ACTION DU SÉRUM SA.NGl IX SUR LES FIÏGTÉASES 659 



A) Choix de la bactérie. — Parmi plusieurs échantiHons 

 d'une même espèce bactérienne, il convient de choisir celui <|iii 

 fournit lu protéase la pins active. 



Le procédé que j'ai employé pour ce choix, procédé rapide 

 et que l'expérience justifie, résulte de l'observation suivante : 

 Quand on ensemence sur gélatine puritiée (par cPral'yse) 

 non additionnée d'aucun autre milieu nutritif des bactéries 

 d'espèces variées, seules les bactéries protéolytiques peuvent 

 pousser ; parmi celles-ci poussent le plus rapidement, en 

 liquéfiant le milieu, les bactéries fortement protéolytiques. 



Soit, par exemple, à différencier au point de vue de leur 

 valeur gélatinolylique quelques échantillons d'une espèce bac- 

 térienne. 



On prépare les trois milieux suivants : 



Milieu I. . . Gélatine à 10 p. 100 dialysée. 3 parties. 



^ (lélatine à 10 p. 100 dialysée. 2 — 



} Bouillon peplone 1 



$ Gélatine à 10 p. 100 dialysée. 1 — 



( Bouillon peplone 2 



Milieu II 

 Milieu III 



On répartit 3 cent, cubes de chacun de ces milieux dans des 

 tubes à hémolyse, on laisse refroidir jusqu'à i0°; on ensemence 

 un tube de chaque milieu avec une forte ose d'une culture de 

 dix-huit heures en bouillon peptone de chaque bactérie à diffé- 

 rencier. En résumé, le procédé consiste à ensemencer avec 

 chaque bactérie un milieu de plus en plus pauvre en sels et en 

 substances protéiques dégradées et, vise versa, de plus en plus 

 riche en gélatine purifiée, substance relativement sensible à 

 l'action des protéases microbiennes, mais inadéquate — sauf 

 hydrolyse cliastasique — au développement microbien. 



Après vingt-quatre heures d'étuve à 37°, on note les résultats. 

 Habituellement tous les tubes du milieu III ont cultivé plus ou 

 moins. 



Si rien n'a poussé dans les milieux I et II, on laisse à nouveau 

 vingt-quatre heures à l'éluve et ainsi de suite. 



Quand les cultures sont évidentes, on note : 



1° Les résultats positifs et les résultats négatifs ; 



2° Parmi les résultats positifs on note les tabès pour lesquels 

 le refroidissement du milieu à 10° n'en provoque plus la géli/i- 

 cation. 



