ALIMENTATION AZOTEE D'UNE ALGUE. 325 



peu d'azote dans le milieu de culture. J'ai, dans ce but, fait 

 choix, pour substratum nutritif, de bouillon de haricots glucose 

 et gélose, après m'ètre assuré que la pU\nte s'y développait fort 

 bien ; c'est, je le rappelle, le milieu sur lequel M. Mazé ' a cul- 

 tivé la bactérie des nodosités des légumineuses. 150 grammes 

 de haricots sont |)ortés à l'ébullition dans un litre d'eau ; au 

 liquide filtré j'ajoute 1 0/0 de glucose et 1,5 0/0 de gélose; 

 le mélange chauffé à 120'^, puis filtré, est réparti dans les vases 

 de culture et stérilisé à 115'\ Ces vases sont des grands matras 

 à fond plat et à tubulure latérale, connus sous le nom de bal- 

 lons à toxine, dans lesquels on peut faire passer un courant d'air 

 entrant par la tubulure supérieure et sortant parla tubulure 

 latérale: chaque matras contenait 100 c. c. de gélose nutritive, 

 qui, vu la très grande surface du fond, formait une couche 

 extrêmement mince. 



L'air, qui arrivait sur la culture, devait évidemment être 

 dépourvu de toute trace d'azote combiné; à cet effet, il traver- 

 sait un très long tampon de coton pour se débarrassée des par- 

 celles de nitrates solides, qui pouvaient se trouver dans l'air du 

 laboratoire; il passait ensuite dans un barboteur à potasse con- 

 centrée qui retenait les vapeurs nitreuses, puis dans un flacon 

 laveur à acide sulfurique, auquel il abandonnait son ammonia- 

 que, enfin, dans un flacon laveur contenant de l'eau, qui le 

 saturait d'humidité ; cette eau pouvait en outre retenir les traces 

 de vapeurs nitreuses qui ne se seraient pas combinées à la 

 potasse. 



L'expérience étant disposée comme je viens de le dire, les 

 ballons sont ensemencés, puis exposés à la lumière diffuse à une 

 température oscillant entre [2*^ la nuit et 28" le jour. 



La culture se fait Lien; au bout de 20 jours on dose l'azote 

 total dans les ballons de culture et dans des ballons témoins, 

 contenant la même quantité de la même gélose, mais n'ayant 

 pas été ensemencés. 



Chaque ballon reçoit 23 c. c. dune solution aqueuse d'acide 

 sulfurique à 3 0/0, puis est chauffe à 120° pendant 1/4 d'heure; 

 la gélose est saccharifiée et les traces d'ammoniaque qu'elle 

 peut contenir se sont comhinées à l'acide. Le li(juide de chaque 

 ballon est alors soigneusement introduit dans un ballon à atta- 



1. Mazé, Ann. Inst. Past., 1807, p. 4o. 



