L. GuiGNAKD. — Sur l'origine des sphères directrices. 245 



Dans ce genre de recherches, la principale difficulté réside 

 avant tout dans la fixation des sphères directrices, que la plu- 

 part des réactifs actuellement employés en cytologie altèrent 

 ou rendent méconnaissables. Tel agent qui réussit pour les 

 tissus animaux ne convient plus pour les cellules végétales, 

 surtout à cause des membranes dont elles sont pourvues et qui 

 se comportent d'une façon qui diffère, non seulement suivant la 

 nature des réactifs, mais encore avec un même réactif suivant 

 l'origine et la nature des tissus. Les procédés de fixation 

 doivent varier suivant les cas, et il en est de même pour les 

 réactifs colorants. Il faut ajouter que, jusqu'ici, je n'ai pu trouver 

 une matière colorante possédant une élection spéciale et diffé- 

 rentielle à l'égard des sphères. Les réactifs qui les colorent se 

 fixent également sur le protoplasme, mais généralement avec 

 moins d'identité. Cette différence jointe à leur forme, à la pré- 

 sence du corpuscule occupant leur centre, à leur grosseur sen- 

 siblement constante dans un même tissu, permet néanmoins de 

 les distinguer avec certitude. 



Dans le cas présent, le contenu des sporanges a été fixé, 

 tantôt avec un mélange renfermant pour 100 p. d'eau, o gr. 50 

 d'acide chromique et o gr. 20 d'acide osmique ; tantôt avec 

 une solution d'acide chromique et de bichlorure de platine, tous 

 deux à la dose de o gr. 50 pour 100, ou encore avec l'alcool ^ 

 absolu. Ce dernier peut fournir un terme de comparaison pour 

 l'emploi des réactifs colorants, dont l'action est souvent mo- 

 difiée parles liquides acides employés comme agents de fixation. 

 En raison de la dissociation des cellules mères des spores, sur- 

 tout à la période où celles-ci prennent naissance à leur intérieur, 

 les coupes doivent être faites après inclusion dans la paraffine. 

 Comme colorants, j'ai surtout réussi avec un mélange de fuch- 

 sine acide de Weigert et de vert de méthyle O. O. de Grubler; 

 après un temps d'action suffisant, la coloration rouge ou rose 

 des sphères et du protoplasme, ainsi que la coloration verte des 

 chromosomes nucléaires ne disparaissent pas par les lavages à 

 l'alcool absolu. Une autre matière colorante rouge, très peu 

 soluble dans l'alcool absolu et se fixant énergiquement sur le 

 protoplasme et les sphères, est la coccinine ; son emploi, suivi 

 de la coloration par l'hématoxyline, donne aussi de bons résul- 

 tats. On peut encore avec avantage faire agir sur les coupes un 



