V.l. Schaff er: Färberei zum Studium der Knochenentwicklung. 17 



so die kleinsten Reste der Knorpelgrundsubstanz scharf conturirt im 

 farblosen Knochen entdecken. 



Eine ähnliche Reaction bot das chemisch reine Phenosafranin, nur 

 scheint die Verbindung labiler zu sein, indem es sich viel empfindlicher 

 gegen die Entfärbung erwies, so dass sich nach etwas zu lange dauern- 

 dem Verweilen im angesäuerten Wasser wohl die breite, hyaline Knorpel- 

 zone des Gelenkkopfes orange färbte, die zierlichen Knorpelreste im 

 ebenfalls farblosen Knochen aber dieselbe blassrothe (etwas verwaschene) 

 Färbung zeigten wie das Markgewebe. 



Das Tetraaethylphenosafranm färbt den Knorpel lebhaft rotk-: 

 violett (purpurn), den Knochen und das Markgewebe blau (tiefblau 

 das Celloidin). Der Knochen kann durch längeres Entfärben farblos 

 werden, worauf aber die rothvioletten Knorpelreste an Schärfe der Con- 

 turen verlieren. 



Das Gemisch beider chemisch reinen Safrauine endlich differenzirte 

 ähnlich wie voriges , nur ist das Rothviolett noch lebhafter, und das 

 Blau des Markgewebes erhält einen Stich ins Röthliche. 



Weitere Versuche bezweckten die Auffindung eines Modus, die 

 Färbung zu fixiren und möglichst scharf hervortreten zu lassen. Es er- 

 gab sich, dass die Orangefärbung des Knorpels im Knochen am rasche- 

 sten mit y io procentiger Salzsäure erhalten wird, am schärfsten wird 

 die Differenzirung jedoch durch Einlegen der gefärbten Schnitte in 

 y io procentige Sublimatlösung durch 2 bis 3 Stunden. 



Dies gilt für alle versuchten Safranine, die denkbar schönste 

 Scheidung von Knorpel und Knochen giebt nach dieser Methode das 

 Gemisch der beiden chemisch reinen Farbstoffe. 



Diesen grossen Vorzügen gegenüber halte ich die etwas schwierige 

 Conservirung der Präparate für einen kleinen Mangel, empfehle also die 

 Safraninfärbung zum Studium und zur Demonstration von Ossifications- 

 präparaten aufs beste und fasse die Methode kurz zusammen : Die in 

 Salpetersäure oder Salzsäure-haltiger Kochsalzlösung entkalkten , farb- 

 losen 1 Schnitte werden eine halbe bis eine Stunde in wässeriger Safranin- 

 lösung (1 : 2000) gefärbt, in Wasser abgespült, auf 2 bis 3 Stunden in 

 yi procentige Sublimatlösung übertragen und in Glycerin eingeschlossen. 



Sollen die Präparate dauernd aufbewahrt werden, so müssen die 

 Schnitte aus der Sublimatlösung flüchtig durch Alkohol gezogen, mit 

 Filtrirpapier auf den Objectträger gedrückt und lange Zeit in Bergamott- 



') Die Färbung gelingt ebenso an mit Chromsalzen behandelten Präparaten ; 

 nur ist der Contrast zwischen orange und farblos ein schärferer als zwischen 

 grün und orange. 



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