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Zur PFEFFER'schen Metliylenblautinction verwendete Verf, ge- 

 wöhnlich eine Cultiirflüssigkeit von 1 Theil Methylenblau auf 500000 

 Theile filtrirten Regenwassers, ferner rief er durch Alkalicarbonate 

 Fällungen in den gerbstoffhaltigen Zellen hervor, entweder durch Zusatz 

 von einem Tropfen einer 1- bis öprocentigen Lösung direct zum mikro- 

 skopischen Präparat oder durch Cultur in ziemlich verdünnten Lösungen 

 (Ammoniumcarbonat 1 : 5000; Natriumcarbonat 1 : 1000). In Zellen, 

 die im Absterb en begriflfen sind, endosmiren eine Reihe von Lösungen, 

 die in das lebende Plasma nicht eindringen, wie Kaliumbichromat, Eisen- 

 sulfat, Ammoniummolybdat-haltige Salmiaklösung (Gakdinek's Reagenz) 

 u. a., die zwar Störungen in der Plasmastructur hervorrufen, aber bei 

 Beobachtung des Ganges der Einwirkung unter dem 

 Mikroskop docli vielfach brauchbare Resultate liefern. Eine Combini- 

 rung von Tinction und Fixirung des Farbstoffes bei Tödtung der 

 Zelle unter gleichzeitiger Erhaltung der Plasmastructur lieferte eine 

 Combination des MoLL'scheu Verfahren : Anstatt einer wässerigen 

 Lösung von Kupferacetat wurde eine alkoholische gewählt (Auflösen 

 von krystallisirtem Kupferacetat in absolutem Alkohol und Filtriren ; 

 im Dunkeln aufzubewahren !), in welche die zerkleinerten Pflanzenstücke 

 einige Tage lang eingelegt wurden, dann ist der Gerbstoff als Kupfer- 

 verbindung fixirt und das Plasma gehärtet. Daraus gefertigte Schnitte 

 werden mit verdünnter wässeriger Eisenacetatlösung behandelt, 

 wobei sich durch Umfärbung die charakteristische Eisenreaction zeigt. 

 Aehnlichen Erfolg (Fixirung und Tinction) erzielt man durch directe 

 Uebertragung der aus der lebenden Pflanze gefertigten , sorgfältig in 

 Wasser ausgewaschenen Schnitte in Chromsäurelösung oder Chrom- 

 osmiumsäure (FLEMMiNG'sche Flüssigkcit), wobei der Gerbstoff braunroth 

 niedergeschlagen wird. Diese beiden letzteren Verfahren liefern zu- 

 gleich Dauerpräparate. Brauchbare Präparate liefert auch vielfach 

 schnelles Eintauchen von Pflanzentheilen in kochende concentrirte Ka- 

 liumbicliromatlösung; schnelleren Aufschluss über die Farbe der Eisen- 

 reaction eines Gerbstoffes erhält man, wenn mau die Schnitte mit con- 

 centrirter Kaliumbichromatlösung behandelt, die so gewählt worden 

 ist, dass Plasmolyse eben eintritt, und erst, nachdem der Niederschlag 

 in einigen Zellen einzutreten beginnt, mit einer isotonischen Eisensulfat- 

 lösung rasch auswäscht. Dieses Verfahren beschleunigt das Eintreten 

 der Eisenreaction erheblich und verhindert das Herausfliessen der gerb- 

 sauren Eisenverbindung gänzlich. 



Durch Plasmolyse wurde den Gerbstoffvacuolen entweder so 

 viel Wasser entzogen, dass sich der ganze Vacuoleninhalt in eine feste 



