236 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



il se développera avec lenteur mais sans produire de pigment. 



Dans les milieux liquides, la teinte verte apparaît d'autant 

 plus vite que le cube d'air existant dans le matras est plus consi- 

 dérable. 



11 apparaît d'abord une teinte jaunâtre^ verdâtre, devenant 

 de plus en plus foncée et fluorescente, puis finalement décrois- 

 sant progressivement pour prendre une teinte jaune rougeâtre. 



Etude chimique du piCxMknt. — M. Winter, lors des recherches 

 de M. Lesage, avait ébauché l'étude chimique du pigment 

 et constaté qu'il n'avait aucun des caractères des pigments 

 biliaires, qu'il était insoluble dans l'alcool, l'éther, le chloro- 

 forme, soluble dans l'eau et le sulfate d'ammoniaque. 



Reprenant cette étude, nous nous sommes proposé tout 

 d'abord d'isoler la matière pigmentaire. 



Pour retirer la matière colorante produite par le baciUus 

 viriclis, nous avons eu recours après nombre de recherches au 

 procédé suivant : 



Les bouillons de culture sont additionnés, directement dans 

 les matras, de noir animal en grains; après un contact de 24 à 

 36 heures et en agitant fréquemment, on verse le tout sur un 

 filtre sans plis, le liquide passe encore un peu coloré; on répète 

 l'opération du filtrage jusqu'à ce que le bouillon soit presque 

 incolore. 



Le charbon qui retient la matière colorante est ensuite lavé 

 avec de l'eau distillée /'mrfe jusqu'à ce qu'une goutte du liquide 

 filtré, évaporé sur une lame de platine, ne laisse plus de résidu 

 salin. 



Le charbon bien égoutté est ensuite traité dans un appaieil 

 à épuisement continu par un fort volume d'alcool à 60" bouillant. 



Par distillation on chasse l'alcool, on termine la distillation à 

 la trompe et on reprend à chaud le résidu par de l'alcool à 95°. 



Évaporé dans le vide, l'alcool, qui déjà par le refroidissement 

 laisse déposer la matière colorante, donne un résidu. 



Caractères physiques. — La couleur de ce résidu est brun 

 rougeâtre, il est amorphe, très hygrométrique, se ramollit à la 

 chaleur, devient sirupeux vers 80" et dur et cassant en se refroi- 

 dissant. Son odeur est vireuse et pénétrante, sa saveur amère. 



Caractères chimiqiies. — Il est insoluble dans presque tous les 

 dissolvantsgénéralementemployés: pentane, chloroforme, élher^ 



