122 Referate und Besprechungen. IX, 1. 



ist. wochenlange Beobachtung bei Ausschhiss von Verunreinigungen ge- 

 sichert. Für die Beobachtung sind dünnwandige Röhren zu bevorzugen 

 und vortheilhaft der v. SEHLEN'sche Reagirglashalter * zu benutzen. 

 Ist die Beobaclitung durch starke Lichtbrechung oder Bildung von 

 Thautröpfchen erschwert, so füllt Unna das Röhrchen mit einer Mischung 

 von Gelatine 1, Spiritus, Liquor animonii caustici aä 25'0, Glycerin 15*0, 

 Aqu. dest. 35'0 aus. Die Culturen können eventuell auch vorher noch 

 mit basischen Anilinfarben gefärbt werden. Nach einer Differenzirung 

 mit verdünntem Spiritus und eventuell Alkohol wird die Cultur durch 

 Auffüllen mit Kochsalzlösung oder Kali causticum zur gefärbten Dauer- 

 cultur. Zu gleichem Zweck kann man auch mit gereinigtem Petroleum 

 auffüllen, dem durch einige Tropfen Nitrobenzol (nach Dr. E. Jacobsen) 

 die Fluorescenz genommen wurde. Ein Abwerfen der Sporen ist durch 

 Fixation mit Alkohol, den man sehr vorsichtig einfliessen lässt, zu 

 vermeiden. 



Auch Objectträgerculturen kann man in toto färben, doch fand Unna 

 hier den sich mitfärbenden Nährboden sehr störend. Bei Gelatine löste 

 er den Nährboden leicht unter Erwärmen in vorsichtig seitlich zuge- 

 tröpfeltem Wasser oder besser verdünntem Glycerin unter gleichzeitigem 

 Absaugen mit Fliesspapier. Die Cultur wird dann angetrocknet, ge- 

 färbt, entfärbt etc. Bei Agar gelingt das Gleiche nicht. Gute Resultate 

 erhielt Unna hier, indem er die Objectträgercultur in massiger Wärme 

 mit 20- bis SOprocentiger Kalilösung erweichte und den erweichten ge- 

 quollenen Nährboden durch vorsichtiges Aufdrücken einer glatten Fläche, 

 am besten eines Streifens guten Oelpapiers aus der Pilzmasse seitlich 

 herausdrückte. Essigsäure gab nicht so gute Resultate. 



Viel schwieriger war die Entfärbung des Nährbodens von Schnitten 

 aus Agarculturen. Am zweckmässigsten fand er nach vielen Versuchen 

 folgende Behandlung. Die Agarcultur wird in Stücke zerlegt in 

 Celloidin eingebettet, geschnitten, die Schnitte von Celloidin befreit. 

 Die Schnitte kommen auf ca. eine Minute in öprocentige Kalilauge, 

 nach Abspülung in Wasser 5 Minuten oder länger in öprocentige Essig- 

 säure, werden nach dem Antrocknen einige Secunden auf dem Object- 

 träger über der Flamme in Carbolfuchsin gefärbt, eventuell einige 

 Secunden in 1- bis öprocentiger Lösung von Chromsäure oder Kali- 

 chromat gebeizt (wodurch die Färbung dunkler, die Conturen schärfer 

 werden), abgespült, mit Anilinöl entwässert und entfärbt und kommen 

 schliesslich nach Xylol in Balsam. CzaplewsM {Tühingen), 



») Cfr. diese Zeitschr. Bd. VII, 1890, p. 17. 



