496 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



veau plus sensible si l'on allonge la durée de la dialyse. Lemoment 

 auquel la stérilisation s'effectue le mieux est assez variable, et 

 les essais de chauffage à l'autoclave rendent sous ce rapport de 

 grands services. 



En prenant les précautions que nous venons d'indiquer, on 

 arrive à préparer, sans difficultés et à coup sûr, une solution 

 de silice qui supporte parfaitement la stérilisation à 120'^ pendant 

 10 minutes. Par addition des solutions salines indiquées par 

 Oméliansky, cette silice fait prise en un temps qui varie entre 

 15 et 45 minutes. 



Pour la culture du ferment nitreux sur cette silice, nous 

 avons utilisé les excellents préceptes d'Oméliansky, qui permet- 

 tent d'arriver très sûrement au but. Avant que la gélalinisalion 

 de la silice soit effectuée, on ensemence avec une anse de pla- 

 tine trempée dans la culture purifiée de ferment nitreux, on agite 

 et on verse dans des boîtes de Pétri flambées où le milieu fait 

 prise. 11 est bon de placer les plaques sur un banc de verre dans 

 des cristallisoirs flambés, contenant un peu d'eau stérile, pour 

 éviter la dessiccation de la silice pendantla culture, qui demande 

 parfois un temps assez long. On pique les colonies formées avec 

 un fil de verre, dont on casse la pointe dans des matras contenant 

 25 c. c. du liquide nutritif pour les ferments nitreux, liquide dont 

 nous avons donné la composition plus haut. Au bout de quelques 

 jours la nitrification se déclare; il ne reste plus qu'à vérifier au 

 microscope l'homogénéité de la culture et à procéder à l'épreuve 

 de l'ensemencement dans le bouillon. Les tubes de bouillon 

 doivent rester indéfiniment stériles. 



L'isolement du ferment nitrique est beaucoup plus aisé. 

 L'emploi de la gélose nitritée, préconisée par Winogradsky * 

 permet d'arriver rapidement au but. Le contrôle de la pureté 

 doit être fait au microscope et au bouillon, dans lequel aucun 

 développement ne doit se produire. 



Nous avons ainsi isolé par ces méthodes deux ferments 

 niireux purs, l'un provenant d'une terre de Java, qui nous a été 

 obligeamment envoyée par M. le D' Deutmann, de Batavia, et 

 l'autre d'un lit bactérien d'épuration en activité ; et deux ferments 

 nitriques purs, l'un d'une terre de bruyère, et l'autre d"ua lit 

 bactérien. 



1. Cenlralblatt fur Bakteriologie. T. II, p. 425. 1896. 



