REVUES ET ANALYSES. 333 



la méthode Esmairli, et faire rouler sur la paroi intérieure du tube la gélatine 

 ensemencée jusqu'à ce qu'elle y fasse prise, laissant ainsi un vide central 

 qu'on remplit avec de la gélatine stérile. Ici le mécanisme invoqué plus 

 haut intervient encore pour protéger les couches profondes, mais il ne pro- 

 tège que ces couches. Les microbes anaérobies que l'enrobage de la gélaline 

 a amenés près de la surface ont le contact de l'oxygène, et, à l'usage, cette 

 pratique s'est montrée inférieure à ce qu'on en attendait. 



Griiber', sans se laisser arrêter par les scrupules ([ue nous signalions 

 tout à l'heure chez M. C. Freenkel, est alors courageusement revenu à l'em- 

 ploi de la pompe à air. 11 effile un tube à essai à environ 13 centimètres du 

 fond, le bouche avec de la ouate, le stérilise, et y fait arriver au moyen d'un 

 entonnoir capillaire un peu de gélatine nutritive, après quoi il stérilise de 

 nouveau. Il ensemence, en enlevant le tauipon de ouate, au moyen d'un fil 

 de platine, fait le vide en portant la gtUatine de 30 à 35" de façon à la 

 faire bouillir, ferme à la lampe, et roule la gélatine en manchon, suivant 

 la méthode d'Esmarch. II est alors très facile d'examiner les colonies dans 

 le tube clos, et de les manipuler en ouvrant l'extrémité fermée à la lampe. 



D'autres méthodes, plus ou moins semblables à celle-là, étaient depuis 

 longtemps en usage au laboratoire de M. Pasteur, quand M. Roux les a 

 publiées dans ces Annales, t. I, p. 49 et t. II, p. 28. MM. 'Vignal-, Nencki^ 

 Rosenbach^ Hufner^, Buchner^, ont proposé d'autres procédés, dont quel- 

 ques-uns basés sur le remplacement de l'air par un gaz inerte. 



Liborius avait déjà fait un pas dans cette voie en faisant barboter de 

 l'hydrogène dans le milieu nutritif, contenu dans un tube muni d'une tubu- 

 lure latérale, et cela jusqu'à élimination des dernières traces d'air. On ferme 

 alors le tout à la lampe et on applique la méthode d'Esmarch. M. Freenkel 

 reproche à cette méthode d'exiger l'emploi d'un tube de verre fait exprès et 

 coûteux. 11 trouve aussi que rien n'est plus difficile que de bien régler le cou- 

 rant d'hydrogène. S'il va trop vite, il y a de la gélatine emportée dans le tube 

 abducteur qui se bouche. S'il va trop lentement, l'opération est très longue. 

 M. Fraenkel s'est donc proposé de trouver une méthode qui réunisse les 

 avantages de celles de Griiber et de Liborius, sans en présenter les inconvé- 

 nients, et qui n'exige en même temps l'emploi d'aucun appareil coûteux ou 

 difficile à remplacer. A ce point de vue, on peut dire qu'il a bien réussi. 



11 se sert en effet d'un simple tube à essai fermé par un bouchon de 

 caoutchouc par lequel passent deux tubes coudés, un tube d'arrivée qui s'en- 

 fonce jusqu'au fond du tube et d'un tube de sortie qui commence au-dessous 

 du bouchon. Ces deux tubes sont au préalable effilés dans leur partie extérieure 

 et fermés avec des tampons de ouate. Le tube à essai et le milieu nutritif 

 ayant été stérilisés convenablement, on fait passer un courant d'hydrogène, 

 obtenu avec du zinc pur et de l'acide sulfurique pur, et lavé, de façon à le 



i. Centralbl., t. I, p. 307. 



2. Annales de l'iiislitat Pasteur, t. I, p. 338. 



3. Archiv. f gesammlc Phijsiol., t. XXXIII. 

 i. Deutsche Zeilsehr. f. Cliir., t. XVL. 



5. Journal f. pralct. (.hem., t. XIII. 



6. Arch. f. Hyg., t. 111. 



