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Anhangsweise beschreibt Nicolle noch eine von M. Mörieüx 

 (preparateur a ['Institut Pasteur) erfundene Doppelfärbung bei der 

 GRAM'schen Methode mittels Eosin. Nach der Färbung mit Carbol- 

 gentiana wird das Präparat mit einer Lösung von (Jod 1*0, Jod- 

 kalium ()"2, gesättigte Lösung von wasserlöslichem Eosiu in 90pro- 

 centigem Alkohol 20 cc, destillirteu Wasser 200*0) Übergossen. Die- 

 selbe wirkt 4 bis 6 Secuuden und wird 2- bis .3mal erneuert. Da- 

 nach Entfärbung in Sechstel-Aceton-Alkohol. 



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Directe Methode. 



Diese ist anwendbar für alle Mikrobien, vorzugsweise aber für 

 diejenigen, welche sich mit indirecten Methoden (nach Gram und 

 Ehrlich) nicht färben lassen. 



NicoLLE führt hier einen neuen Farbstoff in die bacteriologische 

 Technik ein, das Thiouin oder LAUxH'sche Violett,^ eine 

 schwefelhaltige Farbe, welche zu derselben Gruppe wie das Methylen- 

 blau und Toluidinblau gehört. Wie letztere beide und im Gegensatz 

 zu den meisten anderen „basischen" Farbstoffen überfärbt sie nicht. 

 In Folge grosser Affinität zu den Bacterien und schwacher Löslich- 

 keit in absolutem Alkohol (namentlich wenn es an Bacterien gebun- 

 den ist) stelle das Thionin das energischste und sicherste Färbemittel 

 für Mikrobien dar, welche die GRAM'sche Färbung nicht annehmen. 

 Zuerst benutzte Nicolle ein von M. Rosenstiehl, dann mit vorzüg- 

 lichem Erfolge ein von Merck in Darrastadt erhaltenes Präparat. 



Färbung von Ausstrichiyrä paraten. 



a) Von Culturen. Hier zieht Nicolle das Carbolgentiana 

 vor, welches energisch imd schnell die Mikrobien färbt. Es genügen 

 einige Secunden bis höchstens eine Minute zur intensiven Färbung, 

 Abwaschen mit Wasser, Untersuchen in Wasser oder nach Trocknen 

 in Balsam. [Ref. freut sich, dass Nicolle die Vorzüge des von 

 Ref. schon seit langer Zeit benutzten und empfohlenen Carbolgentiana 

 so unumwunden würdigt.] 



Schnitte auch schwerer eindringt, jodiren muss und dann auch intensiver 

 differenziren kann als bei Objectträgerpräparaten. Bei zu kurzer Einwir- 

 kung dringt Farbstoff und LraoL'sche Lösung sonst oft nur in die ober- 

 Üächlichsten Schichten der Schnitte ein. Ref. 



^) Thionin und Lauth'scücs Violett sind aber nicht identisch, wie Ni- 

 colle angiebt. Das LAUTH'sche Violett ist vielmehr salzsaures Thionin. Ref. 



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