54 ANNALES DE LA SCIENCE AGRONOMIQUE 



Ces modes de cristallisation avaient conduit Guignard et Sau- 

 VAGEAu à rapprocher la chlororaphine de la tyrosine. 



Extraction de la chlororaphine. — C'est aux milieux liquides 

 que l'on s'adressera pour l'isolement de la substance verte et de 

 préférence aux milieux synthétiques. Les bouillons peptonés 

 ne permettent, en effet, qu'une faible production de chlorora- 

 phine; ils deviennent, en outre, très visqueux en vieillissant, ce 

 qui rend les filtrations extrêmement lentes et pénibles. 



La culture dont on veut extraire les formes cristallines est 

 essorée; puis, le précipité est remis en suspension dans l'eau; 

 on centrifuge et on décante la partie liquide, toujours très opales- 

 cente par suite de la présence des corps bactériens. Le précipité 

 est remis à nouveau en suspension dans l'eau et on profite de la 

 légèreté de la chlororaphine pour la séparer, par décantation, 

 des cristaux minéraux qui se forment toujours dans les cultures. 

 On répète les centrifugations et décantations jusqu'à ce que 

 les eaux de lavage n'entraînent plus de cellules bactériennes. 

 Enfin, le précipité est essoré une dernière fois. 



La chlororaphine ainsi obtenue est toujours impure, elle ne 

 saurait être utihsée pour des réactions précises et il est nécessaire 

 de purifier les cristaux ainsi isolés. L'extrême facilité avec laquelle 

 la chlororaphine s'oxyde, surtout à l'état de solution ou à 

 la température de sa fusion, impose l'obligation d'effectuer sa 

 purification en l'absence d'oxygène. Cette opération peut être 

 faite par deux modes différents : la cristallisation et la subli- 

 mation. 



Purification par cristallisation. — La cristallisation est effec- 

 tuée à l'aide de l'appareil schématisé page 55. Le ballon A, 

 refroidi à 0°, sert de réservoir à l'acétone. En B le solvant est 

 porté à l'ébullition. Un long tube S plonge dans le mercure, il 

 sert de soupape de sûreté et de tube barométrique. La substance 

 verte est introduite par la tubulure T dans le ballon C, où s'effec- 

 tue l'épuisement de la chlororaphine. La solution est filtrée en D 

 sur coton préalablement épuisé à l'acétone. En E les liqueurs 



