632 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



rie. Ils sont surtout nombreux dans les cas très infectieux, 

 tandis que les autres microbes se rencontrent dans beaucoup 

 d'ang^ines qui n'ont rien de commun avec la diphthérie. 



Pour extraire de ces fausses membranes le bacille- spécifique 

 à l'état de pureté, voici le procédé que nous avons suivi ; il 

 diffère très peu de celui mis en œuvre par M. Lœffler. Avec un 

 fil de platine, on étale à la surface d'un tube de sérum coagulé 

 une petite parcelle de la fausse membrane. Avec le même fil, 

 sans le recharger de semence, on fait plusieurs stries sur diffé- 

 rents tubes de sérum. Dans les tubes ensemencés les premiers il 

 se développe, à la température de 33°, le long des stries, un 

 grand nombre de colonies variées trop rapprochées pour être 

 reconnues, mais dans les tubes semés en dernier lieu les colonies 

 sont assez nettement séparées pour que l'on puisse distinguer 

 parmi elles celles du bacille spécifique. Elles se présentent sous 

 forme de petites taches arrondies, blanc grisâtre, dont le centre 

 est plus opaque que la périphérie. Elles poussent énergique- 

 ment sur le sérum et forment bientôt de petites plaques rondes, 

 grisâtres et saillantes. La rapidité du développement sur le 

 sérum fait que les colonies de ce bacille sont déjà très apparentes 

 avant que les organismes d'impureté aient pullulé. Lorsqu'on 

 a reconnu, au microscope, qu'une colonie est formée de bacilles 

 purs, on la sème de la même façon sur plusieurs tubes de sérum 

 et on obtient ainsi rapidement des cultures pures. 



Les colonies du bacille de la diphthérie croissent plus lente- 

 ment sur la gélose nutritive que sur le sérum, mais elles pren- 

 nent sur ce terrain un aspect très caractéristique. Au lieu de 

 faire des plaques à la façon ordinaire pour séparer les microbes 

 des fausses membranes, nous taisons à la surface de tubes de 

 gélose des ensemencements successifs au moyen du fil de pla- 

 tine, absolument comme nous l'avons décrit pour les tubes de 

 sérum. Le développement sur la gélose se fait bien à 33°. Au 

 bout de 30 à 4-8 heures, sur les tubes semés en dernier lieu, on 

 distingue de petites taches blanches plus épaisses au centre, 

 qui sont des colonies du bacille diphthéritique. 



Le microbe de la diphthérie, ainsi isolé, et coloré au bleu 

 alcalin, comme l'a indiqué M. Lœffler, paraît plus petit que dans 

 les fausses membranes. Il est à peu près de la longueur du 

 bacille de la tuberculose, mais pliis épais; ses extrémités arron- 



