TOXINE ET ANTITOXINE CHOLERIQUE. 265 



graves de choléra, on est frappé de la soudaineté des accidents 

 toxiques : le poison agit sur l'organisme dès qu'il est formé dans 

 l'intestin, au moment de la culture intensive des vibrions. De 

 même, chez les cobayes auxquels nous mettons des sacs ense- 

 mencés dans le péritoine, les signes d'empoisonnement survien- 

 nent vers le troisième jour, quand la culture est en pleine activité. 

 D'où l'idée de chercher la toxine dans les cultures récentes 

 plutôt que dans les cultures âgées. D'ailleurs, ces dernières, 

 devenues très alcalines, contiennent en abondance de l'ammo- 

 niaque et d'autres substances qui indiquent une transformation 

 profonde de la matière organique. Dans un semblable milieu, une 

 toxine fragile ne tarderait point à être altérée. En réalité, les 

 anciennes cultures filtrées ne sont jamais très actives sur les 

 animaux. Nous nous sommes efforcés de réaliser des cultures 

 rapides, très abondantes, et d'en retirer la toxine avant que 

 celle-ci soit modifiée. 



La solution depeptone à 2 0/0, additionnée de 2 0/0 de géla- 

 tine et de 1 0/0 de sel marin, convient très bien au développement 

 rapide du vibrion. Ce milieu est stérilisé dans des matras et ense- 

 mencé avec le contenu d'un sac retiré du péritoine d'un cobaye. 

 Il est laissé à l'étuve, pendant quelques heures, jusqu'à ce que 

 la culture soit bien en train, puis il est distribué dans des boîtes 

 Pelri stérilisées. Après 12 heures, un voile épais s'étend à la sur- 

 face du liquide, trouble dans toute son épaisseur. Au bout de 

 24 heures, les cultures filtrées sont manifestement toxiques. Cette 

 toxicité est très augmentée après 48 heures, elle est au maxi- 

 mum du troisième au quatrième jour. Elle diminue ensuite à 

 mesure que les cultures deviennent très alcalines et odorantes. 

 La concentration par évaporation, dans ces conditions de culture, 

 est environ de 1/8 du volume : il est facile de l'empêcher en pla- 

 çant les boîtes de Pétri dans une enceinte humide. 



Le liquide filtré, le quatrième jour de la culture, est alcalin, 

 dégage une odeur spéciale. Dans certaines expériences, il tuait 

 un cobaye de 300 grammes en 1 8 heures, à la dose de 1/4 de centi- 

 mètre cube en injection sous-cutanée. D'une manière constante, 

 on obtient ainsi une toxine qui fait périr sûrement les cobayes 

 en 16 à 24 heures, à la dose de 1/3 de centimètre cube pour chaque 

 100 grammes du poids de l'animal. 



L'addition d'un peu de sérum au milieu précédent augmentele 



