 

 Auch für die Heubazillen hatte diese Methode den 

 erwünschten Erfolg. Eine einmalige Passage auf 

 Kartoffeln genügte zur Wiederherstellung der Viru- 

 lenz bei beiden Formen des B. subtilis. 



Außer den Infektionen an Scheiben wurden auch 

 Infektionen an intakten, äußerlich sterilisierten Knol- 

 len von Kartoffel, Topinambur und Mairübe (Brassica 

 Rapa rapifera) angestellt, indem in eine kleine Wunde 

 etwas Bakterienmaterial (asporogene Form) hinein- 

 gebracht wurde. Bei 37° trat bei Kartoffel und 

 Topinambur schnell fortschreitende Fäule ein, und 

 nach vier bis fünf Tagen waren die Knollen ganz 

 verfault. Bei 30° schritt die Fäule langsamer vor; 

 es dauei-te 10 bis 12 Tage zum völligen Verfaulen. 

 Bei der Mairübe waren 37° notwendig, um diese 

 letztere Wirkung hervorzurufen. 



Bei allen diesen Infektionsversuchen wurde fest- 

 gestellt, daß B. subtilis der einzige Mikroorganismus 

 war, der sich in den faulenden Geweben vorfand. 

 Durch die Fäule werden die Knollen in eine weiche 

 Masse verwandelt. Die mikroskopische Untersuchung 

 der Objekte ein bis zwei Tage nach der Infektion 

 lehrte, daß in den absterbenden Zellen das Proto- 

 plasma sich zusammenzieht und körnig wird; zu 

 gleicher Zeit oder etwas später verlieren die Zellen 

 ihren Zusammenhang infolge der Auflösung der 

 Mittellamelle. An diesen Stellen sind die Bakterien 

 selbst noch nicht anwesend, so weit sind sie noch 

 nicht vorgedrungen; ihre Sekrete sind ihnen voraus- 

 geeilt. Erst weiter vom noch gesunden Gewebe ent- 

 fernt, also mehr der Infektionsstelle genähert, finden 

 sich die Bakterien, und zwar nicht in, sondern nur 

 zwischen den isolierten Zellen. 



Dem B. subtilis geht die Fähigkeit, Cellulose zu 

 verarbeiten, durchaus ab, und ein Eindringen in die 

 Zellen ist ihm also nicht möglich. Bei fortschreiten- 

 der Zersetzung wird der Inhalt der toten Zellen all- 

 mählich resorbiert uud das körnige, tote Protoplasma 

 verschwindet größtenteils. Am längsten bleiben die 

 Stärkekörner intakt; doch auch diese werden schließ- 

 lich angegriffen, sie verlieren ihre scharfen Konturen 

 und bilden formlose Klumpen, die langsam in Lösung 

 gehen und verschwinden. 



Um das von dem Bazillus ausgeschiedene Virus 

 zu isolieren, wurden verfaulte Kartoffeln ausgepreßt 

 und der Saft durch ein Porzellanfilter filtriert. Dieses 

 Filtrat zeigte sich sehr toxisch für das Pflanzen- 

 gewebe. Ein Tropfen auf einer Kartoffelscheibe hatte 



