494 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR 



Nitrile de soude l gramme. 



Carbonate de soude (cale.)- 1 — 



Phosphate de potasse 0, ;> — 



Chlorure de sodium 0,5 — 



Sulfate l'erroux 0,4 — 



Sulfate de mognéïii^ 0.8 — 



Eau distilltM' ... 1,000 grammes. 



On stérilise et on ensemence comme précédemment. Dans 

 ces conditions, surtout si on a soin d'agiter les fioles trois ou 

 quatre fois par jour pour mouiller les scories qui sont hors du 

 liquide, la nitrification se déclare rapidement et devient aussitôt 

 très intense. 



En possession de ce liquide en pleine nitrification, on doit 

 alors procéder, par les méthodes indiquées par Oméliansky, à 

 des passages successifs dans les milieux précédents, de manière 

 à éliminer le plus possible les microbes étrangers, et à obtenir 

 une culture purifiée qui servira à l'isolement. Nous avons con- 

 staté qu'on a intérêt à pousser assez loin ces passages, car la 

 séparation ultérieure des ferments nitrificateurs est d'autant 

 plus facile que la cuUure employée est déjà plus pure. 



La préparation de la silice gélatineuse, qui sert pour l'iso- 

 lement du ferment nitreu.x, demande quelques précautions 

 spéciales. On prépare d'abord la solution de silice, d'après les 

 principes donnés par Oméliansky, en versant lentement dans 

 12o c. c. d'acide chlorhydrique à 13'^ B. un volume égal d'une 

 solution à 8" Ti. de silicate de potasse ou de soude bien pur. 

 On soumet alors le mélange à la dialvse. 



La principale difficulté qu'on rencontre dans cette prépara- 

 tion est la coagulation prématurée de la silice, quelquefois dans 

 le dialyseur, et plus souvent au moment de la stérilisation 

 à 120°. Nous avons eu au début d'assez nombreux accidents de 

 celte nature, et nous avons dû légèrcmeut modifier notre tech- 

 nique pour les éviter. Les principaux facteurs qui influent sur 

 le phénomène sont: la nature du parchemin, la quantité de 

 l'eau employée pour la dialyse, la rapidité plus ou moins 

 grande de celte dialyse, et le choix du moment où on opère 

 la stérilisation. 



11 faut d'abord avoir soin d'employer pour la dialyse un 

 parchemin dont l'étauchéilé a été bien éprouvée, si on veut 

 maintenir la solution de silice au degré de concentration utile. 



