264 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



plus long, il suffît de les eusemencer sur gélose pour obtenir 

 une culture. Ce procédé est très commode pour conserver 

 les microbes frag^iles et il réussit avec beaucoup d'espèces. 



Pendant les premiers jours de la culture en sac, alors que les 

 vibrions sont tous à l'état filamenteux, leur virulence augmente, 

 comme on le constate en les inoculant directement. Plus tard, 

 quand les formes arrondies prédominent, ils sont moins actifs, 

 mais ils reprennent très vite leur activité si on les rajeunit par 

 la culture sur gélose, et si on les fait passer dans le péritoine d'un 

 cobaye. Pour avoir les vibrions au maximum d'activité, nous les 

 retirons d'un sac, resté 48 heures dans l'abdomen d'un cobaye, 

 et nous les inoculons directement dans le péritoine d'un autre 

 cochon d'Inde : l'exsudat fournira la matière d'ensemencement 

 d'un nouveau sac. Par ces passages alternatifs en sac et en péri- 

 toine, le vibrion prend une virulence si grande que le contenu 

 d'un sac tue un cobaye moyen avec 1/160 de c. c. inoculé dans 

 la cavité abdominale. A l'autopsie, les vibrions sont relativement 

 peu nombreux dans Texsudat presque clair et peu riche en leu- 

 cocytes. Ils sont allongés, grêles, flexueux, disposés parfois en 

 longs spirilles. Le sang du cœur en contient si peu que l'examen 

 microscopique ne les montre pas; mais l'ensemencement sur 

 gélose donne toujours des colonies. L'absence presque complète 

 de phagocytose est un indice delà virulence de ces vibrions, qui 

 exercent sur les leucocytes une action répulsive. On peut s'en 

 rendre compte en injectant dans la cavité abdominale d'un 

 cobaye neuf quelques c. c. de bouillon peptonisé stérile, 

 ce qui provoque une leucocytose abondante. Après quelques 

 heures, introduisons dans le péritoine le vibrion renforcé, il ne 

 sera pas englobé malgré l'abondance des leucocytes, ainsi que le 

 montrent les préparations faites avec l'exsudat. Cependant les 

 cellules phagocytaires ne sont point paralysées, car elles s'em- 

 parent d'autres microbes mis à leur portée, mais non des vibrions 

 qui paraissent les rebuter. 



La conservation de la virulence s'obtient aussi très bien en 

 faisant tous les trois ou quatre jours des cultures en sac, sans 

 mettre le microbe en contact direct avec les tissus du cobaye. 



Ce sont ces vibrions renforcés que nous ensemençons dans 

 des liquides pour avoir la toxine. 



Préparation de la loœine cholérique soluble. — Dans les cas 



