UTILISATION DES AMIDES PAR LA LEVUKE 799 



fions. J'ai alors fait des culluros dans le milieu à urée, en pré- 

 sence de carbonate de calcium en léger excès, en agitant assez 

 fréquemment, de manière à saturer les acides produits par la 

 levure el à maintenir la neutralité. Le résultat a été le 

 même. 



Il faut donc en conclure que, si la levure secrète de l'uréase, 

 cette diastase ne diffuse pas dans le milieu. Ce résultat était 

 d'ailleurs à prévoir, puisque les cultures faites en présence 

 d'urée, même très âgées, contiennent toujours un excès d'urée 

 et ne montrent pas la présence d'ammoniaque. 



On pouvait espérer que la levure tuée par un antiseptique 

 laisserait diffuser la diastase si celle-ci est présente dans les 

 cellules. Afin de le vérifier, j'ai pris deux ballons Fernbach 

 contenant du milieu minéral glucose et je les ai stérilisés par 

 chauffage après avoir introduit dans l'un S grammes de carbo- 

 nate de calcium et dans l'autre gr. 30 d'acide tartrique (soit 

 0,1 p. 100). Les deux ballons ont reçu après refroidissement la 

 même quantité d'une solution d'urée stérilisée par fillration et 

 ont été ensemencés, puis abandonnés à l'étuve. On agite chaque 

 jour et on fait dn temps à autre des prélèvements en prenant 

 toutes les précautions d'asepsie nécessaires. A aucun moment 

 le liquide ne donne de réaction positive au Nessler. Au bout de 

 trente jours, on verse dans chaque ballon 1 cent, cube de solution 

 alcoolique de thymol à 10 p. 100 ; les ballons sont conservés à 

 l'étuve à 23°, à l'obscurité, et on continue à effectuer des pré- 

 lèvements de temps à autre. Le résultat est toujours négatif : 

 c'està peine si, après plusieurs semaines, le liquide prélevé donne 

 après distillation, une légère coloration jaune avec le réactif de 

 Nessler. Il n'y a donc pas eu de dédoublement de l'urée présente. 



Ces essais ont élé renouvelés avec diverses levures de vin, de 

 bière haute et basse, ensemencées dans des milieux à urée : on 

 a essayé d'ajouter le thymol après des temps variables, sans 

 jamais obtenir un seul résultat positif. 



11 semble donc que la diastase cherchée, si elle existe dans 

 la levure, ne diffuse pas dans le milieu. Il ne restait plus qu'à 

 la chercher dans le suc cellulaire lui-même, en employant la 

 méthode de Buchner-Hahn. 



Dans ce but, j'ai cherché à préparer une certaine quantité de 

 levure développée sur un milieu à urée. M. A. Fernbach a bien 



