340 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



en surface, le nombre des colonies augmente beaucoup, et la 

 plupart d'entre elles sont constituées par le diplobacille. 



Le milieu gélose-sérum est fait d'après les indications de 

 Werlheim, en remplaçant le sérum humain par du liquide d'ascite 

 dont la composition est assez constante, et dont il est toujours 

 facile de recueillir de grandes quantités aseptiquement. Je me 

 sers de gélose à 2 0/0 avec 2 0/0 de peptone. Ce milieu doit être 

 neutre, car l'addition de sérosité le rend toujours alcalin. La 

 gélose est distribuée dans des tubes, stérilisée à 115°, puis, lors- 

 que sa température s'est abaissée à 60° environ, on additionne 

 chaque tube d'un tiers de liquide d'ascite, en imprimant au tube 

 quelques mouvements d'inclinaison, pour que le mélange se 

 fasse bien. On place les tubes sur un plan incliné ou on les 

 laisse dans la position verticale, de manière à pouvoir faire les 

 ensemencements en strie ou en piqûre. Lorsque la gélose est 

 solidifiée, on place les tubes 48 heures à l'étuve, pour s'assurer 

 qu'aucune impureté ne s'est introduite pendant la manipulation. 

 On confectionne d'avance un grand nombre 'de ces tubes de 

 gélose- sérum qui se prêtent à la culture de nombreux micro- 

 organismes humains (gonocoque, bacille de Weeks, etc.). 



Ensemencée en strie sur les tubes de gélose-sérum inclinés, la 

 sécrétion de la conjonctivite subaiguëy provoque, après 24 heures 

 de séjour à l'étuve à 35°, le développement de nombreuses colo- 

 nies formant de petites taches grisâtres à peine visibles ; ces 

 colonies transparentes sont un peu plus opaques cependant que 

 les colonies du pneumocoque de Talamon-Fraenkel, avec les- 

 quelles on pourrait les confondre. Les jours suivants, la colonie 

 s'étale, et son diamètre peut atteindre 2 à 3 millimètres en 5 à 6 

 jours. Ces colonies étalées ont des contours festonnés et affec- 

 tent souvent une disposition concentrique assez irrégulière. Les 

 bords en sont toujours plus transparents que le centre, dont la 

 saillie n'est jamais très marquée. 



Dans tous les cas de conjonctivite subaiguë, il m'a été facile de, 

 faire l'isolement du diplobacille par simple ensemencement en 

 strie ; on peut d'ailleurs aussi recourir à la méthode des plaques 

 de gélose-sérum en suivant la technique indiquée par Wertheim 

 pour le gonocoque. 



24 heures après l'ensemencement, on distingue déjà des colo- 

 nies de profondeur formant de petits points opaques et des 



