560 A - Zander: Morphologie der Gewebe. 



Die Gewebe werden in wenigstens das 50 fache ihres Volumens Pikrinsäure-Sublimat- 

 Alkohol gethan. Kleinere Objecte (bis zu 1 ccm) auf 24 Stunden , grössere auf 48 Stun- 

 den u. m. Die Flasche muss gut verkorkt sein. 



B. Das Ersetzen des Pikrinsäure-Sublimat-Alkohols durch reinen abs. Alkohol. 



1. Die Erhärtungsflüssigkeit wird soweit abgegossen, dass die Präparate gerade 

 noch bedeckt sind. Dann wird je nach der Grösse der Objecte alle zehn Minuten ein bis 

 zehn Tropfen abs. Alkohol hinzugesetzt, bis dieselben wieder im ÖOfachen ihres Volumens 

 sich befinden. Nach jedesmaligem Hinzufügen muss die Flasche sehr vorsichtig bewegt 

 werden, damit der Alkohol sich mit der Erhärtungsflüssigkeit mischen kann. Hierin bleiben 

 die Objecte 24 Stunden. Keinesfalls darf der Process beschleunigt werden, sonst wird der 

 Plasmainhalt von der Zellwand abgelöst. 



2. Die Flüssigkeit wird abgegossen und wieder durch abs. Alkohol ersetzt bis zur 

 ursprünglichen Menge. Alle drei bis vier Stunden wird die Flasche vorsichtig bewegt. 

 Dadurch wird der grösste Theil des Pikrinsäurematerials nach 24 Stunden extrahirt. 



3. Die Flüssigkeit wird schnell mittels einer Pipette entfernt und durch die Hälfte 

 abs. Alkohols ersetzt. Jedes Austrocknen des Gewebes muss sorgfältig vermieden werden. 

 Nach 24 Stunden wird der Process wiederholt. 



C. Das Ersetzen des Alkohols durch Chloroform. 



1. Mittels einer Pipette wird Chloroform- Alkohol auf den Boden des Gefässes 

 gebracht; die Objecte schwimmen auf dem Gemisch. Der überflüssige Alkohol wird mittels 

 Pipette so weit entfernt, dass gerade noch so viel übrig bleibt, um die Objecte zu bedecken. 



2. Sind die Objecte in dem Chloroformalkohol untergesunken, so wird mittels Pipette 

 reines Chloroform hinzugefügt, auf welchem dieselben schwimmen; die darüber stehende 

 Flüssigkeit wird mittels Pipette entfernt. Sind die Präparate nach 24 Stunden noch nicht 

 untergesunken, so wird das Chloroform bis 20° C. erwärmt (nicht höher!); hilft auch dies 

 noch nicht , so fügt man etwas Schwefeläther hinzu. Nach dem Untersinken bleiben die 

 Objecte noch 24 Stunden in der Flüssigkeit. 



3. Frisches Chloroform (das 50 fache Volum der Objecte) wird auf den Boden des 

 Gefässes gebracht. Sobald sich das neue von dem alten Chloroform getrennt hat, wird die 

 obere Lage abgehoben. 



D. Das Ersetzen des Chloroforms durch Paraffin. 



1. Die Objecte kommen in einen auf 25° C. erwärmten Warmofen; Paraffin in 

 erbsengrossen Stücken wird hinzugefügt. Nach jedesmaligem Schmelzen eines Stückes Paraffin 

 wird das Gefäss vorsichtig geschwenkt, um die Vermischung des Paraffins mit dem Chloro- 

 form zu beschleunigen. Paraffin wird so lange hinzugesetzt, bis keine Lösung mehr erfolgt. 

 (Präparate, welche in Cloroform nicht untersinken , thun dies stets nach Hinzufügung von 

 Paraffin.) 



2. Für 24 Stunden wird der Warmofen auf 30° C. erhitzt. 



3. Der Warmofen wird auf die Temperatur des schmelzenden Paraffins (46° C) 

 gebracht. Nach sechs Stunden wird der bisher immer benutzte gewöhnliche Kork durch 

 den durchbohrten ersetzt. Dadurch wird ein allmähliches Verdunsten des Chloroforms her- 

 beigeführt; denn durch ein zu schleuniges Austreiben desselben wird nur ein Schrumpfen 

 der Gewebe verursacht. Ist alles Chloroform ausgetrieben, d. h. ist nach vorsichtigem 

 Schütteln der Flasche kein Chloroformgeruch mehr wahrzunehmen, so sind die Objecte 

 zum Schneiden fertig. 



4. Die Objecte sollten nicht länger als gerade nothwendig der Temperatur des schmel- 

 zenden Paraffins ausgesetzt werden ; sie sollten mit Hilfe von Leuchart's type-metal box oder 

 durch zwei L-förmige, in eine rechteckige Schachtel auslaufende Metallstücke, deren Breite den 

 kurzen Gliedern des L entspricht, eingebettet werden. Die Metallkästen werden erwärmt mit 

 geschmolzenem Paraffin gefüllt. Wenn nach 5—20 Secunden das Paraffin am Boden erstarrt 

 ist, werden die Objecte mit einem kupfernen Spatel aus der Flasche genommen, schnell, 

 damit sie sich nicht abkühlen, in den Einbettungskasten gebracht und mit heissen Nadeln 

 in die gewünschte Lage gebracht. Alsdann lässt man das Paraffin allmählich erkalten. Es 



