V, 1. Schaff er: Färberei zum Studium der Knochenentwicklung. 9 



MEKKEL'sche Doppelfärbung mit Indigo und Carmin 1 bezeichnet 

 werden, welche wiederholt 2 als neue Tinctionsraethode empfohlen wurde 

 und zuletzt an Flesch 3 einen warmen Anwalt fand. Nur erzielte 

 Flesch eine von den Angaben Merkel's und Bayerl's 4 , der die 

 Methode zum Nachweise der Entstehung rother Blutkörperchen im 

 Knorpel am Ossificationsrande ausbildete , abweichendes Resultat in- 

 sofern, als diese Autoren Rothfärbung des Knochens, Farblosbleiben des 

 unveränderten Knorpels und Blassrosa-Färbung desselben an der Ossi- 

 ficationsgrenze erhielten, während Flesch angiebt, dass sich der Knochen 

 blau färbt, während die Knorpelreste meist farblos bleiben. Er erklärt 

 diese Differenz durch zu kurze Dauer der Tinctionszeit und mangelnde 

 Reinheit der benutzten Farbestoffe; letzterer Umstand scheint von be- 

 sonderer Wichtigkeit zu sein, denn mir gelaug es auch bei Benutzung 

 einer ganz frisch bereiteten Indigocarminlösung und Einhaltung aller 

 Vorschriften nicht, eine verwendbare Doppelfärbung zu erhalten. 



Was die Art der Ausführung anlangt, so entkalkt Bayerl in: 

 Chromsäure 1*5, HCl 0*5, H 2 100, wäscht aus, härtet in Alkohol und 

 bettet in Paraffin ein. Dann werden die Schnitte aus absolutem Alkohol 

 auf 15 bis 20 Minuten in die bekannte Mischung gebracht (Carmin 2, 

 Borax 8, Aq. 130, Indigcarmin und Borax aa 8, Aq. 130), in gesättigter 

 Oxalsäurelösung extrahirt, entwässert und in Balsam eingeschlossen. 

 Flesch bedient sich im wesentlichen derselben Methode, nur bettet er 

 in Celloidin (das sich mitfärbt) ein und lässt die Schnitte 24 Stunden 

 in Zimmertemperatur oder 2 Stunden bei Brütofenwärme in der Farb- 

 stofflösung. Besonders empfiehlt Flesch die Färbung für die periostale 

 Ossification: Der junge Knochen himmelblau mit einer farblosen Rand- 

 schicht belegt mit dunkelrothen Osteoblasten, Mark grau mit rothen 

 Kernen, Blutgefässe grün. 



Ein etwas complicirtes Verfahren giebt Kutschin 5 an. Die 

 Schnitte werden mit Wasser abgewaschen, in eine ziemlich concentrirte 

 Lösung von salpetersaurem Kobaltoxydul gelegt (2 bis 5 Minuten), dann 

 gut ausgewaschen und der Einwirkung von Schwefelammoniumdämpfen 

 ausgesetzt. Die Präparate, welche bald zu dunkeln anfangen, werden 

 wieder mit Wasser abgespült und in möglichst concentrirte, neutrale 



*) Merkfl, Technische Notiz (Unters, a. d. anat. Inst. Rostock 1874 p. 98). 



2 ) Norris, Shakspeare und Merbej. ; cfr. Gierke diese Zeitschr. Bd. 1, 

 1884, p. 500. 



3 ) Flesch, diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 349. 



*) Bayerl in Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. XXIII, 1884, p. 30. 

 5 ) Kutschin, 1. c. 



