2:iO ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUH 



de la variété pyocyanogr-no. Ces transformation et combinaison 

 des pigments spécifiques dans une culture un peu ancienne 

 font comprendre que leur dissolvant de choix, le chloroforme, 

 ne décèle d'ordinaire Irace d'aucun d'eux, môme après une 

 macération prolongée avec la gélose rougie. 



Je reproduirai ici (I) les réactions de la pyoxanthose. inoins connues et 

 moins pratiquées que celles de la pyocyanine ; celles-ci se trouveront rappe- 

 lées j, ai - i a même occasion. J'en ferai ensuite (II) l'application à la recherche 

 et à la démonstration de la pyoxanthose dans la combinaison où j'ai admis 

 qu'elle était engagée et pouvait contribuer à la coloration finale des cultures. 



I. La pyoxanthose s'obtient par oxydation de la pyocyanine. Pour cela, la 

 liqueur bleue que le chloroforme a fournie par traitement d'une culture 

 pyocyanique est agitée avec une eau acidulée (à 1 p. 100, SOU 2 ), ce qui met la 

 pyocyanine en solulion acide, rougie en vertu de la réaction caractéristique 

 de ce principe. Cette solution ramenée au bleu par un alcali (NaOH . plutôt 

 en léger excès en vue de l'opération qui suit, est doucement chauffée jusqu'à 

 ce qu'elle vire au violet: c'est la couleur de réaction aux alcalis de la 

 pyoxanthose née de la pyocyanine oxydée par ce traitement. L'addition 

 d'un acide SO'IP) décolore le violet : le jaune de la pyoxanthose se voit au 

 point d exacte neutralité de la liqueur, qu'un excès d'acide ferait virer au 

 rouge particulier de la réaction de la pyoxanthose aux acides. Jaune ou 

 rouge, c'est-à-dire neutre ou acide, la liqueur agitée avec le chloroforme lui 

 cède la pyoxanthose jaune, que reprendrait, au contraire, au chloroforme 

 une eau alcaline, en reconstituant la solution violette du début, (l'est donc 

 l'inverse des réactions de la pyocyanine aux dissolvants, laquelle passe, 

 comme on a vu, de milieu alcalin en chloroforme, auquel une eau acide la 

 reprend, étant assimilable aux bases, alors que la pyoxanthose lest aux 

 acides. 



A propos de ces états successifs, signalons l'adaptation possible à des 

 dosages colorimétriques des solutions de pyocyanine, soit bleue dans le chlo- 

 roforme, soit rouge, qui a l'avantage d'être plus stable, dans l'eau acidulée. 

 celle-ci représentant intégralement le titre de la solution chloroformique 

 qu'elle dépouille entièrement de sa pyocyanine. Cependant l'évaporation du 

 chloroforme eût d'abord fourni matière à un dosage par pesée en laissant la 

 pyocyanine en nature, à l'état cristallisé. 



IL Lue culture de bacille pyocyanique type sur gélose-peptone glycérinée 

 datant de dix mois et restée d'un beau rouge, mise à macérer dans du chlo- 

 roforme, ne lui a rien cédé au bout de vingt-quatre heures. Le chloroforme 

 étant alors décanté, la masse gélosée est mise à digérer dans environ 

 15 cent, cubes d'eau, une demi-heure, au bain-marie bouillant. Après cette 

 opération, un tiers du produit prélevé, agité avec du chloroforme, ne le 

 colore toujours pas. Un second tiers est donc additionné d'acide sulfurique 

 jusqu'à titrer 1 p. 100 et subit le même traitement par la chaleur que précé- 

 demment, en même temps que le restant du liquide qui n'a d'addition d'aucune 

 sorte et qui sert de témoin. Après quoi, par agitation avec le chloroforme, ce 

 dernier écbnntillon ne donne pas plus de couleur que lors du premier essai, 

 cependant que la liqueur acide cède au chloroforme de la pyoxanthose jaune, 

 libérée de la combinaison qui la retenait jusque-là dans le milieu de culture. 



